تاثیر تجویز نیکوتین بر میزان بیان ژن گیرنده های آلفا چهار و آلفا هفت نیکوتینی استیل کولین در فیبروز کبدی القا شده توسط انسداد مجرای صفراوی در موش های صحرایی نر نژاد ویستار
The effect of nicotine administration on the gene expression of alpha-4 and alpha-7 nicotinic acetylcholine receptors in liver fibrosis induced by bile duct ligation in male Wistar rats
مجریان: محمدرضا علیپور
خلاصه روش اجرا: فیبروز کبدی یکی از بیماری های شایع انسانی بوده و همه ساله موجب مرگ و میر و اختلال در زندگی هزاران نفر می شود. سیگار کشیدن ممکن است باعث بروز فیبروز کبدی شود، اما مکانیسم های احتمالی درگیر نامشخص است. نیکوتین از طریق گیرنده های نیکوتینی استیل کولین روی سلول ها تأثیر می گذارد. این مطالعه برای بررسی تاثیر تجویز نیکوتین بر روی میزان بیان ژن گیرنده های آلفا چهار و آلفا هفت نیکوتینی استیل کولین در مدل حیوانی فیبروز کبدی اجرا خواهد شد. به این منظور، ابتدا از روش بستن مجرای صفراوی (Bile Duct Ligation) در موش های صحرایی نر نژاد ویستار برای ایجاد مدلی از بیماری فیبروز کبدی استفاده خواهد شد. سپس نیکوتین با دوز 10mg/kg تیمار خواهد شد. در ادامه با استفاده از روش Quantitative Real‐Time PCR تغییرات بیان ژن گیرنده آلفا چهار نیکوتینی، گیرنده آلفا هفت نیکوتینی و میزان بیان ژن α-SMA به عنوان مارکر فیبروز کبدی اندازه گیری خواهد شد. در این روش ابتدا با روش های استاندارد، استخراج RNA صورت گرفته و سپس به آن پرایمر و آنزیم reverse transcriptase افزوده می شود و cDNA تهیه می گردد. پس از تهیه cDNA، PCR انجام خواهد شد. همچنین بررسی بافت شناسی فیبروز کبدی با استفاده از رنگ آمیزی هماتوکسیلین و ائوزین و همچنین رنگ آمیزی ماسون تری کروم مورد مطالعه قرار خواهد گرفت. داده ها توسط نرم افزار prism آنالیز شده و برای مقایسه بین چند گروه ها از آنالیز واریانس یک طرفه استفاده خواهد شد. P<0.05 از لحاظ آماری تفاوت معنادار در نظر گرفته خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 71056 |
| عنوان فارسی طرح | تاثیر تجویز نیکوتین بر میزان بیان ژن گیرنده های آلفا چهار و آلفا هفت نیکوتینی استیل کولین در فیبروز کبدی القا شده توسط انسداد مجرای صفراوی در موش های صحرایی نر نژاد ویستار |
| عنوان لاتین طرح | The effect of nicotine administration on the gene expression of alpha-4 and alpha-7 nicotinic acetylcholine receptors in liver fibrosis induced by bile duct ligation in male Wistar rats |
| نوع طرح | طرح تحقیقاتی |
| اولویت طرح | هپاتیت و سیروز کبدی |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | با توجه به شیوع بالای بیماری فیبروز کبدی و نبود درمان قطعی و مناسب، بررسی و شناخت پاتوژنز این بیماری از دیدگاه مولکولی و سلولی در جهت یافتن روش های درمانی نوین و توسعه عوامل درمانی هدفمند بسیار حائز اهمیت است. بر اساس مطالعات پیشین، نیکوتین یک ترکیب فیبروژنیک است. با این وجود، تاکنون نقش گیرنده های نیکوتینی استیل کولین در فیبروز کبدی و تاثیر نیکوتین بر میزان بیان این گیرنده ها در فیبروز کبدی نامشخص باقی مانده است. هدف از این مطالعه بررسی تاثیر نیکوتین در فرآیند ایجاد فیبروز کبدی و مکانیسم های احتمالی دخیل در آن می باشد. |
| اهداف اختصاصی | بررسی تاثیر ایجاد مدل BDL بر میزان بیان گیرنده آلفا 4 نیکوتینی -بررسی تاثیر ایجاد مدل BDL بر میزان بیان گیرنده آلفا 7 نیکوتینی -بررسی تاثیر ایجاد مدل BDL بر میزان بیان ژنα-SMA -بررسی تاثیر تجویز نیکوتین در مدل BDL بر بیان ژن گیرنده آلفا 4 نیکوتینی -بررسی تاثیر تجویز نیکوتین در مدل BDL بر بیان ژن گیرنده آلفا 7 نیکوتینی -بررسی تاثیر تجویز نیکوتین در مدل BDL بر روی میزان بیان ژن α-SMA در کبد |
| چکیده انگلیسی طرح | Liver fibrosis is one of the most common human diseases, and every year it causes the death of thousands of people. Smoking may cause liver fibrosis, but the possible mechanisms involved are unclear. Nicotine affects cells through nicotinic acetylcholine receptors. This study will be conducted to investigate the effect of nicotine administration on the gene expression of alpha-4 and alpha-7 nicotinic acetylcholine receptors in an animal model of liver fibrosis. For this purpose, first, the method of closing the bile duct (Bile Duct Ligation) will be used in male Wistar rats to create a model of liver fibrosis. Then, nicotine will be treated with a dose of 10 mg/kg. Next, using the Quantitative Real-Time PCR method, changes in the expression of the alpha-4 nicotinic receptor, alpha-7 nicotinic receptor, and the level of α-SMA gene expression will be measured as a marker of liver fibrosis. In this method, RNA will have extracted with standard protocols, and then primer and reverse transcriptase enzyme will have added to it, and cDNA will be prepared. Also, the histology of liver fibrosis will be studied using hematoxylin and eosin staining as well as Masson's trichrome staining. After preparing the cDNA, PCR will be performed. The data was analyzed by prism software and a one-way analysis of variance will be used to compare several groups. P<0.05 will be considered a statistically significant difference. |
| کلمات کلیدی | فیبروز کبدی: نوعی بیماری کبد می باشد که در اثر ترمیم زخم بیش از حد در این بافت بروز می کند و در آن بافت همبند اضافی در کبد ایجاد می شود. Bile Duct Ligation (BDL): بستن مجرای صفراوی یک روش جراحی است که برای القای فیبروز کبدی استفاده می شود. Alpha 4 nicotinic acetylcholine receptor (a4nAChR): یکی از انواع گیرنده های استیل کولینی نیکوتین در بدن می باشد. Alpha 7 nicotinic acetylcholine receptor (a7nAChR): یکی از انواع گیرنده های استیل کولینی نیکوتین در بدن می باشد. quantitative Real Time polymerase chain reaction (qRT-PCR): روشی برای بررسی میزان بیان mRNA ژن های مختلف می باشد. α-smooth muscle actin (α-SMA): نشانگر ویژه برای جمعیت فیبروبلاست فعال شده است یا میوفیبروبلاست ها است که تولید کلازن و بافت فیبروزی را بر عهده دارند. |
| ذینفعان نتایج طرح | بیماران مبتلا به بیماری فیبروز کبدی و محققان حوزه دارویی برای طراحی داروهای جدید برای این بیماری |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| محمدرضا علیپور | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
| خلیل حاجی اصغرزاده | همکار اصلی |
| پرویز شهابی | همکار اصلی |
| الهام کریمی ثالث | همکار اصلی |
| سجاد جدی | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر مواجهه با نیکوتین موجود در دود سیگار می تواند منجر به تشدید بیماری فیبروز کبدی در موش گردد.متن خبر کبد به عنوان یک عضو حیاتی، نقش مهمی در بسیاری از عملکرد های حیاتی بدن ایفا می کند. در جوامع امروزی به علت سبک زندگی مدرن، مصرف داروهای دارای عوارض کبدی و مواجهه افراد با سموم محیطی شیوع بیماریهای کبدی از جمله فیبروز کبدی افزایش یافته است.
در این مطالعه، اثر تجویز نیکوتین در یک مدل حیوانی فیبروز کبدی ارزیابی شد. بر اساس نتایج، تزریق نیکوتین در موشهای بزرگ آزمایشگاهی مبتلا به بیماری فیبروز، باعث تشدید تغییرات بافت شناسی مرتبط با فیبروز کبدی، افزایش میزان بیان ژنهای مربوط به مارکر فیبروز کبدی و گیرنده های نیکوتینی در کبد شد. بنابراین، مواجهه با نیکوتین می تواند باعث تشدید بیماری فیبروز کبدی گردد.
در نهایت، به افراد مبتلا به مشکلات کبدی توصیه می گردد که با در نظر گرفتن نقش قابل توجه نیکوتین موجود در دود سیگار در آسیب کبدی و تشدید بیماری فیبروز کبدی، از استعمال دخانیت پرهیز کنند. به مسئولین مربوطه نیز توصیه می گردد با توجه به رواج استفاده از سیگارهای الکترونیکی که حاوی غلظت بالایی از نیکوتین هستند، با فروش و عرضه این نوع سیگارها برخورد نموده و در این زمینه اطلاع رسانی به مردم صورت گیرد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
