بررسی اثر miR145 , miR155 بر روی بیان SKI در سلولهای Namalawa در لوسمی لنفوبلاستیک
The effect of miR145, miR155 on SKI expression in Namalawa cells in lymphoblastic leukemia
مجریان: سیامک صندوقچیان , بابک صندوقچیان
خلاصه روش اجرا: بیماری لوسمی لنفوسیتی حاد (ALL) ، نوعی سرطان خون و مغز استخوان (بافت اسفنجی داخل استخوان که در آن سلول خونی ساخته می شود) است. جهت بررسی بررسی اثر miRNA-145 و miRNA-155 بر روی بیان ژن SKI در لوسمی لنفوبلاستیک، ابتدا ردههای سلولی NAMALWA مربوط به لوسمی لنفوبلاستیک ، از انستیتو پاستور ایران تهیه و در محیط کشت RPMI حاوی 10% FBS، در دمای C ˚37 و میزان 5% CO2 کشت داده می شوند تا به تراکم مورد نظر از لحاظ تعدادی برسند. در ادامه هر یک از ردههای سلولی به طور جداگانه با توالی های میمیک miRNA-145 و miRNA-155 به کمک روش الکتروپوریشن ترانسفکت میگردند. میزان ترانسفکش و افزایش بیان miRNA-145 و miRNA-155 با روش qRT-PCR و پرایمرهای stem-loop بررسی خواهد شد تا حالت بهینه ترانسفکشن انتخاب گردد. سپس سلولها با مقادیر بهینه از توالیهای mimic برای miRNA-145 و miRNA-155 تیمار خواهند شد و با روش MTT میزان تکثیر و زنده مانی سلولی ارزیابی خواهد شد. همچنین توسط تست qRT-PCR، میزان بیان ژن SKI که در مسیرهای تکثیر، آپوپتوز سلولی نقش دارد، ارزیابی خواهد شد. به این منظور پس از تیمار سلول ها با microRNA، سلولها جمع آوری گردیده و total RNAی مربوط به گروه های تیمار توسط Trizol استخراج میگردد. پس از بررسی کیفیت و غلظت RNA استخراج شده توسط نانودراپ، با استفاده از کیت سنتز cDNA، رشتهی مکمل سنتز و میزان بیان ژن ها با روش Real-time PCR بررسی خواهد شد. همچنین برای مقایسه آماری بین گروه های مختلف از برنامه ی GraphPad prism و آزمون های t-test و ANOVA استفاده خواهد شد. با سلام رده سلولی طبق رفرانس ها برای لنفوبلاستیک درست میباشد در این طرح نیز موضوع لنفوبلاستیک میباشدلینک رفرانس در زیر آورده شده است. https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0022175905000815?via%3Dihub
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا در دانشکده/مرکز |
| کد طرح | 70076 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثر miR145 , miR155 بر روی بیان SKI در سلولهای Namalawa در لوسمی لنفوبلاستیک |
| عنوان لاتین طرح | The effect of miR145, miR155 on SKI expression in Namalawa cells in lymphoblastic leukemia |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | اپیدمیولوژی، پیشگیری، تشخیص زودهنگام، درمان و بازتوانی در سرطانهای شایع |
| نوع مطالعه | مطالعه مورد/شاهد ( Case - Control ) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دکتری عمومی |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | ژن درمانی بیماران سرطانی و کاهش هزینه درمان کموتراپی و کاهش عوارض این دارو ها |
| اهداف اختصاصی | ) بررسی افزایش بیان miR-145 و miR-155 پس از ترانسفکت سلول­های JM-1 و NAMALWA با توالی­های mimic miR145 و mimic miR-155 -بررسی اثر miR-155,miR-145 در تکثیر رده سلولی Namalawa -بررسی اثر افزایش بیان miR-145 و miR-155 بر بیان ژن SKI در رده¬های سلولی JM-1 و NAMALWA |
| چکیده انگلیسی طرح | Acute lymphocytic leukemia (ALL) is a type of cancer of the blood and bone marrow (the spongy tissue inside the bone where blood cells are made). In order to investigate the effect of miRNA-145 and miRNA-155 on the expression of SKI gene in lymphoblastic leukemia, first, NAMLWA cell lines related to lymphoblastic leukemia were obtained from Pasteur Institute of Iran and cultured in RPMI medium containing 10% FBS, at 37°C and The amount of 5% CO2 is cultivated to reach the desired density in terms of number. Next, each of the cell lines are transfected separately with miRNA-145 and miRNA-155 mimic sequences using the electroporation method. The amount of transfection and increased expression of miRNA-145 and miRNA-155 will be checked by qRT-PCR and stem-loop primers to select the optimal mode of transfection. Then the cells will be treated with optimal amounts of mimic sequences for miRNA-145 and miRNA-155, and cell proliferation and viability will be evaluated by MTT method. Also, by qRT-PCR test, the expression level of SKI gene, which plays a role in cell proliferation and apoptosis, will be evaluated. For this purpose, after treating the cells with microRNA, the cells are collected and the total RNA related to the treatment groups is extracted by Trizol. After checking the quality and concentration of RNA extracted by nanodrop, using the cDNA synthesis kit, a complementary strand will be synthesized and the expression level of genes will be checked by Real-time PCR method. Also, GraphPad prism program and t-test and ANOVA tests will be used for statistical comparison between different groups. |
| کلمات کلیدی | بیماری لوسمی لنفوسیتی حاد (ALL) ، نوعی سرطان خون و مغز استخوان (بافت اسفنجی داخل استخوان که در آن سلول خونی ساخته می شود) است. miR125:MicroRNA-125 (miR-125) یک خانواده microRNA بسیار حفاظت شده است که از miR-125a و miR-125b تشکیل شده است. mIR145: در زیست شناسی مولکولی، microRNA mir-145 یک مولکول RNA کوتاه است که در انسان توسط ژن MIR145 کدگذاری می شود. |
| ذینفعان نتایج طرح | بیماران لوسمی |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| فاطمه جلیلیان | دانشجوی مالک پایان نامه |
| سیامک صندوقچیان | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| بابک صندوقچیان | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| بهزاد برادران | همکار اصلی |
| عطا محمودپور | مشاور |
| جواد محمودی | مشاور |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
