اندازه گیری سلول های CTC (Circulating tumor cells) با استفاده از نانوذرات هوشمند مهندسی شده با کونکاناوالین A
Detection of Circulating tumor cells using Concanavalin A engineered smart nanoparticles
مجریان: جعفر سلیمانی
خلاصه روش اجرا: مراحل انجام تحقیق به طور کلی شامل موارد زیر می باشد: 1- سنتز نانو مواد هوشمند 1.1 سنتز نانوذرات فلورسانس دار بر پایه نقاط کربنی برای این کار، 1گرم o-PD در 100میلی لیتر آب حل می شود سپس به اتوکلاو تفلونی انتقال داده می شود و تا 12 ساعت در دمای 180 درجه سانتی گراد در آون الکتریکی نگهداری می شود. بعد از سرد شدن تا دمای اتاق ، مخلوط فوق سانتریفیوژ شده در نتیجه نانوذرات مورد نظر جمع آوری می شود. نانوذرات بدست آمده با آب فوق خالص شسته می شود و به مدت یک شبانه همزده می شود و در نهایت مخلوط سانتریفیوژ می شود. 1.2 سنتز نانوذرات طلا بطور خلاصه، 50 میلی لیتر HAuCl4 (0.5 میلی مول) باهم مخلوط شده و تحت شرایط رفلاکس گرم و سپس جوشانده می شود. 5 میلی لیتر محلول سدیم سیترات (38.8 میلی مول) به مخلوط فوق اضافه می شود که با اضافه شدن این محلول رنگ مخلوط از زرد به رنگ سیاه تغییر می کند که در نهایت رنگ مخلوط قرمز شرابی می شود. همزدن مخلوط تا تغییر رنگ به قرمز شرابی ادامه پیدا می کند. درنهایت مخلوط با سرنگ hydrophilic Millipore با اندازه ی 0.22 میلی متر صاف می شود. 1.3 عامل دار کردن نانوذرات طلا با کونکاناوالین آ نانوپروب با اضافه کردن 40 میکرولیتر از 0.02 میلی گرم بر میلی لیتر محلول کونکاناوالین آ به 120 میکرولیتر از 2 میلی گرم بر میلی لیتر نانوذرات طلا آماده می شود. مخلوط برای 60 دقیقه در دمای اتاق به آرامی همزده و برای جداسازی کونکاناوالین اضافی سانتریفیوژ می شود سپس در PBS دیسپرس می شود. در نهایت محلول در 5000 (rpm)سانتریفیوژ شده و رسوب در محلول PBS دیسپرس می شود. 1.4 غیر فعالسازی سطح فعال 2- جداسازی برای این کار از BSA استفاده خواهد شد. BSA آلبومین سرگاوی می باشد که بطور گسترده به عنوان یک افزودنی به محیط های کشت سلولی بدون سرم اضافه می گردد و یکی از استفاده های آن برای جداسازی می باشد. 2.1 جداسازی سلول از خون این کار با استفاده از وسیله ای که توسط دستگاه MEMS ساخته خواهد شد، انجام خواهد یافت. 2.2 جمع آوری نمونه در میکروتیوب 3- اندازه گیری توسط دستگاه فلورسانس نمونه ی مورد نظر در میکروتیوب جمع آوری شده و با دستگاه فلورسانس اندازه گیری می شود. پس از جداسازی سلول های CTC از خون با نانوذرات فلورسانس دار، شدت فلورسانس با دستگاه اندازه گیری خواهد شد. برای آنالیز کمی، ابتدا منحنی کالیبراسیون با میزان مشخصی از سلول ها رسم خواهد شد و سپس داده های متغیرسازی از آن ها استخراج خواهد شد. جهت سنجش کارایی روش، غلظت های نامشخصی از سلول ها با روش موردنظر اندازه گیری و صحت آن بررسی و گزارش خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 67984 |
| عنوان فارسی طرح | اندازه گیری سلول های CTC (Circulating tumor cells) با استفاده از نانوذرات هوشمند مهندسی شده با کونکاناوالین A |
| عنوان لاتین طرح | Detection of Circulating tumor cells using Concanavalin A engineered smart nanoparticles |
| نوع طرح | گرنت پژوهشی |
| اولویت طرح | اپیدمیولوژی، پیشگیری، تشخیص زودهنگام، درمان و بازتوانی در سرطانهای شایع |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | حدود 90٪ از مرگ بیماران سرطانی ناشی از مهاجرت و گسترش سلولهای توموری است که از محل اولیه جدا شده و وارد جریان خون و غدد لنفاوی می شوند. به این سلول ها CTC گفته می شود که به عنوان یک نشانگر زیستی مهم برای تشخیص متاستاز، درمان و پیش بینی بیماری در نظر گرفته می شوند. CTC ها می تواند اطلاعات مهمی در مورد ناهمگنی تومور و جهش های ژنتیکی که مکانیسم های مقاومت متاستاتیک و دارویی سرطان را شروع می کنند، بدهد و بصورت منفرد یا خوشه ای مهاجرت می کنند که این مهاجرت یک رویداد اولیه در پیشرفت سرطان است، بنابراین تشخیص CTC در تشخیص زودهنگام تومورهای بدون علامت، یک پدیده ی حیاتی است. |
| اهداف اختصاصی |
جداسازی و تعیین مقدار سلولها |
| چکیده انگلیسی طرح | Like other diseases, early-stage detection of cancer is very advantageous. The biomarker-based diagnosis i.e. protein markers, circulating tumoral cells (CTCs), etc. is one of the best ways to detect cancer in its earlier stages. While we need high sensitive detection methods or devices for early-stage detection, the development of devices to concentrate and detect these biomarkers is of great importance in the biomedical community. In this work, a microfluidic system will fabricate and use to isolate cancer cells, while the fluorescence method will apply to quantify the CTCs. All parameters will be optimized to reach the maximum signal-to-noise ratio. |
| کلمات کلیدی | سرطان، تشخیص زود هنگام |
| ذینفعان نتایج طرح | بیماران، پزشکان |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| جعفر سلیمانی | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر نانومواد فلوئورسانس دار مغناطیسی عاملدار شده با فولیک اسید می تواند عکسبرداری از سلولهای سرطانی مورد استفاده قرار گیرد.متن خبر جراحی و برداشتن تومور یکی از راههای اصلی درمان سرطان می باسد. در علم پزشکی تعیین محل و محدوده دقیق تومور یکی از فاکتور های مهم در موفقیت جراحی برخوردار می باشد. تعیین محل دقیق تومورها با روش های مختلفی انجام می شود که در برخی موارد با سختی هایی همرا بوده و ممکن است منجر با اشتباهاتی بشود. در پروژه انجام شده، از نانوذرات مغناطیس پلی دوپامین عامل دار شده با رودامین و فولیک اسید جهت عکسبرداری هدفمند از سلولهای سرطان سینه استفاده شده است. طی آزمایشات انجام گرفته مشخص شد که نانومواد تولید شده می تواند با صحت بالایی سلولهای سرطانی را از سلولهای سالم تشخیص داده و محل توده سلولها را مشخص کند. با انجام آزمایشات حیوانی و انسانی می توان از مواد تولید شده در تصویربرداری استفاده کرد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
