بررسی تاثیر داروی هیدروکسی کلروکین بر پارامترهای رفتاری، هیستوپاتولوژی، بیوشیمیایی و سطوح آلفا-سینوکلئین مغز در مدل پارکینسون القاء شده توسط 6-هیدروکسی دوپامین در موشهای صحرایی نر بالغ
Evaluation of the effects of hydroxychloroquine on behavioral, histopathological, biochemical, and alpha-synuclein levels of the brain in 6-hydroxy dopamine-induced Parkinson's model in adult male rats
مجریان: گیسو محدث
خلاصه روش اجرا: بیماری پارکینسون (PD)، یک اختلال نورودژنراتیو می باشد که با از درست رفتن نورون های دوپامینرژیک در ناحیه جسم سیاه بوجود می آید. یکی از مهمترین فاکتور های مستعد کننده این بیماری افزایش سن می باشد، زیرا روند پیری آثار منفی گسترده ای را بر روی مکانیسم و فعالیت های سلولی می گذارد که از عوامل مستعد کننده بیماری های نورودژنراتیو مانند پارکینسون می باشد. در این مطالعه از 40 سر موش صحرایی نر بالغ نژاد ویستار با وزن تقریبی 20±250 گرم، استفاده خواهد شد. موش ها به طور تصادفی به 5 گروه مساوی: 1-شاهد سالم (به میزان 1 ml/kg روزانه نرمال سالین به صورت گاواژ)، 2-گروه پارکینسون(به میزان 1 ml/kg روزانه نرمال سالین به صورت گاواژ)، 3-گروه شم جراحی (باز و بسته کردن ناحیه جراحی بدون تزریق دارو)، 4-گروه کنترل مثبت (لوودوپا 12 mg/kg ، 21 روز به صورت گاواژ)،5-گروه تیمار با هیدروکسی کلروکین (mg/kg 100، 21 روز به صورت گاواژ) تقسیم خواهند شد. جهت ایجاد مدل پارکینسون به صورت تزریق تک دوز -OHDA6 داخل ناحیه جسم سیاه به میزان کلی 5/12 میکروگرم در 5 میکرولیتر برای هر سر موش تزریق خواهد شد. جهت تایید بیماری، تست های میله و چرخش با آپومرفین انجام خواهد شد. در پایان حیوانات با تزریق کتامین و زایلازین بیهوش شده از ورید دمی خونگیری و پس از سانتریفیوژ جهت سنجش ظرفیت تام آنتی اکسیدانی (TAC) اتفاده خواهد شد. سپس سر حیوان توسط گیوتین جدا شده و مغز حیوانات خارج خواهد شد. جهت مطالعه سطح فعالیت آنتی اکسیدانی بافت مغز، پس از هموژناسیون بافت، سطح فعالیت آنتی اکسیدان های گلوتاتیون پراکسیداز (GPx)، سوپراکسید دیسموتاز (SOD) و همچنین میزان شاخص پراکسیداسیون چربی (MDA) سنجش خواهد شد. پس از تهیه لام هیستوپاتولوژی از بافت مغز موش ها، با رنگ کرزیل ویوله رنگ آمیزی شده و شمارش کمی نورون های ناحیه ی بخش متراکم جسم سیاه صورت خواهد گرفت. میزان پروتئین آلفا-سینوکلئین مغز موش ها نیز با استفاده از تکنیک وسترن بلات سنجش خواهد شد. داده های بدست آمده به صورت mean±S.E.M ارائه و اختلاف معنی دار بین گروه ها توسط آزمون یک طرفه ANOVA و آزمون تعقیبی مناسب توسط نرم افزار Graphpad Prism انجام خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 67457 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی تاثیر داروی هیدروکسی کلروکین بر پارامترهای رفتاری، هیستوپاتولوژی، بیوشیمیایی و سطوح آلفا-سینوکلئین مغز در مدل پارکینسون القاء شده توسط 6-هیدروکسی دوپامین در موشهای صحرایی نر بالغ |
| عنوان لاتین طرح | Evaluation of the effects of hydroxychloroquine on behavioral, histopathological, biochemical, and alpha-synuclein levels of the brain in 6-hydroxy dopamine-induced Parkinson's model in adult male rats |
| نوع طرح | طرح تحقیقاتی |
| اولویت طرح | سالمندی (پارکینسون، آلزایمر و استئوپروز) |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | با توجه به شایع بودن بیماری های نورودژنراتیو همچون پارکینسون، بررسی و ارزیابی روشهای درمانی و داروهای مناسب برای کنترل این بیماری نورولوژیکی اهمیت زیادی دارد. داروهای در دسترس تنها در برخی موارد موثر بوده اند و در بسیاری از بیماران این داروها بی اثر بوده یا بطور ضعیفی تحمل می شوند. از آنجا که اثرات نوروژنزیس و بهبود دهنده داروی هیدروکسی کلروکین در این بیماری پیش از این ثابت شده است، دراین مطالعه برای اولین بار تاثیر داروی هیدروکسی کلروکین بر پارامترهای رفتاری، هیستوپاتولوژی، بیوشیمیایی و آلفا-سینوکلئین در بیماری پارکینسون القاء شده توسط 6-هیدروکسی دوپامین (-OHDA6) در مغز موشهای صحرایی نر بالغ را مورد ارزیابی قرار می دهیم. |
| اهداف اختصاصی |
تعیین اثرات داروی هیدروکسی کلروکین بر شاخص های استرس اکسیداتیو، در مدل پارکسینون القا شده با 6-هیدروکسی دوپامین در موش های صحرایی نر بالغ -تعیین اثرات داروی هیدروکسی کلروکین بر آسیب های هیستوپاتولوژیک جسم سیاه در مدل پارکسینون القا شده با 6-هیدروکسی دوپامین در موش های صحرایی نر بالغ -تعیین اثرات داروی هیدروکسی کلروکین بر سطح پروتئین آلفا سینوکلئین مغز در مدل پارکسینون القا شده با 6-هیدروکسی دوپامین در موش های صحرایی نر بالغ |
| چکیده انگلیسی طرح | Parkinson's disease (PD) is a neurodegenerative disorder that results from the breakdown of dopaminergic neurons in the substantia nigra. One of the most important predisposing factors for this disease is aging because the aging process has a wide range of negative effects on cellular mechanisms and activities, which are predisposing factors for neurodegenerative diseases such as PD. In this study, 40 adult male Wistar rats weighing approximately 250± 20 g will be used. Mice were randomly divided into 5 equal groups: 1- healthy control (1 ml/kg daily of normal saline by PO), 2- Parkinson's group (1 ml/kg daily of normal saline by PO), 3- surgical sham group (opening and closing the surgical area without injection), 4-Positive control group (levodopa 12 mg/kg, 21 days PO), 5- Hydroxychloroquine treatment group (100 mg/kg po, 21 days)will be divided. To induce the PD model, a single dose of 6-OHDA will be injected into the substantia nigra in a total amount of 12.5 ug per 5 uL per mouse head. To confirm the disease, Bar and rotation tests will be performed with apomorphine. Finally, the animals will be anesthetized by IV injection of ketamine and xylazine and, and a blood sample will be centrifuged to measure the total antioxidant capacity (TAC). The animal's head is then decapitated and the brain will be removed. To study the level of antioxidant activity of the brain tissue, after tissue homogenization, the level of antioxidant activity of glutathione peroxidase (GPx), superoxide dismutase (SOD), and also the amount of lipid peroxidation (MDA) will be measured. After preparing a histopathological slide from the brain tissue of animals, it will be stained with Crysel violet and the number of neurons in the substantia nigra. The amount of alpha-synuclein protein in the brains of rats will also be measured using the Western blotting method. The obtained data are presented as mean ± S.E.M and significant differences between groups will be done by one-way ANOVA test and appropriate post hoc test by Graphpad Prism software. |
| کلمات کلیدی | هیدروکسی کلروکین:هیدروکسی کلروکین دارویی است که به منظور درمان انواع معینی از مالاریا(مالاریای حساس به کلروکین) به کار میرود؛ از دیگر کاربردهای این دارو میتوان به درمان روماتیسم مفصلی، لوپوس اریتماتوس، و porphyria cutanea tardaاشاره نمود. این دارو معمولا به شکل قرص خوراکی موجود است. 6-هیدروکسی دوپامین: یا ۲،۴ و ۵ - تریهیدروکسیفنتیلآمین یک نوروتاکسین دوپامینرژیک و نورآدرنرژیک است. این ماده برای ایجاد پارکینسونیسم در موشها و میمونها و استفاده از آنها در مطالعات برای درمان پارکینسونیسم در انسان کاربرد دارد. |
| ذینفعان نتایج طرح | بیماران پارکینسونی |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| سید زانیار اطهری | مجری دانشجویی(کمیته تحقیقات دانشجویی) |
| گیسو محدث | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
| سعید صدیق اعتقاد | همکار اصلی |
| فرشته فرج دخت | همکار اصلی |
| میر علیرضا نورآذر | همکار اصلی |
| داریوش مهاجری | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر هیدروکسی کلروکین منجر به بهبود علائم پارکینسون در مدل موش صحرایی شد.متن خبر بیماری پارکینسون با تخریب نورونهای دوپامینرژیک در جسم سیاه ایجاد می شود. این بیماری درمان قطعی ندارد و درمان های مطرح علامتی هستند. هیدروکسی کلروکین از سد خونی مغزی عبور و محافظت عصبی را القاء می¬کند. این مطالعه اثرات هیدروکسی¬کلروکین را بر روی مدل پارکینسون القا شده با 6-هیدروکسی دوپامین در موشهای صحرایی مورد ارزیابی قرار داد. بررسی آزمونهای رفتاری نشان داد که القای پارکینسون باعث افزایش میزان شاخص های رفتاری تایید بیماری در مدل موش صحرایی می شود که داروی هیدروکسی کلروکین توانست این رفتار ها را بهبود بخشد. همچنین القای پارکینسون منجر به افزایش سطح پروتئین α-سینوکلئین و میزان مالون دی آلدهید (MDA) و کاهش سطح ظرفیت تام آنتی اکسیدانی (TAC) و فعالیت آنزیم گلوتاتیون پراکسیداز (GPx) شد و درمان با هیدروکسی کلروکین منجر به بهبود این شاخص ها شد. علاوه بر این، داده های هیستوپاتولوژیک نشان داد که هیدروکسی کلروکین از نورون های دوپامینرژیک در برابر سمیت ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین محافظت می کند. بنابراین با توجه به نتایج مطالعه حاضر، هیدروکسی کلروکین تا حدی با کاهش استرس اکسیداتیو و محافظت از نورونهای دوپامینرژیک، در بهبود پاتوفیزیولوژی پارکینسون موثر است. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
