مقایسه تغییرات لنفوسیتی و نیز بررسی مسیر ضد ویروسی IFNs-I و وجود اتو آنتی بادی علیه IFNs-I در بیماران مبتلا به فرم شدید و خفیف COVID-19
Comparison of lymphocyte changes as well as the antiviral study of IFNs-I and the presence of autoantibodies against IFNs-I in severe and mild COVID-19 patients
مجریان: مهدی یوسفی , سیما شاه محمدی فرید
خلاصه روش اجرا: این مطالعه به صورت توصیفی-تحلیلی انجام میشود. از بیماران مبتلا به فرم شدید بستری شده و فرم خفیف کرونا ویروس مراجعه کننده به مرکز درمانی امام رضا (ع) تبریز و افراد که جمعیت های مورد مطالعه ما در این تحقیق هستند رضایت نامه کتبی و آگاهانه دریافت خواهد شد. ، سپس بعد از انجام خونگیری (10 میلی لیتر) از افراد، سلول های تک هسته ای خون محیطی با استفاده از فایکول و سانتریفوژ گرادیان دانسیته جدا خواهند شد. برای بررسی میزان فراوانی زیر گروه های سلول های T و Bو NK در خون محیطی افراد از تکنیک فلوسایتومتری استفاده خواهد شد. برای اندازه گیری بیان ژنی بعد از استخراج mRNA از PBMCs ، cDNA ساخته شده و بیان ژنهای مورد نظر با تکنیک Real Time-PCR اندازه گیری می شود. برای اندازه گیری میزان سایتو کاین های ترشح شده و اتو آنتی بادی ، بعد از جداسازی سرم از خون با استفاده از سانتریوفیوژ سایتوکاین های IFN-α و IFN-β و Anti-IFN alpha Antibody را با استفاده از کیت های تجاری و تکنیک الایزا سنجیده می شود. برای میزان بیان پروتئین های درگیر در مسیر تولید و سیگنالینگ IFNs-I از تکنیک وسترن بلاتینگ استفاده می شود بدین صورت که بعد از جداسازی PBMCs با استفاده از بافر لیز کننده سلول ها لیز می شوند و بعد از جدا سازی پروتئین الکتروفورز صورت گرفته و در نهایت میزان بیان پروتئین های مورد نظر با تکنیک وسترن بلاتینگ اندازه گیری می شود.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 67189 |
| عنوان فارسی طرح | مقایسه تغییرات لنفوسیتی و نیز بررسی مسیر ضد ویروسی IFNs-I و وجود اتو آنتی بادی علیه IFNs-I در بیماران مبتلا به فرم شدید و خفیف COVID-19 |
| عنوان لاتین طرح | Comparison of lymphocyte changes as well as the antiviral study of IFNs-I and the presence of autoantibodies against IFNs-I in severe and mild COVID-19 patients |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه, گرنت پژوهشی |
| اولویت طرح | توسعه روشهای درمانی جدید در بیماریهای واگیر |
| نوع مطالعه | مطالعه مورد/شاهد ( Case - Control ) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دکتری تخصصی PhD |
| مدت اجرا - ماه | 14 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | با توجه به اینکه مطالعات زیادی در رابطه با ژن ها و عوامل القا کننده حالت ضد ویروسی در بیماران مبتلا به کویید 19 بدون بیماری رمینه ای صورت نگرفته و مطالعه جدیدا چاپ شده پروفسور کازانوا و همکارانشان بیان داشته اند که در بیش از 10% این بیماران تولید اتو آنتی بادی علیه اینترفرون های تیپ یک صورت می گیرد. شاید بتوان با انجام مطالعات بیشتر در این زمینه در جمعیت های مختلف گامی در جهت تایید و یا رد این نظریه برداشت و در نتیجه باعث کمک درمان بهتر این بیماران شد. |
| اهداف اختصاصی | مقایسه تغییرات لنفوسیت های T و B و NK در بیماران مبتلا به فرم شدید و خفیف COVID-19 بدون هیچ بیماری زمینه ای در مقایسه با افراد سالم -بررسی تغیرات بیان ژنهای IRF-3، IRF-7، STAT-1، STAT-2، JAK-1، TYK-2، IFN-α، و IFN-β در سطح mrRNA در بیماران مبتلا به فرم شدید و خفیف COVID-19 بدون هیچ بیماری زمینه ای در مقایسه با افراد سالم -بررسی تغیرات بیان ژنهای IRF-3، IRF-7، STAT-1، STAT-2، JAK-1، TYK-2، در سطح پروتئین در بیماران مبتلا به فرم شدید و خفیف COVID-19 بدون هیچ بیماری زمینه ای در مقایسه با افراد سالم -بررسی تغیرات IFN-α و IFN-β ترشحی در بیماران مبتلا به فرم شدید و خفیف COVID-19 بدون هیچ بیماری زمینه ای در مقایسه با افراد سالم -بررسی تغیرات میزان تولید اتو آنتی بادی علیه IFNs-I در بیماران مبتلا به فرم شدید و خفیف COVID-19 بدون هیچ بیماری زمینه ای در مقایسه با افراد سالم |
| چکیده انگلیسی طرح | This study is descriptive-analytical. Patients with severe forms of hospitalization and mild forms of coronavirus referred to Imam Reza (AS) Medical Center in Tabriz will be included in this study and written informed consent will be taken from these persons. Then, after blood sampling (10 cc from each person) is performed from individuals, peripheral blood mononuclear cells will be isolated using a ficoll density gradient centrifuge. Flow cytometry will be used to evaluate the frequency of T, B, and NK subtypes in peripheral blood. In order to measure gene expression after mRNA extraction from PBMCs, cDNA will be synthesized and the expression of the desired genes will be measured using the Real Time-PCR technique. Also, in order to measure the amount of secreted cytokines and autoantibodies, after separating the serum from the blood using centrifugation, the cytokines IFN-α and IFN-β and Anti-IFN alpha Antibody will be measured using commercial kits and ELISA technique. Western blotting will be used to express the proteins involved in the production and signaling pathway of IFNs-I. After the separation of PBMCs, the cells will be lysed using a lysis buffer. Finally, the expression of the desired proteins will be measured by the Western blotting technique. |
| کلمات کلیدی | STAT: مبدل های سیگنال و فعال کننده های رونویسی Covid-19: ویروس جدیدی از خانواده کروناویریده ها که در سال 2019 منجر به بیماری زایی شده است IRF: عامل تنظیم کننده اینترفرون IFN-I: زیرگروه بزرگی از اینترفرونها هستند که به تنظیم فعالیت دستگاه ایمنی بدن کمک میکنند. اینترفرونها به «گیرندهٔ اینترفرون» متصل میشوند. تمامی اینترفرونهای نوع ۱ به یک گیرندهٔ خاص در سطح سلول متصل میشوند که بدان «گیرندهٔ اینترفرون-آلفا» میگویند و به دو زیرگروهِ IFNAR1 و IFNAR2 تقسیم میشوند. اینترفرونهای نوع ۱ در تمامی پستانداران یافت میشود و هومولوگهای آن در پرندگان، خزندگان، دوزیستان و ماهیها نیز وجود دارد. ARDS: سندرم دیسترس حاد تنفسی هنگامی بروز میکند که مایع در کیسکهای هوایی کوچک و انعطافپذیر ریهها (آلوئولی) جمع میشود. مایع مزبور مانع از پر شدن ریهها با میزان کافی هوا میگردد که این بدان معنی است که میزان اکسیژن دریافتی در جریان خون کاهش پیدا میکند. این وضعیت مانع از دسترسی دستگاههای بدن به اکسیژن مورد نیاز برای ارائهٔ عملکرد کامل خود میگردد. |
| ذینفعان نتایج طرح | با توجه به نوع مطالعه خروجی آن می تواند برای درمان بیماران مبتلا به COVID-19 مفید باشد. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| مهدی یوسفی | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| سیما شاه محمدی فرید | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| عطا محمودپور | مشاور |
| محمدصادق سلطانی زنگبار | دانشجوی مالک پایان نامه |
| لیلی عاقبتی | مشاور |
| لیلا روشنگر | مشاور |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر پاسخ ضد ویروسی در بیماران مبتلا به فرم شدید COVID-19 کاهش داشت.متن خبر پاندمی COVID-19 تا کنون موجب مرگ بیش از شش میلیون و سیصد هزار نفر در سراسر جهان شده است. مطالعات زیادی در مورد بیماری زایی و نحوه مقابله سیستم ایمنی بدن با این ویروس انجام گرفته است، ولی این یافته ها و مطالعات تا کنون نتوانسته منجر به درمان قطعی و عمومی این بیماری شود. در این مطالعه از 50 بیمار مبتلا به فرم شدید COVID-19 و 50 بیمار مبتلا به فرم خفیف COVID-19 و 50 فرد سالم به عنوان گروه کنترل نمونه خونی گرفته شد و بر روی جمعیت سلول های ایمنی، پاسخ سیستم ایمنی و نیز پاسخ ضد ویروسی سیستم ایمنی در جمعیت های ذکر شده مطالعه صورت گرفت. بر اساس نتایج مطالعه در بیماران مبتلا به فرم شدید COVID-19 ، کاهش شدید لنفوسیت ها ( نوع خاصی از سلول های سیستم ایمنی بدن) مشاهده شد و نیز پاسخ های ضد ویروسی و مسیر پیام رسانی آن ها (مسیر پاسخ و پیام رسانی IFN-Is) کاهش داشت. در صورتی که افزایش پاسخ های التهابی در این جمعیت نسبت به دیگر جمعیت های مورد مطالعه مشاهده شد. نتایج مطالعه نشان می دهد که احتمالا بیماران مبتلا به فرم شدید COVID-19 دارای نقص در پاسخ های ضد ویروسی و نیز مسیر های پیام رسانی این پاسخ ها می باشند. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
