جداسازی آنتی بادی scfv علیه اپیتوپهای خطی spike protein SARS-CoV-2 با تکنیک phage disply
Isolation of scFv antibody against linear epitope of SARA-CoV-2 spike protein by Phage display technology
مجریان: صفر فرج نیا
خلاصه روش اجرا: در ابتدا پس از شناسایی اپیتوپهای خطی پروتئین s SARS-CoV-2 توالی آن ها توسط لینکرهایی به هم متصل شده و سپس ژن مربوطه سنتز و در باکتری E.coli بیان و تخلیص میگردد. سپس پروتئین تخلیص شده برای غربال کتابخانه فاژی آنتی بادی تک زنجیرهای انسانی مورد استفاده قرار میگیرد و سپس کلونهای فاژی مربوطه با روش biopanning جداسازی شده و غنی سازی میگردد ونهایتا کلونهای بیان کننده آنتی بادی با افینیتی مناسب جداسازی شده در نهایت شناسایی شده و تعیین توالی میگردد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 66554 |
| عنوان فارسی طرح | جداسازی آنتی بادی scfv علیه اپیتوپهای خطی spike protein SARS-CoV-2 با تکنیک phage disply |
| عنوان لاتین طرح | Isolation of scFv antibody against linear epitope of SARA-CoV-2 spike protein by Phage display technology |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | مطالعات سلولی- مولکولی و ایمونولوژیک در زمینــه تولید واکسن |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | کارشناسی ارشد |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | به طور کلی مطالعات کمی در ارتباط با شناسایی آنتی بادی های scFv علیه اپی توپ های خطی پروتئین s SARS-CoV2 صورت گرفته، همچنین تاکنون مطالعه ای در این زمینه در ایران انجام نشده است. به دلیل پاندمی ایجاد شده و آمار بالای مرگ و میر که به یک معضل جهانی تبدیل شده توسعه درمانهای بالقوه علیه کروناویروس جدید از اهمیت بالایی برخور دار بوده و شناسایی و توسعه آنتی بادی همچنین میتواند در توسعه واکسن علیه این ویروس نیز مفید باشد. |
| اهداف اختصاصی | بیان و تخلیص اپی‌توپ‌‌های خطی SARS-CoV-2 Spike protein -غربال کتابخانه فاژی انتی بادی تک زنجیره ای انسانی برای شناسایی و جداسازی آنتی بادی های نوترکیب SCFV متصل شونده به اپی توپ های خطی Spike protein SARS-CoV-2 |
| چکیده انگلیسی طرح | First, after identifying the linear epitopes of SARS-CoV-2 spike protein, their sequences are linked together by linkers, and then the relevant gene is synthesized,expressed and purified in E. coli. The purified protein is then used to screen the phage library of humanized single-chain antibodies, and then the corresponding phage clones are isolated and enriched by biopanning. Finally, the antibody-expressing clones with the appropriate affinity are isolated and finally identified and sequenced. |
| کلمات کلیدی | SARS-CoV-2 : ویروسی از خانواده کروناویریده و عامل ایجاد بیماری COVID-19 چارچوب خوانش باز (Open reading frame) :در ژنتیک مولکولی، به بخشی از چهارچوب خوانش گفته میشود که قابل ترجمه باشد. تروپیسم : تروپیسم ویروسی توانایی ویروس معین در آلوده سازی سلول خاص (تروپیسم سلولی) ، بافت (تروپیسم بافتی) یا گونه های میزبان (تروپیسم میزبان) است. فاژ : باکتریوفاژها یا فاژها، ویروسهایی هستند که به باکتریها حمله میکنند و آنها را از بین میبرند. این ویروسها برای باکتریها اختصاصی هستند و نمیتوانند به یوکاریوتها حمله کنند. حاملهای فاژمیدی : فاژمید یا فاسمید یک وکتور کلونینگ مبتنی بر DNA است که دارای ویژگیهای پلاسمید و باکتریوفاژ است. آنتی بادیهای مونوکلونال : آنتیبادیهای مونوکلونال بوسیله مجموعههای سلولهای ایمنی مشابه که دودمان یا «کلون» همهشان به یک سلول والدی مشابه میرسد، تولید میشوند و «میل ترکیبی تکظرفیتی» دارند به این معنا که همه آنها به یک «اپیتوپ» واحد (محلی از آنتیژن که آنتیبادی به آن متصل میشود) متصل میشوند. اپیتوپ : قسمتی از یک آنتی ژن است که توسط سیستم دفاعی تشخیص داده میشود |
| ذینفعان نتایج طرح |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| صفر فرج نیا | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| مرتضی میلانی | مشاور |
| سمانه جهاندار لاشکی | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر انتی بادی جدید در فرمت scFv علیه,ویروس sars-Cov2 شناسایی شد.متن خبر بر اساس آمارها بیماری COVID-19 تاکنون حدود 9/6 میلیون نفر را به کام مرگ کشیده است. تلاش های زیادی جهت کشف گزینه هایی برای درمان و پیشگیری این بیماری صورت گرفته است با این حال با ظهور سویه های جدید ویروس اثربخشی موارد کشف شده کاهش چشمگیری داشته است. هدف از این مطالعه شناسایی آنتی بادی جدیدی در فرمت scFv به وسیله تکنیک phage display علیه SARS-CoV-2 بوده است. به این منظور بخش RBD ویروس کلون و بیان گردیده و به عنوان آنتی ژن درمراحل غربال biopanning مورد استفاده قرار گرفت نتایج بررسی ها با تکنیک های آزمایشگاهی و بیوانفورماتیکی منجر به جداسازی یک آنتی بادی جدید گردید که علاوه بر سویه اصلی ویروس قادر است سایر سویه های جهش یافته آن را نیز مورد شناسایی قرار دهد و بنابراین ابزاری بالقوه مناسب برای درمان و تشخیص بیماری COVID-19 می باشد |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
