کلون سازی ژن های mcr-1 و mcr-2 در سویه اشریشیاکلای DH5a جهت ارزیابی مقاومت به کولیستین ، تغییرات الگوی پروتئین و پایداری پلاسمیدی آن
Cloning of mcr-1 and mcr-2 genes in Escherichia coli DH5a strain to evaluate colistin resistance, protein pattern changes and plasmid stability
مجریان: حسین صمدی کفیل , رضا قوطاسلو
خلاصه روش اجرا: بروز مقاومت های چندگانه باعث افزایش نگرانی ها به درمان عفونت ها در باکتری ها شده است. امروزه سویه های دارای مقاومت چندگانه تقریبا با هیچ روشی قابل درمان نمی باشند و گزینه های درمانی این عفونت ها بسیار محدود شده است لذا کنترل گسترش عفونت ها از اهمیت شایانی برخوردار است. لذا در این مطالعه چگونگی بروز مقاومت به کولیستین در پی انتقال پلاسمید مورد بررسی قرار خواهد گرفت. این مطالعه به بررسی امکان کلون سازی پلاسمیدهای دخیل در مقاومت پرداخته و پلاسمید mcr-1 mcr-2 در سویه DH5a کلون شده و میزان پایداری پلاسمید در این سویه در وجود و عدم وجود فشار انتخابی و تغییرات پروتئومیک آن مورد بررسی قرار خواهند گرفت. پلاسمید های مقاومت mcr-1 و mcr-2 ابتدا استخراج می شود و مورد تایید به روش PCR قرار می گیرند و به روش الکتروپورشن و ترانسفورماسیون انتقال آن به اشرشیاکلی DH5a منتقل و انتقال و پایداری آن بروش PCR و MIC پایش می شود و با استخراج پروتئین های ساختاری و ارزیابی تغییرات، کلیه تغییرات در باکتری شناسائی می شود.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 66162 |
| عنوان فارسی طرح | کلون سازی ژن های mcr-1 و mcr-2 در سویه اشریشیاکلای DH5a جهت ارزیابی مقاومت به کولیستین ، تغییرات الگوی پروتئین و پایداری پلاسمیدی آن |
| عنوان لاتین طرح | Cloning of mcr-1 and mcr-2 genes in Escherichia coli DH5a strain to evaluate colistin resistance, protein pattern changes and plasmid stability |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | راهکارهای بهینهسازی تجویز و مصرف منطقی داروها با تاکید بر آنتی بیوتیکها |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | با توجه به گسترش مقاومت ها بخصوص مقاومت چندگانه آنتی بیوتیکی به کولیستین، ارزیابی و شناخت مکانیسم های بروز مقاومت و تغییرات ساختاری در باکتری در پی بروز مقاومت و میزان پایداری پلاسمید در صورت رفع فشار انتخابی پلاسمید از اهمیت بالایی برخوردار است این مهم می تواند راهکارهای بالینی مناسبی جهت رفع مقاومت و توسعه راهکارهای کنترل مقاومت را بدهد. |
| اهداف اختصاصی | استخراج و کلون سازی پلاسمید mcr-1 و mcr-2 از سویه های مقاوم به کولیستین و کلون سازی در DH5a - ارزیابی پایداری پلاسمید در صورت عدم وجود فشار انتخابی -ارزیابی تغییرات پروتئومیک سویه DH5a بعد از کلون سازی برای mcr-1,2 |
| چکیده انگلیسی طرح | Multiple resistance has raised concerns about treating bacterial infections. Today, strains with multiple resistance couldn't be treated with any method and treatment options for these infections are very limited, so controlling the spread of infections is very important. Therefore, in this study, the mechanism of resistance to colistin following plasmid transfer will be investigated. This study will investigate the possibility of cloning plasmids involved in resistance and the plasmids mcr-1 and mcr-2 will be cloned in DH5a strain and the stability of plasmid in this strain in the presence and absence of selective pressure and its proteomic changes will be investigated. The mcr-1 and mcr-2 resistance plasmids first will be extracted and verified by PCR method and transferred to Escherichia coli DH5a by electroporation and transformation method. Its transfer and stability will be examined by PCR and MIC . All changes in bacteria will be identified by extracting structural proteins and evaluation of changes. |
| کلمات کلیدی | کولیستین: آنتی بیوتیکی از خانواده پلی میکسین¬ها که جهت درمان عفونت¬های گوارشی حاصل از ارگانیسم¬های با مقاومت چند دارویی و حساس به این دارو استفاده می¬شود. مقاومت چند دارویی:به کاهش تاثیر چند دارو ( آنتی بیوتیک در مقابل عامل عفونی) در شرایط بیماری مقاومت چند دارویی گفته می شود. پروتئومیکس(proteomic): ابزاری برای بررسی مقایسه¬ای پروتئین¬ها به صورت جامع در یک مقیاس وسیع |
| ذینفعان نتایج طرح |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| حسین صمدی کفیل | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| رضا قوطاسلو | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| محمد آهنگرزاده رضایی | مشاور |
| مهین آهنگر اسکوئی | مشاور |
| محمد حسین سروش برحقی | مشاور |
| مریم علی زاده | دانشجوی مالک پایان نامه |
| فادهیل کامونه | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر پلاسمیدهای مرتبط با مقاومت با کولیستین در اشرسیاکلی بر روی سایر اجزاء باکتری نیز اثر می گذارندمتن خبر بروز مقاومت های آنتی بیوتیکی از اولویت های بهداشتی حال حاضر می باشند و می توانند به صورت بحرانی در آینده بروز نمایند. ارزیابی مکانیسم های بروز این مقاومت ها از اهمیت بسزایی برخوردار می باشد. این مطالعه به بررسی تغییرات پروتئومیک اشرشیاکلی بر اثر ورود پلاسمید کولیستین می پردازد روش مالدی توف جهت ارزیابی تغییرات پروتئومیکس استفاده شد نتایج نشان از تغییرات طیف وسیعی از پروتئین ها داد. این نتایج می تواند تغییرات پروتئین های اساسی را که بواسطه ورود پلاسمید به داخل باکتری است نشان دهد. این تغییرات نشان از تاثیر عمیق ورود پلاسمید در ساختارهای باکتری و ایجاد تغییرات هوشمند در آن می باشد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
