بررسی شیوع عفونت نهفته هپاتیت ب (OBI) در بیماران همودیالیز مراجعه کننده به بیمارستان امام رضا (ع) شهر تبریز در سال 1399
The Prevalence of Occult Hepatitis B Infection (OBI) in hemodialysis patients referred to Imam Reza Hospital in Tabriz in 1399
مجریان: مهین آهنگر اسکوئی , وحدت پورطهماسبی
خلاصه روش اجرا: در مطالعه حاضر نمونه خون 114 بیمار همودیالیزی از بیمارستان امام رضا (ع) تبریز جهت بررسی عفونت نهفته هپاتیت ب (OBI) تهیه میگردد. عفونت نهفته هپاتیت B به صورت حضور HBV-DNA در غیاب HBsAg در خون بیماران تعریف می-شود. در این طرح از ابتدا نمونه سرم جدا شده و از طریق تکنیک الایزا حضور HBsAg و حضور مارکر Anti-HBc در سرم بیماران همودیالیزی جهت پی بردن به عفونت قدیمی یا کنونی مورد بررسی قرار گرفته و نمونه های HBsAg منفی جهت انجام ادامه کار جدا می شوند و توسط کیت استخراج، ژنوم ویروس هپاتیت B استخراج می گردد و محصول استخراج ژنوم از همه ی نمونه های جمع آوری شده, برای تعیین حضور HBV-DNA از طریق Nested-PCR به علت اختصاصیت بالا و روش استاندارد طلایی مطرح در دنیا بررسی می¬گردد. با توجه به این که بیماران مبتلا به OBI بار ویروسی اندکی در خون افراد آلوده دارند از این نظر توسط Real-time PCR مورد بررسی قرار خواهند گرفت. بیمارانی که از نظر حضور ژنوم ویروس هپاتیت B مثبت هستند انتخاب شده و ژن HBsAg که حاوی 681 نوکلئوتید می¬باشد توسط روش Sanger توالی¬یابی خواهند شد. پس از توالی¬یابی با استفاده از روش¬های بیوانفورماتیکی ژنوتیپ ویروس و موتاسیون¬های احتمالی مشخص خواهند شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 66023 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی شیوع عفونت نهفته هپاتیت ب (OBI) در بیماران همودیالیز مراجعه کننده به بیمارستان امام رضا (ع) شهر تبریز در سال 1399 |
| عنوان لاتین طرح | The Prevalence of Occult Hepatitis B Infection (OBI) in hemodialysis patients referred to Imam Reza Hospital in Tabriz in 1399 |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | غربالگری، اپیدمیولوژی، پیشگیری و مراقبت در بیماریهای دستگاه گوارش با تاکید بر هپاتیت و سیروز کبدی |
| نوع مطالعه | بررسی مقطعی ( Cross Sectional) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | کارشناسی ارشد |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | عفونت نهفته هپاتیت ب (OBI) در آسیا به علت فراوانی بالای HBV ( بیش از 8%) نسبت به سایر مناطق دنیا به خصوص در بیماران کبدی یا افراد در معرض ابتلا به عفونت با تزریق همچون مصرف کنند¬گان مواد مخدر، افراد هموفیلی، گیرندگان خون و کاربران همودیالیز شیوع بیشتری دارد . با توجه به این واقعیت که ویروس هپاتیت B انسانی (HBV) با وجود انولوپ داربودن قدرت ماندگاری بیشتری را در خارج از بدن دارد و براحتی از طریق وسایل آلوده خونی به دیگران منتقل می شود و ویروس HBV موجود در پلاسما بیماران OBI بدون پیش آگهی جهت غربال با روش های اختصاصی مولکولی، می تواند از طریق دستگاه دیالیز مشترک آلوده به سایرین منتقل شود و عامل مهمی در ایجاد مشکلات حاد کبدی به خصوص سرطان کبد را دارد. لذا در این مطالعه بر آن شدیم تا شیوع OBI با در نظر گرفتن لود پایین ژنوم ویروس و بررسی آن توسط Real-time PCR در بیماران همودیالیزی ، ژنوتایپ و سروتایپ و موتاسیونهای احتمالی ویروس را برای اولین بار در استان آذربایجان شرقی بررسی کنیم. |
| اهداف اختصاصی | تعیین فراوانی Anti-HBc در بیماران همودیالیزی مراجعه کننده به بیمارستان امام رضا (ع) -تعیین وجود آنتی ژن سطحی ویروس HBsAg بوسیله تکنیک Nested- PCRدر بیماران همودیالیزی مراجعه کننده به بیمارستان امام رضا (ع) -تعیین لود DNA ویروس HBV در بیماران همودیالیزی مراجعه کننده به بیمارستان امام رضا (ع) -تعیین ژنوتیپ HBV ، زیر تایپ و موتاسیون ناحیه سطحی (HBsAg) ویروس هپاتیت B در بیماران همودیالیزی مراجعه کننده به بیمارستان امام رضا (ع) |
| چکیده انگلیسی طرح | In the present study, blood samples of 114 hemodialysis patients were prepared from Imam Reza Hospital in Tabriz to evaluate the Occult hepatitis B infection (OBI). Occult hepatitis B infection is defined as the presence of HBV-DNA in the absence of HBsAg in patients' blood. In this project, While receiving ethical consent first of all serum samples are isolated from patient and through the ELISA technique, the presence of HBsAg and the presence of Anti-HBc markers in the serum of hemodialysis patients are examined to detect past or current infection and negative HBsAg samples are isolated to continue the work. The hepatitis B virus genome is extracted by the extraction kit and the genome is examined from all collected samples to determine the presence of HBV-DNA by Nested-PCR due to its high specificity and the gold standard method in the world. Due to the fact that patients with OBI have a low viral load in the blood of infected people, this will be examined by real-time PCR. Patients who are positive for the presence of the hepatitis B virus genome will be selected and the HBsAg gene, which contains 681 nucleotides, will be sequenced by the Sanger method. After sequencing using bioinformatics methods, virus genotypes and possible mutations will be identified. |
| کلمات کلیدی | ویروس هپاتیت B: عامل مولد هپاتیت B است و جزء ویروس¬های کبدی DNA دار طبقه بندی می¬شود که در خانواده هپادناویریده قرار دارد. بافت هدف این بیماری و میزبان آن محدود است فقط در کبد و گاهی پانکراس و کلیه انسان و میمون را نیز آلوده می¬کند .این ویروس کوچک، دارای انولپ، حاوی DNA دو رشته¬ای حلقوی ناقص است. نوکلئوکپسید ویروس پس از ورود به داخل هپاتوسیت ها، بدون تغییر به درون هسته هدایت می شود و در آن جا به DNA حلقوی آزاد شده و به صورت کووالانسی به DNA حلقوی بسته (cccDNA) تبدیل می شود که یک واسطه مهم در همانندسازی بوده و عامل مهمی در عفونت نهفته می باشد. پایداری طولانی مدت مولکول های cccDNA همراه با نیمه عمر بالای سلول های کبدی، حتی با وجود مهار رونویسی و همانندسازی ویروس، عامل مهمی در برقراری عفونت می باشد. عفونت هپاتیت B نهفته (OBI): نوعی از عفونت مزمن هپاتیت B می¬باشد که به صورت عدم حضور ژنوم ویروس یا سطوح پایین HBV-DNA پلاسما ( 2000 > IU/ml ) و حضور سلول ایمنی در غیاب HBsAg تعریف می¬شود. در این بیماران سطح ALT پلاسما نرمال است و بیش از 20% این بیماران هیچ¬گونه مارکر سرولوژیک برای HBV ندارند و تا مدتی طولانی ممکن است تیتر آنتی¬بادی غیرقابل مشاهده بوده و HBV-DNA در آنها تنها مارکر عفونت می¬باشد که جهت تشخیص آن به تکنیک حساس و اختصاصی مولکولی نیاز است. همودیالیز: همودیالیز در پزشکی، روشی برای پالایش خارج از بدن خون از مواد زائد و سمی مانند اوره و کراتینین و نیز کاهش آب اضافی و آزاد خون است درهنگامیکه کلیهها در وضعیت نارسایی یا مرگ سلولی قرار دارند. این روش شایعترین روش درمان جایگزین کلیه در بیماران کلیوی است. در این روش خونی که از یک مسیر عروقی ثابت یا موقتی بدست میآید با سرعت ۳۰۰ میلی لیتر در دقیقه یا بیشتر به درون مویرگهایی که از غشاهای نیمه مصنوعی ساخته شدهاند، پمپ میگردد. در سمت مقابل، مایع دیالیز که حاوی کلراید سدیم، بیکربنات و غلظتهای مختلفی از پتاسیم است، حرکت میکند. HBsAg: پروتئین سطحی کوچک ویروس هپاتیت B است که حضور آن در خون نشان دهنده ابتلا به هپاتیت B می¬باشد. Cryptogenic: با منشاء نامعلوم MHR: major hydrophilic region ، ناحیه ای در آنتی ژن سطحی (HBsAg) ویروس هپاتیت B که موتاسیون در این ناحیه اجازه فرار ویروس از پاسخ ایمنی میزبان و آنتی بادی اختصاصی سطحی تولید شده ( anti- HBs) بر علیه ویروس را می دهد |
| ذینفعان نتایج طرح | به دلیـل اثـرات نارسـایی کلیـه بـر روی سیسـتم ایمنی، عفونت هپاتیت B در بیماران دیـالیزی یـک معضل مهم بالینی است. بررسی سـیر هپاتیـت B در بیماران دیالیزی بـه صـورت کـافی انجـام نشـده است. مطالعـات بافـت شناسـی کبـد ایـن بیمـاران، پیشروی به طرف سیروز را کـم و بـیش نشـان داده است. بنابراین بررسی حضور ویروس هپاتیت B در بیماران همودیالیزی می¬تواند در درمان این بیماران و پیشگیری از عواقب کلیوی HBV کمک نماید. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| مهین آهنگر اسکوئی | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| وحدت پورطهماسبی | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| بهرام نیک نفس | مشاور |
| جاوید صادقی | مشاور |
| رضا قوطاسلو | مشاور |
| آرزو آزادی | همکار اصلی |
| نرگس اسلامی | دانشجوی مالک پایان نامه |
| نادر محمدزاده | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر شیوع 4/2% عفونت مخفی هپاتیت ب (OBI) در بیماران همودیالیز بیمارستان امام رضا (ع)شهر تبریز مشاهده گردید.متن خبر عفونت مخفی هپاتیت B (OBI) به عنوان یک عارضه بی¬علامت در بیماران همودیالیز حایز اهمیت است.
اهمیت ویروس هپاتیت B به عنوان ویروس ناقله از راه خون، قابلیت بالای آن برای حضور در سطوح بیجان محیط حتی بالای 7 روز و پایداری ژنوم HBV بهصورت CCC DNA از یک طرف و نیمه عمر بالای سلول¬های هپاتوسیت کبدی از طرف دیگر، گمانه زنی راجع به احتمال فعالیت دوباره ویروسی و بروز علائم بالینی ناشی از عفونت نهفته به دنبال سرکوب شدید ایمنی در بیماران همودیالیزی را بر میزان انتقال ویروس با دستگاه همودیالیز مشترک درون مرکز و مرگ و میر حاصل از آن قوت بخشد. یافته¬های حاصل از این مطالعه از مارکر سرولوژی Anti-HBc به عنوان یک مارکر خونی پیش آگهی یاد می¬کند که می¬توان با ظن بر آن و انجام تست¬های مولکولی حساس به بررسی حضور ژنوم و لود ویروس پرداخت. بدیعی است که شناسایی عفونت قبل از بروز سیر بیماری به سمت مشکلات کبدی و سیروز تا حدود زیادی با تجویز دارو و یادآورهای منظم و متوالی برای کنترل عفونت با جداسازی فرد حامل عفونت مخفی هپاتیت B و مدیریت مناسب درمان در بیماران همودیالیز به ویژه هنگام پیوند کلیه کارآمد خواهد بود. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
