بررسی اثرات ضد سرطانی ال-کارنیتین بر سلول های بنیادی سرطانی +CD24 مشتق از رده سلولی MDA-MB-468 سرطان پستان
Investigation of anti-cancer effects of L-carnitin on CD24+ cancer stem cells from breast cancer MDA-MB-468 cell line
مجریان: راحله فرحزادی
خلاصه روش اجرا: خلاصه روش اجرا: سرطان پستان یکی از سرطان¬های شایع در زنان می¬باشد. چاقی، فعالیت کم بدنی، هورمون درمانی و هم¬چنین رژیم غذایی نامناسب در خطر بروز سرطان نقش مهمی دارند. اخیراً مطالعات و تحقیقات فراوان حضور سلول¬هایی با قدرت تومورزایی بالا با مشخصه سلول بنیادی را در سلول¬های سرطانی و بافت توموری تأیید می¬کنند. از مشخصه¬های اصلی این جمعیت¬های سلولی، قابلیت خودنوزایی، کلون-زایی و توانایی تمایز چندگانه می¬باشد و سلول بنیادی سرطانی نام دارند. سلول¬های بنیادی سرطانی می¬توانند از رده¬های سلول¬های سرطانی جدا شوند و به وسیله نشانگرهای سطح سلولی خاص شناسایی می¬شوند. از نشانگرهای سطحی یافت شده در رده سلولی سرطان پستان می¬توان CD44 و CD24 را نام برد. به طور کلی، سلول¬های بنیادی سرطانی در رشد تومور، متاستاز، عود و مقاومت به شیمی درمانی نقش عمده¬ای را ایفا می¬کنند. بنابراین، هدف گذاری این سلول¬ها و استفاده از فاکتورهایی با خاصیت آنتی اکسیدانت می¬تواند به عنوان یک استراتژی جدید در درمان مؤثر سرطان مفید واقع شود. ال-کارنیتین به عنوان یک آنتی اکسیدانت قوی سبب افزایش تنفس سلولی، آپاپتوز، کاهش در سرعت تکثیر و التهاب سلول¬های سرطانی با مکانیسم¬های مختلف می¬شود. در این پژوهش، رده سلولی MDA-MB-468 از موسسه انستیتو پاستور خریداری خواهد شد. پس از کشت و تکثیر سلولی، سلول¬های بنیادی سرطانی با استفاده از میکروبیدهای CD24+ و دستگاه MACS جداسازی خواهند شد و میزان بیان نشانگر سطح سلولی CD24 در سطح سلول¬های جداسازی شده توسط دستگاه فلوسایتومتری شناسایی و تأیید خواهند شد. پس از جداسازی و شناسایی سلول¬های بنیادی سرطانی CD24+، این سلول¬ها در حضور غلظت¬های مختلف ال-کارنیتین تیمار می¬شوند و با بررسی میزان بیان ki-67 و روش فلوسایتومتری، غلظت مناسب ال-کارنیتین به دست خواهد آمد. سلول¬های بنیادی سرطانی CD24+ با غلظت به دست آمده از ال-کارنیتین تیمار خواهند شد و آزمایشات مربوط جهت بررسی اثرات سیتوتوکسیک و آپاپتوزی انجام خواهد شد. به این صورت که میزان بررسی آپاپتوز (Annexin-PI) و بیان ki-کاسپاز به روش فلوسایتومتری، میزان بیان ژن¬های مربوط به تغییر سیکل سلولی (CYCA، CYCB و CYCD) به روش real-time PCR و میزان senescence سلولی با اندازه گیری آنزیم بتاگالاکتوزیداز به روش الایزا انجام خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 65757 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثرات ضد سرطانی ال-کارنیتین بر سلول های بنیادی سرطانی +CD24 مشتق از رده سلولی MDA-MB-468 سرطان پستان |
| عنوان لاتین طرح | Investigation of anti-cancer effects of L-carnitin on CD24+ cancer stem cells from breast cancer MDA-MB-468 cell line |
| نوع طرح | گرنت پژوهشی |
| اولویت طرح | سلولهای بنیادی، مهندسی بافت و پزشکی بازساختی و زیست مواد |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 24 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | مطالعات اخیر نشان می¬دهند که سلول¬های بنیادی سرطانی در رشد تومور، متاستاز، عود و مقاومت به شیمی درمانی نقش عمده¬ای را ایفا می¬کنند. بنابراین، هدف گذاری این سلول¬ها و استفاده از فاکتورهایی با خاصیت آنتی اکسیدانت می¬تواند به عنوان یک استراتژی جدید در درمان مؤثر سرطان مفید واقع شود. ال-کارنیتین به عنوان یک آنتی اکسیدانت قوی سبب افزایش تنفس سلولی، آپاپتوز، کاهش در سرعت تکثیر و التهاب سلول¬های سرطانی با مکانیسم¬های مختلف می¬شود. تاکنون هیچ مطالعه¬ای مبنی بر اثر ال-کارنیتین به عنوان یک آنتی اکسیدانت قوی بر میزان آپاپتوز و میرایی سلول¬های بنیادی سرطانی CD24+ سرطان پستان گزارش نشده است. با توجه به مطالعات فراوانی که در زمینه سلول درمانی و درمان انواع سرطان انجام شده است، بررسی جزئیات دخیل در تأثیر فاکتورها و آنتی اکسیدانت¬های مختلف بر رده¬های سرطانی گام مهمی در زمینه تحقیقات سرطان می¬باشد. |
| اهداف اختصاصی | بررسی میزان بیان نشانگر سطح سلولی +CD24 در رده سلولی MDA-MB-468 سرطان پستان با استفاده از روش فلوسایتومتری -تعیین غلظت مناسب ال-کارنیتین جهت تیمار با سلول­های بنیادی سرطانی +CD24 - تعیین اثر ال-کارنیتین بر میزان بیان Annexin/V و کاسپاز-3 در سلول های بنیادی سرطانی +CD24 -تعیین اثر ال-کارنیتین بر میزان بیان ژن­ های مربوط به سیکل سلولی در سلول­های بنیادی سرطانی +CD24 -تعیین اثر ال-کارنیتین بر میزان بیان میزان آنزیم بتا گالاکتوزیداز در سلول­های بنیادی سرطانی+ CD24 |
| چکیده انگلیسی طرح | خلاصه روش اجرا: سرطان پستان یکی از سرطان¬های شایع در زنان می¬باشد. چاقی، فعالیت کم بدنی، هورمون درمانی و هم¬چنین رژیم غذایی نامناسب در خطر بروز سرطان نقش مهمی دارند. اخیراً مطالعات و تحقیقات فراوان حضور سلول¬هایی با قدرت تومورزایی بالا با مشخصه سلول بنیادی را در سلول¬های سرطانی و بافت توموری تأیید می¬کنند. از مشخصه¬های اصلی این جمعیت¬های سلولی، قابلیت خودنوزایی، کلون-زایی و توانایی تمایز چندگانه می¬باشد و سلول بنیادی سرطانی نام دارند. سلول¬های بنیادی سرطانی می¬توانند از رده¬های سلول¬های سرطانی جدا شوند و به وسیله نشانگرهای سطح سلولی خاص شناسایی می¬شوند. از نشانگرهای سطحی یافت شده در رده سلولی سرطان پستان می¬توان CD44 و CD24 را نام برد. به طور کلی، سلول¬های بنیادی سرطانی در رشد تومور، متاستاز، عود و مقاومت به شیمی درمانی نقش عمده¬ای را ایفا می¬کنند. بنابراین، هدف گذاری این سلول¬ها و استفاده از فاکتورهایی با خاصیت آنتی اکسیدانت می¬تواند به عنوان یک استراتژی جدید در درمان مؤثر سرطان مفید واقع شود. ال-کارنیتین به عنوان یک آنتی اکسیدانت قوی سبب افزایش تنفس سلولی، آپاپتوز، کاهش در سرعت تکثیر و التهاب سلول¬های سرطانی با مکانیسم¬های مختلف می¬شود. در این پژوهش، رده سلولی MDA-MB-468 از موسسه انستیتو پاستور خریداری خواهد شد. پس از کشت و تکثیر سلولی، سلول¬های بنیادی سرطانی با استفاده از میکروبیدهای CD24+ و دستگاه MACS جداسازی خواهند شد و میزان بیان نشانگر سطح سلولی CD24 در سطح سلول¬های جداسازی شده توسط دستگاه فلوسایتومتری شناسایی و تأیید خواهند شد. پس از جداسازی و شناسایی سلول¬های بنیادی سرطانی CD24+، این سلول¬ها در حضور غلظت¬های مختلف ال-کارنیتین تیمار می¬شوند و با بررسی میزان بیان ki-67 و روش فلوسایتومتری، غلظت مناسب ال-کارنیتین به دست خواهد آمد. سلول¬های بنیادی سرطانی CD24+ با غلظت به دست آمده از ال-کارنیتین تیمار خواهند شد و آزمایشات مربوط جهت بررسی اثرات سیتوتوکسیک و آپاپتوزی انجام خواهد شد. به این صورت که میزان بررسی آپاپتوز (Annexin-PI) و بیان ki-کاسپاز به روش فلوسایتومتری، میزان بیان ژن¬های مربوط به تغییر سیکل سلولی (CYCA، CYCB و CYCD) به روش real-time PCR و میزان senescence سلولی با اندازه گیری آنزیم بتاگالاکتوزیداز به روش الایزا انجام خواهد شد. |
| کلمات کلیدی | سلول بنیادی سرطانی: سلول¬هایی با مشخصاتی شبیه به سلول¬های بنیادی در تومورها هستند که به عنوان عامل اصلی بروز سرطان شناسایی شده اند. نشانگر سطح سلولی CD24: یک نشانگر سطح سلولی از جنس سیالوگلیکوپروتیئن است که در سطح سلول¬های سرطان پستان به عنوان سلول بنیادی سرطانی در نظر گرفته می¬شوند. رده سلولی MDA-MB-468: رده سلولی مربوط به سرطان پستان است که از فرد مبتلا به آدنوکارسینومای سرطان پستان جدا شده است. ال-کارنیتین: کارنیتین یک ماده شبه ویتامینی است که ازلحاظ ساختاری مشابه اسیدآمینهها است و نقش مهمی در متابولیسم انرژی و اسیدهای چرب ایفا میکند. آپاپتوز سلولی: یکی از اشکال مرگ برنامه¬ریزی شده سلولی با عملکرد تکوینی و هومئوستاتیک است. |
| ذینفعان نتایج طرح | 1. محققان سلول های بنیادی 2. پزشکان 3. بیماران مبتلا به سرطان پستان |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| راحله فرحزادی | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
| زهره صناعت | همکار اصلی |
| سهیلا منتظرصاحب | همکار اصلی |
| علی اکبر موثق پور اکبری | همکار اصلی |
| عزت اله فتحی | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر ال-کارنیتین سبب القاء آپاپتوز و افزایش میزان بیان پروتئین کاسپاز-3 در سلول های بنیادی سرطانی CD44 می شود.متن خبر از آنجا که سلول های بنیادی سرطانی سبب القاء قدرت تومورزایی بالا در بیماری سرطان می شوند، مطالعات و تحقیقات در این زمینه مورد توجه محققان می باشد. سلول¬های بنیادی سرطانی می¬توانند از رده¬های سلول¬های سرطانی جدا شوند. به طور کلی، سلول¬های بنیادی سرطانی در رشد تومور، متاستاز، عود و مقاومت به شیمی درمانی نقش عمده¬ای را ایفا می¬کنند. بنابراین، هدف گذاری این سلول¬ها و استفاده از فاکتورهایی با خاصیت آنتی اکسیدانت می¬تواند به عنوان یک استراتژی جدید در درمان مؤثر سرطان مفید واقع شود. ال-کارنیتین به عنوان یک آنتی اکسیدانت قوی سبب افزایش تنفس سلولی، آپاپتوز، کاهش در سرعت تکثیر و التهاب سلول¬های سرطانی با مکانیسم¬های مختلف می¬شود. نتایج مطالعه حاضر نشان داد که ال-کارنیتین در غلظت های 5/2 و 5 میلی مولار سبب افزایش القاء آپاپتوز سلول های بنیادی سرطانی CD44 مشتق از رده سلولی MDA-MB-468 سرطان پستان می شود. القاء آپاپتوز ایجاد شده همراه با افزایش میزان بیان پروتئین کاسپاز-3 می باشد. به نظر می¬رسد نتایج این مطالعه بتواند مسیری را برای تحقیقات بیشتر در زمینه تأثیر فاکتورها و آنتی اکسیدانت های مختلف بر سلول¬های بنیادی سرطانی مشتق از انواع رده¬های سرطانی به عنوان یک عامل درمانی برای پژوهشگران روشن نماید |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
