بررسی اثرات سیتوتوکسیک و آپاپتوزی فاکتورهای مترشحه از سلول های بنیادی مزانشیمی بر سلول های لوسمی میلوئیدی حاد (KG1)

مجریان: راحله فرحزادی

خلاصه روش اجرا: خلاصه روش اجرا: امروزه بیماری های خونی متعددی از قبیل تالاسمی، سایر کم خونی¬ها با زمینه ارثی و اکتسابی و انواع لوسمی¬ها جامعه بشری را رنج می-دهند. لوسمی میلوئیدی حاد (AML) یکی از انواع سرطان خون است که میلوسیت¬ها را تحت تأثیر قرار داده و منجر به ایجاد سلول¬های هماتوپوئتیک غیر طبیعی می¬شود. درمان¬های متعددی برای غلبه بر این بیماری¬ از قبیل شیمی درمانی با میزان بالا، رادیوتراپی کل بدن و ... وجود دارد که عواملی از قییل آسیب به سایر سلول¬ها در شیمی درمانی و عفونت¬های اولیه استفاده از این روش¬ها را محدود کرده است. اما امروزه روش پیوند مغز استخوان با استفاده از سلول¬های بنیادی، مؤثرترین روش درمان AML می¬باشد. سلول بنیادی خواستگاه و منشاء انواع سلول¬ها بوده و دارای ویژگی مهم پرتوانی و خودنوسازی می¬باشد یعنی هم قدرت تبدیل به انواع سلول¬ها را دارد و هم می¬تواند به سلولی تمایز نیافته مشابه خودش تبدیل شود تا منبع اصلی سلول بنیادی باقی بماند. این سلول¬ها به دلیل دارا بودن خاصیت خودتجدیدی و توان تمایز به بافت¬های مختلف می¬توانند در درمان انواع بیماری¬ها کارآمد باشند. کاربرد این سلول¬ها در درمان بیماری¬های ژنتیکی، بهبود خونسازی در بیماران سرطانی تحت درمان، بازسازی استخوان، کم‌خونی آپلاستیک (ناتوانی در ساختن نسوج جدید)، سرطان خون و سرطان مغز استخوان به خوبی نشان داده شده است. بررسی مکانیسم¬های سلولی و مولکولی دخیل در تأثیر سلول¬های بنیادی مزانشیمی بر سلول¬های سرطانی، گام مهمی در پیشبرد راهکارهای درمانی انواع سرطان می¬باشد. در این پژوهش، سلول¬های بنیادی مزانشیمی که در طرح قبلی مجری با کدپژوهان 59238 و کد اخلاق IR.TBZMED.REC.1396.849 از بافت مغز استخوان رت استخراج شده است، پس از شناسایی و بررسی قابلیت تمایز چندگانه مورد استفاده قرار خواهند گرفت. به این صورت که پس از دفریز سلول¬ها، درصد زنده¬مانی سلول¬ها به روش تریپان بلو تأیید خواهد شد و سلول¬های مربوطه از نظر میزان بیان نشانگرهای سطح سلولی CD90، CD105، CD31 و CD34 و قدرت تمایز به چربی و استخوان بررسی خواهند شد. از طرف دیگر سلول¬های رده لوسمی میلوئیدی حاد (KG1)، به طور جداگانه کشت داده شده و تکثیر می¬شوند. پس از رشد و تکثیر هر دو گروه سلولی، هر دو سلول به روش هم¬کشتی در مجاورت یکدیگر قرار می¬گیرند. آزمایشات انجام شده جهت بررسی اثرات سیتوتوکسیک و آپاپتوزی فاکتورهای مترشحه از سلول های بنیادی مزانشیمی بر سلول¬های لوسمی میلوئیدی حاد (KG1) در روزهای صفر، سه و شش انجام خواهد شد. بدین منظور سلول¬های KG1 در روزهای صفر، سه و شش جمع¬آوری شده، میزان تغییرات سیکل سلولی (Annexin-PI) و بیان ki-کاسپاز به روش فلوسایتومتری، میزان بیان ژن¬های مربوط به تغییر سیکل سلولی (CYCA، CYCB و CYCD) به روش real-time PCR و میزان senescence سلولی با اندازه گیری آنزیم بتاگالاکتوزیداز به روش الایزا انجام خواهد شد.