بررسی اثرات FTY720 روی بیوژنز میتوکندریایی سلولهای توبولار کلیه تحت استرس اکسیداتیو
Evaluation of FTY720 impact on mitochondrial biogenesis of renal tubular cells under oxidative stress
مجریان: سپیده زنونی واحد
خلاصه روش اجرا: امروزه ثابت شده است که آسیب حاد کلیه (AKI) باعث نارسایی حاد کلیه و افزایش مرگ و میر در بین بیماران می شود. در این رابطه، مطالعات مختلفی اثر محافظتی فینگولیمود را نشان داده اند اما مکانیسم دقیق مولکولی آن در AKI مشخص نشده است. لذا در این مطالعه اثر فینگولیمود بر سلولهای توبولار کلیوی انسانی که تحت شرایط استرس اکسیداتیو قرار گرفته اند و تاثیر آن بر بیان ژن های مهم نظیر Sirt-3، Sirt-1 و PGC-1α بررسی خواهد شد. بدین ترتیب که تیمار سلول های توبولار KDR/293 با فینگولیمود صورت خواهد گرفت. تاثیر این آنتی اکسیدان در القا یا عدم القای مرگ سلولی تحت شرایط استرس (القا شده با غلظت های مختلف ماده استرس زای AAPH و H2O2) با رنگ آمیزی DAPI، فلوسیتومتری با روش انکسین انجام خواهد گرفت. استخراج RNA پس از تیمار سلول ها با فینگولیمود و القا استرس اکسیداتیو انجام خواهد شد. به منظور انجامReal time PCR طراحی پرایمر بر روی ژن های فوق انجام خواهد شد. Real time PCR به صورت سه تکرار صورت خواهد گرفت و در نهایت آنالیز داده ها صورت می گیرد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 65485 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثرات FTY720 روی بیوژنز میتوکندریایی سلولهای توبولار کلیه تحت استرس اکسیداتیو |
| عنوان لاتین طرح | Evaluation of FTY720 impact on mitochondrial biogenesis of renal tubular cells under oxidative stress |
| نوع طرح | گرنت پژوهشی |
| اولویت طرح | غربالگری و پایش روند بیماریهای غیرواگیر با تاکید بر بیماریهای کلیوی |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 19 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | در این مطالعه در نظر داریم با بررسی و شناسائی مسیرهای مولکولی درگیر در شرایط استرس تحت تاثیر فینگولیمود، از پتانسیل های کاربردی آن بطور Signaling targeted therapy در بالین استفاده کنیم. همچنین، امید است با شناسایی مسیرهای مولکولی با پتانسیل های درمانی، گام موثری در پیشگیری و درمان نارسایی حاد کلیه برداشته باشیم. |
| اهداف اختصاصی | تعیین تاثیر FTY720 در بقای سلول های توبولار کلیه تحت استرس اکسیداتیو در مقایسه با سلول های کنترل -تعیین تاثیر فینگولیمود بر بیوژنز میتوکندریایی و سطح بیان ژن های Sirt-3 ، Sirt-1 و PGC-1α در سلول های توبولار کلیه تحت استرس اکسیداتیو |
| چکیده انگلیسی طرح | Multiple studies showed that acute kidney injury (AKI) and acute renal failure increase morbidity and mortality rate. As well, renoprotective effects of Fingolimod but molecular mechanisms were not exactly demonstrated. Therefore, in this research the effects of Fingolimod (FTY720) on mitochondrial biogenesis and related gene expression will be evaluated in kidney cells under oxidative stress. Accordingly, KDR/293 tubular cells will be treated with FTY720 and the effects will be determine whether it induces cell death under oxidative stress or not. In this way, oxidative stress will be induce via different concentrations of AAPH and H2O2 and it will be evaluated with DAPI staining and Flow cytometry with annexin method. RNA extraction will be perform after cell treatment with FTY720 and oxidative stress induction and then real-time PCR will be done with designated primers as triplicate. Finally data analysis will be perform. |
| کلمات کلیدی | گونه های فعال اکسیژن (ROS: Reactive oxygen species): شامل همه ملکولهای بسیار فعال واجد اکسیژن رادیکال هیدروکسیل،رادیکال آنیون سوپراکسید، پراکسید هیدروژن، اکسیژن تکی، رادیکال هیپوکلریت ولیپیدپراکسید های مختلف است. همه اینها قادرند با لیپید های غشا، اسیدهای نوکلئیک پروتئین ها، آنزیم هاو سایرملکولهای کوچک واکنش داده ومنجر به آسیب سلولی شوند. Confluency: پوشیده شدن سطح کشت از تک لایه سلولی فینگولیمود (Fingolimod) (FTY720): این دارو که با نام های تجاری دانلوین Danelvin و Gilenya شناخته می شود، جزو داروهای نقص ایمنی و تنظیم گر گیرنده اسفنگوزین-1 فسفات می باشد. فینگولیمود یا متوقف کردن لنفوسیت ها در غدد لنفاوی، از واکنش های خودایمنی جلوگیری به عمل می آورند. |
| ذینفعان نتایج طرح |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| محمد رضا اردلان | همکار اصلی |
| سپیده زنونی واحد | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
| یلدا رهبرسعادت | همکار اصلی |
| سیده مینا حجازیان | همکار اصلی |
| ابوالفضل برزگری | همکار اصلی |
| سعیده راضی صوفیانی | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر فینگولیمود (FTY720) باعث افزایش بیان PGC-1α در سلولهای اندوتلیال تحت شرایط استرس اکسیداتیو شد.متن خبر آسیب حاد کلیه (AKI) باعث نارسایی حاد کلیه و افزایش مرگ و میر در بین بیماران تحت اعمال جراحی و پیوند می شود. در این رابطه، داروی موثری برای کاهش آسیب کلیه در کلینیک وجود ندارد. لذا در این مطالعه اثر فینگولیمود (کلاس جدید از داروهای تنظیم کننده گیرنده اسفنگوزین1- فسفات) بر سلولهای اندوتلیال انسانی که تحت شرایط استرس اکسیداتیو القا شده با H2O2 قرار گرفتند، بررسی شد و تاثیر آن بر بیان ژن های مهم نظیر Sirt-3، Caspase 3و PGC-1α بررسی شد. در سلول های تحت استرس، تغییرات معنی داری در سطح بیان این ژنها در مقایسه با گروه کنترل (P<0.05) مشاهده شد. تیمار با فینگولیمود همچنین باعث تغییر در بیان ژنهای مورد مطالعه در سطح mRNA گردید که از لحاظ آماری معنی دار نبود (P>0.05). مطالعات دیگری لازم است تا اثر فینگولیمودبر مکانیسم های مولکولی درگیر در استرس سلولی مشخص گردد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
