تاثیر آنتی اکسیدانت اداراون بر بیان سیرتوئین ها در مدل اینویترو آسیب حاد کلیه (AKI)
The effects of antioxidant edaravone on sertuins gene expression in an in vitro model of acute kidney injury (AKI)
مجریان: سپیده زنونی واحد
خلاصه روش اجرا: امروزه مطالعات نشان می دهد که نارسایی حاد کلیه یا آسیب حاد کلیه باعث افزایش مرگ و میر بیماران می شود. مطالعات مختلف اثر renoprotective اداراون را نشان داده است. اما مکانیسم دقیق مولکولی آن در AKI مشخص نشده است. لذا در این مطالعه بررسی اثر EDA بر سلولهای توبولار کلیوی انسان تحت شرایط استرس اکسیداتیو و تاثیر بر بیان ژن های مهم نظیر سیرتوئین 1، 3 و PGC-1a صورت خواهد گرفت. بدین ترتیب که تیمار سلول های توبولار KDR/293 با EDA صورت خواهد گرفت. تاثیراین آنتی اکسیدان در القا یا عدم القا مرگ سلولی تحت شرایط استرس (القا شده با غلظت های مختلف ماده استرس زای AAPH و H2O2) با رنگ آمیزیDAPI، فلوسیتومتری با روش انکسین انجام خواهد گرفت. استخراج RNA پس از تیمار سلول ها با EDA و القا استرس اکسیداتیو انجام خواهد شد. به منظور انجام Real time PCR طراحی پرایمر بر روی ژن های فوق انجام خواهد شد. Real time PCR به صورت سه تکرار صورت خواهد گرفت و در نهایت آنالیز داده ها صورت می گیرد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 65484 |
| عنوان فارسی طرح | تاثیر آنتی اکسیدانت اداراون بر بیان سیرتوئین ها در مدل اینویترو آسیب حاد کلیه (AKI) |
| عنوان لاتین طرح | The effects of antioxidant edaravone on sertuins gene expression in an in vitro model of acute kidney injury (AKI) |
| نوع طرح | گرنت پژوهشی |
| اولویت طرح | غربالگری و پایش روند بیماریهای غیرواگیر با تاکید بر بیماریهای کلیوی |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 19 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | با درک مسیرهای مولکولی که در شرایط استرس می توانند تحت تاثیر EDA قرار گیرند، می توانیم از پتانسیل های کاربردی آن بطور Signaling targeted therapy در بالین استفاده کنیم. همچنین، امید است با شناسایی مسیرهای مولکولی با پتانسیل های درمانی، گام موثری در پیشگیری و درمان نارسایی حاد کلیه برداشته باشیم. |
| اهداف اختصاصی | تعیین تاثیر EDA بر بقا سلول های توبولار کلیه تحت استرس اکسیداتیو در مقایسه با سلول های کنترل -بررسی تاثیر EDA بر بیوژنز میتوکندریایی و سطح بیان ژن های سیرتوئین 1، 3 و PGC-1a در سلول های توبولار کلیه تحت استرس اکسیداتیو |
| چکیده انگلیسی طرح | Multiple studies showed that acute kidney injury (AKI) and acute renal failure increase morbidity and mortality rate. As well, renoprotective effects of Edaravone but molecular mechanisms were not exactly demonstrated. Therefore, in this research the effects of edaravone (EDA) on mitochondrial biogenesis and related gene expression will be evaluated in kidney cells under oxidative stress. Accordingly, KDR/293 tubular cells will be treated with EDA and the effects will be determine whether it induces cell death under oxidative stress or not. In this way, oxidative stress will be induce via different concentrations of AAPH and H2O2 and it will be evaluated with DAPI staining and Flow cytometry with annexin method. RNA extraction will be perform after cell treatment with EDA and oxidative stress induction and then real-time PCR will be done with designated primers as triplicate. Finally data analysis will be perform. |
| کلمات کلیدی | ROS: گونه های فعال اکسیژن (Reactive oxygen species) شامل همه ملکولهای بسیار فعال واجد اکسیژن رادیکال هیدروکسیل،رادیکال آنیون سوپراکسید، پراکسید هیدروژن، اکسیژن تکی، رادیکال هیپوکلریت و لیپیدپراکسید های مختلف است. همه اینها قادرند با لیپید های غشا، اسیدهای نوکلئیک پروتئین ها، آنزیم هاو سایرملکولهای کوچک واکنش داده ومنجر به آسیب سلولی شوند. Confluency: پوشیده شدن سطح کشت از تک لایه سلولی |
| ذینفعان نتایج طرح |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| سپیده زنونی واحد | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
| یلدا رهبرسعادت | همکار اصلی |
| سیده مینا حجازیان | همکار اصلی |
| محمد رضا اردلان | همکار اصلی |
| سعیده راضی صوفیانی | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر اداراون تاثیر معنی داری روی بیان ژن های درگیر در بیوژنز میتوکندری در سلول های تحت استرس اکسیداتیو نداشت.متن خبر ارتباط کلیدی بین آسیب حاد کلیوی (AKI) و نقص در بیوژنز میتوکندری وجود دارد. بر این اساس، تحریک و یا افزایش بیوژنز میتوکندری می تواند به عنوان یک راھکار مفید در درمان بیماری ھای کلیه مطرح باشد. با توجه به اهمیت استرس اکسیداتیو در پیشرفت AKI، هدف این مطالعه بررسی اثر آنتی edaravone، یک آنتی اکسیدان قوی و scavenger رادیکال های هیدروکسیل و پروکسیل، روی بیوژنز میتوکندری می باشد. برای این منظور، سلولهای توبولار کلیوی انسان تحت شرایط استرس اکسیداتیو القا شده با استرس زای AAPH قرار گرفتند و اثر اداراون بر بیان ژن های مهم نظیر سیرتوئین 1، 3 و PGC-1α بررسی شد. در سلول های تحت استرس، کاهش معنی داری در سطح بیان PGC-1α (P=0.01) و سیرتوئین 1 , 3 (P≤0.031) مشاهده شد . تیمار با اداراون باعث افزایش در بیان PGC-1α و سیرتوئین 3 گردید که از لحاظ آماری معنی دار نبود (P>0.06). مطالعات بیشتر برای گسترش درک فعلی استفاده از edaravone در مدلهای مختلف AKI ضروری است. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
