بررسی ارتباط فاکتورهای موثر در تکامل سلول های Treg و Th17 و میزان آنتی بادیهای آنتی-TPO در مبتلایان به سقط جنین
The association of Treg cells and Th17 cells development factors and Anti-TPO antibodies in RPL patients
مجریان: میترا نیافر , مهدی یوسفی
خلاصه روش اجرا: این مطالعه به صورت کیس کنترل بر روی سه جامعه آماری صورت می گیرد که شامل گروه زنان مبتلا به سقط جنین دارای آنتی بادی ضد TPO ، گروه زنان فاقد سقط جنین دارای آنتی بادی ضد TPO و گروه زنان سالم با حاملگی نرمال به عنوان گروه کنترل می باشد. بعد از نمونه گیری از هر دو گروه و جدا سازی پلاسما، سلول های تک هسته ای خون محیطی را با استفاده از فایکول جدا شده و به صورت تازه و در مجاورت PHA کشت داده می شوند. از PBMCها برای اندازه گیری فراوانی سلول های Treg و Th17 در خون محیطی بیماران مورد بررسی با روش فلوسایتومتری بررسی خواهد شد و با گروه کنترل مقایسه می گردد. به منظور بررسی میزان بیان فاکتور نسخه برداری اصلی ( Foxp3) و سایتوکاین اختصاصی (TGF-β) مربوط به زیر گروه سلول های Treg و فاکتور نسخه برداری اصلی (RORγt) و سایتوکاین اختصاصی (IL-17) مربوط به زیرگروه سلول های Th17 ، RNAکل سلول ها با استفاده از trizolاستخراج شده و با روش Quantitative Real time PCR سنجش می شود. در این روش کمی میزان نسخه های mRNA فاکتور های مذکور در مقایسه با β - اکتین به عنوان کنترل داخلی بر اساس میزان فلورسانس ایجاد شده اندازه گیری می شود، که در آن از رنگ اینترکاله شونده با DNA دو رشته ای(SYBR Green) استفاده شده است. جهت بررسی مقدار سایتوکاین TGF-β و IL-17 در سوپ رویی سلول های کشت داده شده از تکنیک الایزااستفاده می شود. در این روش میزان سایتوکاین مذکور بر اساس مقدار OD ایجاد شده با دستگاه الایزا ریدر گزارش می شود.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 65142 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی ارتباط فاکتورهای موثر در تکامل سلول های Treg و Th17 و میزان آنتی بادیهای آنتی-TPO در مبتلایان به سقط جنین |
| عنوان لاتین طرح | The association of Treg cells and Th17 cells development factors and Anti-TPO antibodies in RPL patients |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | حاملگی های پرخطر |
| نوع مطالعه | بررسی مقطعی ( Cross Sectional) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دکتری فوق تخصصی بالینی |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | سقط خودبخودی شایعترین عارضه حاملگی است. علت سقط حتی در بررسی های دقیق در نیمی از موارد غیرقابل توجیه باقی می ماند. طبق مطالعاتی که در سال های اخیر انجام شده یکی از مهمترین مکانسیم های احتمالی در شکست لانه گزینی سیستم ایمنی مادر می باشد زیرا جنین به عنوان یک سمی آلوگرافت (Semi allograft) برای مادر می باشد. مطالعات ثابت کرده اند که افزایش نسبت سلول های Th1 به Th2 در سلول های خون محیطی مادر می تواند به طور مستقیم با شکست لانه گزینی در ارتباط باشد. همچنین افزایش تعداد سلول های NK و Th17 خون محیطی مادر و سایتوکاین های مرتبط با آن ها نیز با افزایش احتمال ناباروری در ارتباط است. همچنین مطالعات متعددی نشان داده اند که افراد مبتلا به مشکلات محتلف ناباروری در خون محیطی خود دارای اتوآنتی بادی های مختلفی مانند آنتی تیروئید هستند که می تواند ناشی از افزایش تعداد یا فعالیت لنفوسیت های B نیز باشد. بر اساس آنچه گفته شد بسیاری از مطالعات، بر نقش سیستم ایمنی در سقط مکرر (RPL) تاکید داشته اند. هچنین این مطالعات نشان داده اند که اگر بیماران مبتلا به RPL به درستی انتخاب شوند و تحت روش های ایمونوتراپی مناسب قرار بگیرند افزایش معنی داری در میزان باروری آن ها مشاهده خواهد شد. چنانکه Koji Nakagawa و همکارانش طی مطالعه ای نشان دادند که 60% بیماران مبتلا به RPL به دنبال ایمونوتراپی مناسب نوزاد زنده به دنیا آورده اند. از آنجایی که مطالعه ای در جهت بررسی ارتباط سلول های سیستم ایمنی و پاسخ آنتی بادی های خودی ضد آنتی ژن های تیروئیدی انجام نشده است لذا هدف از این مطالعه بررسی ارتباط فراوانی سلول های T تنظیمی و سلول های Th17 و میزان بیان فاکتورهای تکاملی مرتبط با این سلول ها شامل فاکتورهای نسخه برداری و سایتوکاین ها و مقادیر آنتی بادیهای آنتی تیروئید(Anti TPO- Ab) بر روی نتیجه حاملگی فعلی از نظر سقط یا ادامه یافتن حاملگی می باشد. |
| اهداف اختصاصی |
مقایسه میزان بیان فاکتورهای نسخه برداری موثر در تکامل سلول های Treg و Th17 در بیماران مبتلا به سقط مکرر جنین دارای Anti-TPO و بدون سقط جنین دارای Anti-TPO و گروه کنترل -مقایسه میزان بیان ژن سایتوکاین های مترشحه از سلول های Treg و Th17 در بیماران مبتلا به سقط مکرر جنین دارای Anti-TPO و بدون سقط جنین دارای Anti-TPO و گروه کنترل -مقایسه میزان ترشح سایتوکاین های مترشحه از سلول های Tregو Th17 در بیماران مبتلا به سقط مکرر دارای Anti-TPO و بدون سقط جنین دارای Anti-TPO و گروه کنترل -مقایسه میزان تولید اتوآنتی بادی های ضد تیروپراکسیداز تیروئید(Anti TPO) و آنتی بادی ضد تیروگلوبولین (Anti TG) در بیماران مبتلا به سقط مکرر دارای Anti-TPO و بدون سقط دارای Anti-TPO و گروه کنترل |
| چکیده انگلیسی طرح | Spontaneous abortion is the most common complication of pregnancy. The cause of miscarriage remains unexplained even in close scrutiny in half of cases. |
| کلمات کلیدی | RPL : وقوع ۲ یا بیش از ۲ بار شکست متوالی حاملگی را RPL گویند. TPO : تیروئید پراکسیدازیک آنزیم در غشای میکروزومی سلولهای فولیکولر تیروئید است که در بیوسنتز هورمونهای تیروئیدی دخالت دارد Treg: زیر مجموعه ای از سلول های TCD4+ که با تولید سایتوکاین های ضد التهابی IL-10 و TGF-β باعث کاهش التهاب و جلوگیری از پیشرفت بیماری التهابی می شوند. Th17: زیر مجموعه ای از سلول های TCD4+که با تولید سایتوکاین های التهابی IL-17 باعث افزایش التهاب و پیشرفت بیماری التهابی می شوند. Foxp3: یک فاکتور نسخه برداری و عضو خانواده سرچنگالی از عوامل نسخه برداری است و برای تکامل و عملکرد قسمت عمده ای از سلول های Tتنظیمی ضروری است. RoRγt: یک فاکتور نسخه برداری که عضوی از خانواده پذیرنده های رتینوئیدی از خانواده پذیرنده های هسته ای می باشد و یک پروتئین محدود به سلول T است. به نظر می رسد که RORγt و STAT3 با همکاری با یکدیگر بر لوکوس ژنیIl-17 اثر می کنند و تولید این سایتوکاین را تحریک میکنند. TGF-β: سایتوکاین مهاری است که تکامل سلول های Treg محیطی وابسته به آن می باشد و توسط این سلول ها تولید می شود. با این وجود این سایتوکاین همراه با سایتوکاین های تولید شده در جریان پاسخ های ایمنی ذاتی همانند IL-6وIL-1 ، تکامل زیر رده Th17 را با استفاده از توانایی خود در القا فاکتور رونویسی RoRγt، افزایش می دهد. IL-17: یک سایتوکاین التهابی است و مهمترین واسطه بین ایمنی آداپتیو با میانجی گری سلول T و سیستم ایمنی ذاتی به خصوص جز التهابی پاسخ های ذاتی است. جواني جمعيت - سقط |
| ذینفعان نتایج طرح | زنان باردار |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| میترا نیافر | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| مهدی یوسفی | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| امیر مهدی زاده حقیقی | مشاور |
| صنم دولتی | مشاور |
| وجیهه سمائی | دانشجوی مالک پایان نامه |
| شهلا دانایی | مشاور |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر ارتباط بین بیماری خودایمنی تیروئید و افزایش خطر سقط جنینمتن خبر خودایمنی تیروئید به عنوان شایع ترین بیماری خودایمنی در زنان در سنین باروری در نظر گرفته می شود. بین خودایمنی تیروئید و افزایش خطر سقط مکرر بارداری (RPL) ارتباط وجود دارد. فرض بر این بود که خودایمنی تیروئید ممکن است وضعیت التهابی را تسریع کرده و باعث تشدید سقط جنین شود. یافته های ما افزایش میزانT helper 17 (Th17)، افزایش بیان و ترشح گیرنده رتینوئید گاما T (RORγT) و اینترلوکین-17 (IL-17) و ترشح در کنترل TPO (پراکسیداز تیروئید) و TPO RPL را نشان داد. در مقابل، فرکانس تنظیمی T (Tregs) و ژن Forkhead Box P3 (Foxp3) و فاکتور رشد تبدیل کننده بتا (TGFβ) در گروه های TPO و TPO RPL به طور قابل توجهی کمتر بود. علاوه بر این، سطح بیان mRNA RORγT و IL-17 در TPO RPL در مقایسه با گروه کنترل سالم و گروه کنترل TPO به طور قابل توجهی بالاتر بود. در مقابل، بیان FoxP3 و TGFβ در TPO RPL کمتر بود. نتایج این بررسی ها نشان داد که بیماری تیروئید باید به شدت در بیماران مبتلا به RPL کنترل شود. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
