بررسی متیلاسیون پروموتور و سطح بیان ژن TNF-α در بیماران روماتیسم پالیندرومیک
TNF-α promoter methylation and expression level in patients with palindromic rheumatism
مجریان: علیرضا خبازی اسکویی , بهزاد برادران
خلاصه روش اجرا: ابتدا از 40 بیمار مراجعه کننده به بیمارستان امام رضا که بیماری روماتیسم پالیندرومیک در آنها توسط متخصتص روماتولوژی بر اساس معیارهای تشخیصی، محرز گردیده است و 40 نفر بیمار مبتلا به آرتریت روماتویید و 40 فرد سالم نمونه خون گرفته خواهد شد و سپس به روش فایکول سلول های تک هسته ای خون جدا شده و DNA و RNA نمونه ها بر اساس پروتکل شرکت سازنده کیت استخراج میشود. برای اندازه گیری سطح متیلاستیون ژن ها از تکنیک ms-HRM استتفاده میشود. در این روش تغییرات دمای ذوب DNA استخراج شده توسط دستگاه DNA تیمار شده با بی سولفیت در حضور پرایمر اختصاصی و برای تشخیص سطح متیلاسیون پروموتر ژنها از تکنیک Real-time PCR استتفاده خواهد شد. بعد از اخذ نمونه خون از افراد بیمار و سالم، به روش فایکول سلولهای تک هسته ای خون جدا شده و RNA نمونه ها بر اساس پروتکل شرکت سازنده کیت (ترایزول) استخرا ج و سپس با استتفاده از استپکتوفتومتر نانودراپ مورد ارزیابی کمی و کیفی قرار می گیرد. RNA استخرا ج شده با استفاده از کیت cDNA Reverse Transcription Kit به cDNA تبدیل خواهد شتتد ( 15 ). سپس با استفاده از تکنیک Real-time PCR میزان بیان ژن سنجیده خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 64729 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی متیلاسیون پروموتور و سطح بیان ژن TNF-α در بیماران روماتیسم پالیندرومیک |
| عنوان لاتین طرح | TNF-α promoter methylation and expression level in patients with palindromic rheumatism |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | بیماری های اتوایمیون (آرتریت روماتوئید و لوپوس اریتماتوز سیستمیک) |
| نوع مطالعه | مطالعه مورد/شاهد ( Case - Control ) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دستیار تخصصی بالینی (رزیدنتی) |
| مدت اجرا - ماه | 15 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | نقد عوامل ژنتیک و اپی ژنتیک در پاتوژنز بیماریهای خود ایمنی و استفاده از مارکرهای ژنتیکی در تشخیص و درمان بیماران روماتیسم پالیندرومیک |
| اهداف اختصاصی | تعیین میزان متیلاسیون مربوط به پروموتر ژن TNF-α در بیماران مبتلا به روماتیسم پالیندرومیک و مقایسه آن با گروه کنترل -تعیین سطح بیان ژن TNF-α در بیماران مبتلا به روماتیسم پالیندرومیک و مقایسه آن با گروه کنترل -تعیین سطح سرمی TNF-αدر بیماران مبتلا به روماتیسم پالیندرومیک و مقایسه آن با گروه کنترل |
| چکیده انگلیسی طرح | Initially, 40 patients referred to Imam Reza Hospital with palindromic rheumatism were diagnosed by a rheumatologist based on diagnostic criteria and 40 controls without rheumatic disease and 40 patients with rheumatoid arthritis will be sampled. Then, the Ficoll method isolates the blood cells and extracts DNA and RNA according to the kit manufacturer's protocol. The ms_HRM technique is used to measure methylation levels of genes. At this intensity, methylation changes can be measured by changes in sample melting temperature, and real-time PCR will be used to detect methylation levels of the promoter of genes. After blood sampling from patients and healthy individuals, blood mono nuclear cells will be isolated via "Ficoll" technique and then RNA will be extracted according to the manufacturer's kit (Trizol) protocol, then it will undergo qualitative and quantitative evaluation using a nanodrop spectrophotometer. The RNA extracted will be converted to cDNA using the cDNA Reverse Transcription Kit (15). Gene expression will then be measured using Real-time PCR. |
| کلمات کلیدی | روماتیسمم پالیندرومیک: با حملات مکرر و نامنظم بدون تب، آرتریت، پری آرتریت، و بعضا تورم و اریتم بافت نرم اطراف مفصل مشخص میشود که در فواصل نامشخص رخ داده و به مدت چند ساعت تا چند روز طول میکشد. حملات ناگهانی بیماری غالبا تک مفصلی بوده اما میتواند الیگو یا پلی آرتیکولار نیز باشد. در فواصل حملات فرد کاملا بدون علامت بوده و یافته های پاراکلینیکی نیز عموما طبیعی میباشد. اپیژنتیک: به تغییرات قابل تورار در بیان ژن گفتته میشود که بدون تغییر توالی DNA ژنومی اتفاق میافتد. این تغییرات یا در DNA کروموزومی و یا در پروتئینه ایی که به طور مستقیم به DNA کروموزومی متصل هستتند صورت میگیرد. اپیژنتیک به درک و شتناخت بیماریهای پیچیده کمک میکند. یکی از بیومارکرهای اپیژنتیکی که به خوبی مورد مطالعه قرار گرفته است، متیلاسیون DNA است. ms-HRM : در این روش تغییرات نقطه ذوب DNA تیمار شده با بی سولفیت نشاندهنده تغییرات متیلاسیون می باشد. که با دستگاه Real Time قابل اندازه گیری است. |
| ذینفعان نتایج طرح | با توجه به اینکه مکانیسمهای فیزیوپاتولوژی و همچنین تشخیص بیماری روماتیسم پالیندرومیک هنوز بطور کامل شناسایی نشده است و به احتمال زیاد مکانیسم آن نیز مشابه سایر بیماریهای اتوایمون و التهابی خواهد بود، لذا این مطالعه برای شناخت این مکانیسمها و تشخیص زودهنگام بیماری و یافتن راهکار درمانی احتمالی برای درمان بیماری روماتیسم پالیندرومیک انجام می شود. لذا با توجه به تازه بودن مطالعات در این زمینه انتظار میرود با در نظر گرفتن این مطالعه و مطالعات مرتبط، شاید بتوان در روشن شدن مکانیسمهای فیزیوپاتولوژی این بیماری و یافتن روش های نوین در تشخیص زودهنگام بیماری و یافتن راهکار درمانی احتمالی برای درمان بیماری سود جست. از نتایج این طرح در درجه اول بیماران سود خواهند برد. با توجه به اینکه در درمان این بیماری از داروهای ضد التهابی استفاده می شود ، صنعت نیز میتواند از نتایج آن سود ببرد . |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| فرانک شیخ منزه | دانشجوی مالک پایان نامه |
| علیرضا خبازی اسکویی | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| بهزاد برادران | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| آیدا مالک مهدوی | مشاور |
| میلاد اسدی | همکار اصلی |
| شیما رحمانی | همکار اصلی |
| نادره رشتچی زاده | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر افزایش بیان ژن TNF-α در روماتیسم پالیندرومیک می تواند به عنوان فاکتور مهم در پیشرفت بیماری به سمت روماتیسم مفصلی باشد.متن خبر با توجه به اینکه روماتیسم پالیندرومیک با التهاب دوره ای مفاصل همراه بوده و اغلب به روماتیسم مفصلی تبدیل می شود، لذا هدف این مطالعه بررسی بیان ژن و سطح سرمی TNF-α در روماتیسم پالیندرومیک و نقش احتمالی آن در پیشرفت این بیماری بود. در این مطالعه مقطعی، بیماران روماتیسم پالیندرومیک، روماتیسم مفصلی و افراد سالم کنترل انتخاب شدند و بیان ژن و سطح سرمی TNF-α با روشهای آزمایشگاهی مربوطه اندازه گیری شد. نتایج نشان داد که بیان ژن و سطح سرمی TNF-α در بیماران روماتیسم پالیندرومیک و روماتیسم مفصلی بطور معناداری بالاتر از گروه سالم کنترل است و لذا هدف قرار دادن این سیتوکین به عنوان یک استراتژی درمانی احتمالی جهت جلوگیری از پیشرفت بیماری مطرح می گردد. پیشنهاد می شود مطالعات آتی با حجم نمونه بالاتر و بصورت پیگیری طولانی مدت در این زمینه انجام شود. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
