بازسازی تخمدان با استفاده از سلولهای بنیادی مشتق از رحم در رت های با نارسایی زودرس تخمدان
Ovarian rejuvenation using of uterine derived stem cells in rats with premature ovarian failure
مجریان: مهدی مهدی پور
خلاصه روش اجرا: پس از اخذ مجوز از کمیته اخلاق و معاونت پژوهشی دانشکده¬ی علوم پزشکی تبریز مطالعه حیوانی تجربی با 66 رت ماده از نژاد ویستار (8-7 هفته) با وزن متوسط 200 گرم شروع شده و به طور تصادفی به 5 گروه 12 تایی تقسیم خواهند شد. 1- رت های گروه کنترل بدون هیچگونه مداخله و درمان 2- رت های کنترل POF، یائسه شده با Cyclophosphamide (CTX) و بدون تزریق سالین یا سلولهای بنیادی CD146 مشتق از رحم 3- رت های یائسه شده با CTX و تزریق داخل بافت تخمدانی سالین 4- رت های یائسه شده با CTX و تزریق داخل تخمدانی سلولهای CD146 مثبت مشتق از رحم 5- رت های یائسه شده با CTX و تزریق داخل تخمدانی سلولهای CD146 منفی مشتق از رحم. جهت ایجاد یائسگی در گروه های 2 تا 5 برای روز اول CTX mg/kg 200 و برای روز دوم تا چهاردهم 8 mg/kg به روش داخل صفاقی تزریق خواهد شد، جهت کشت سلولهای بنیادی CD146 مشتق از رحم، ابتدا 7 سر رت ماده بالغ را طبق دستورالعمل کمیته اخلاق دایسکت کرده و بافت رحم استخراج و به آزمایشگاه منتقل خواهد شد. متعاقب هضم آنزیمی از تکنیک فایکول جهت جداسازی سلولهای تک هسته ای استفاده خواهد شد. سلولهای بنیادی تک هسته ای با PBS شستشو و در محیط کشت DMEM-H.G با FBS 10% و آنتی بیوتیک پنی سیلین-استرپتومایسین کشت داده خواهند شد. پس از کسب تعداد سلول مورد نظر، سلولهای CD146 مثبت توسط تکنیک MACS جداسازی خواهند شد. در ادامه سلولهای CD146 مثبت و منفی و سالین در قالب گروههای معرفی شده به داخل تخمدان رت های مد نظر تزریق خواهند شد. نهایتا تمام رت ها در هفته چهارم پس از تزریق با جابجایی مهره ی گردنی کشته شده، و بلافاصله بافت های تخمدان خارج شده و نمونه سرم جهت مطالعات بافت شناسی و ارزیابی سطوح هورمونی FSH و استرادیول گرفته شدند. در نهایت پس از پایان جمع آوری داده ها، نتایج با استفاده از آزمون های آماری از طریق نرم افزار SPSS مورد مقایسه و تحلیل قرار خواهند گرفت.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 64542 |
| عنوان فارسی طرح | بازسازی تخمدان با استفاده از سلولهای بنیادی مشتق از رحم در رت های با نارسایی زودرس تخمدان |
| عنوان لاتین طرح | Ovarian rejuvenation using of uterine derived stem cells in rats with premature ovarian failure |
| نوع طرح | طرح تحقیقاتی |
| اولویت طرح | سلولهای بنیادی، مهندسی بافت و پزشکی بازساختی و زیست مواد |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 24 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | یائسگی یکی از مراحل تکاملی زندگی زنان به شمار می رود که به لحاظ فیزیولوژیکی آنان را در گروه آسیب پذیر جامعه قرار میدهد. با توجه به افزایش امید به زندگی، زنان بیش از یک سوم عمر خود را در دوران یائسگی سپری می کنند. نارسایی زودرس تخمدان (POF) نیز حدود 1% از زنان زیر 40 سال را در دنیا تحت تاثیر قرار می دهد و 5% از زنان 40-45 سال دچار یائسگی زودرس خود به خودی می شوند که یائسگی در سنین زودرس است. تغییرات فیزیولوژیک این دوران به علت مکانیزم کاهش استروژن در نتیجه ی توقف عملکرد تخمدان و افزایش هورمون FSH منجر به بروز علائمی می گردد که در کل باعث کاهش کیفیت زندگی آنها می شود. استروژن درمانی سیستمیک یکی از متداول ترین درمان هاست که دارای عوارض جانبی نظیر افزایش خطر سرطان سینه، آندومتر و تخمدان می باشد. درمان مقطعی عوارض و تحمیل بار مالی سنگین بر بهداشت و درمان از دیگر مشکلات درمان های موجود است که باعث شده در پی استفاده از تکنیکهای نوین درمان بود تا بتوان بر عوارض درمان و تحمیل بار مالی گزاف فائق آمد. در حال حاضر، درمان POF شامل: درمان جایگزینی هورمون (HRT) و درمان با سلولهای بنیادی میباشد. با این حال، HRT اساسا عملکرد طبیعی تخمدان را بازیابی نمی کند. علاوه بر این، یک مطالعه نشان داده است که HRT ممکن است خطر ابتلا به سرطان سینه را افزایش دهد. درمان با سلول های بنیادی یک رویکرد جدید برای درمان بالینی POF شناخته شده است. سلول های بنیادی، سلول هایی هستند که ظرفیت نامحدود دارند، و سلولهای بنیادی مشتق از رحم نوعی از سلولهای بنیادی مزانشیمی (MSC ) می باشند که قابلیت self-renewal، میزان تکثیر بالا و قابلیت چندتمایزی را دارند. سلولهای بنیادی مشتق از رحم همچنین قابلیت تمایز چندتوانی را به انواع سلولها از جمله: آدیپوزیت، میوسیت، نوروسیت، سلوهای اندوتلیال، هپاتوسیت و...را دارند. در این مطالعه بر آن شدیم تا از توانایی این نوع سلولها (رحم) بهعنوان روشی نوین در عرصه ی علوم پزشکی در درمان یائسگی و بازتوانی تخمدان برای اولین بار در این مطالعه بهره بگیریم و درمانی ریشه ای برای حل این مشکل بیابیم تا با این روش بتوانیم علاوه بر یائسگی طبیعی، یائسگی زودرس را نیز تحت پوشش قرار دهیم. با توجه به محدودیت و عوارض درمان های موجود، اهمیت یافتن روش های نوین جهت درمان و بهبود علایم یائسگی کاملا مشخص و واضح است. بدلیل مسائل اخلاقی و عدم دسترسی به بافت تخمدانی انسان، مطالعات بر روی بازتوانی تخمدان انسان دارای محدودیت بسیاری می باشند و همچنین از سویی دیگر کشف روش های کمکی جهت درمان یائسگی به آرامی پیش میرود. بنابراین مطالعه بر روی مدلهای حیوانی بویژه موش بدلیل شباهت در برخی مکانیسم ها برای بازتوانی تخمدان بسیار حیاتی به نظر میرسد. در مطالعه حاضر، برای اولین بار از تزریق سلولهای مشتق ار رحم برای بازتوانی تخمدان و درمان یائسگی بهره گرفته خواهد شد و با توجه به قابلیت بالای سلولهای رحم در ترمیم میتوان به نتایج مفید آن برای بازتوانی تخمدان امید داشت. امید است نتایج این مطالعه بتواند بهعنوان راهگشایی برای مطالعات بعدی در جهت استفاده از این ترکیبات در درمان یائسگی و ناباروری مورد استفاده قرار گیرد. |
| اهداف اختصاصی | ایجاد مدل آزمایشگاهی منوپوز (نارسایی زودرس تخمدان POF)، در موش های صحرایی -جداسازی و کشت و تزریق سلول های بنیادی CD146 مثبت و منفی از بافت رحم رت ها -مقایسه­ ی تعداد فولیکول های تخمدان و سطح خونی هورمون­های FSH و استروژن در گروه­های مورد مطالعه |
| چکیده انگلیسی طرح | Following animal modeling for Premature Ovarian Insufficiency (POF) using Cyclophosphamide (CTX), CD146 positive cells derived from rat uterus will be isolated using MACS technique and injected through intra-ovarian injection in different groups of both CD146 positive and negative. In the control group, rats will receive saline and in the POF group they will not get any injection after animal modeling. After 4 weeks following intervention, rats will be dissected and ovarian tissues will be processed for both histological as well as serum levels of FSH and E2 hormone analysis. Results will be evaluated after proper statistical interpretations. |
| کلمات کلیدی | نارسایی زودرس تخمدان: عدم فعالیت فولیکولی تخمدان پیشتر از موعد (قبل از 40 سالگی) که برای آن هیچگونه دلایل پاتولوژیک وجود ندارد. در این طرح از داروی CTX جهت القای POF استفاده خواهد شد. سلول های بنیادی: سلول های تمایز نیافته ای که توانایی تقسیم و تولید سلول هایی با خواص یکسان (خود نوزایی) و ایجاد انواع سلول های تمایز یافته تر را دارند سلول های بنیادی گفته می شود. |
| ذینفعان نتایج طرح | عوارض دوران یائیسگی از جمله مشکلات مرتبط با اختلالات هورمونی و آتروفی تخمدان ها گریبان گیر افراد یائسه می باشد و متاسفانه بیمارانی که گریبان گیر یائسگی زودرس و عوارض نارسایی های هورمونی هستند، ذینفعان اصلی نتایج این طرح خواهند بود. از آنجایی که اثرات بسیار ناخوشایند این بیماری ها باعث تداخل در زندگی روزمره قشری از جامعه می شود که در سن فعال اجتماعی به سر میبرند و نیاز به استفاده از هورمون درمانی و مکمل های اختصاصی داشته، بار اقتصادی مضاعف بر سیستم بهداشت و درمان اعمال می کنند، لزوم توجه بیشتر به این مقوله بیش از پیش احساس میگردد. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| مهدی مهدی پور | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
| ناهیده نزدیک بین یامچی | همکار اصلی |
| حلیمه مبارک | همکار اصلی |
| شاهین احمدیان | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر سلولهای بنیادی مزانشیمی و سلولهای آندوتلیالی توانایی ترمیم تخمدان آسیب دیده در شرایط نارسایی زودرس تخمدان را دارا می باشند.متن خبر با توجه به افزایش بیماریهای مرتبط در حوزه فرزند آوری و لزوم بکارگیری شیوه های نوین درمانی در درمان نارسایی زودرس تخمدان، در این طرح از سلولهای بنیادی مزانشیمی و آندوتلیالی بعنوان گزینه درمانی جایگزین استفاده گردید. در ابتدا مدل حیوانی نارسایی زودرس تخمدان در رت ایجاد و متعاقبا از سلولهای بنیادی مزانشیمی و آندوتلیالی جهت درمان استفاده گردید.نتایج حاکی از این مهم بود که سلولهای بنیادی مزانشیمی و سلولهای آندوتلیالی قابلیت تعدیل سطح فیبروز بافتی را دارا بوده و توانستند بافت تخمدان آسیب دیده را از لحاظ جمعیت فولیکولی سالم و رگزایی بصورت معنی دار بهبود بخشند. به نظر می رسد، شناسایی درمان های مبتنی بر سلول و فرآورده های سلولی می توانند در آینده ای نه چندان دور بعنوان گزینه ای جایگزین و تاثیر گذار مورد استفاده قرار گیرند. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
