بررسی اثر مکمل اسیدهای چرب کنژوگه بر پارامترهای متابولیکی در مبتلایان به توده ی خوش خیم با لحاظ سطح بیان ژن PPARƔ: کارآزمایی بالینی تصادفی شاهد دار

مجریان: سعید پیروزپناه

خلاصه روش اجرا: این مطالعه به صورت کارآزمایی بالینی تصادفی شاهد دار طراحی و اجرا خواهد شد. نمونه ها شامل زنان مبتلا به خوش خیمی پستان مراجعه کننده به بیمارستان خصوصی نورنجات و بیمارستان مرکز آموزشی، درمانی امام رضا هستند که ابتلای آنها توسط سونوگرافی یا از نظر بررسی های پاتولوژیک روی توده ی خوش خیم توسط Fine-needle aspiration (FNA) تعیین و به تأیید پزشک معالج رسیده باشد. پیش از شروع مطالعه بیماران BBD توسط کارشناس تغذیه ی آموزش دیده از اهداف ونحوه ی انجام مداخله آگاه می شوند و در صورت تمایل فرم رضایت نامه کتبی (پیوست1)را امضا خواهند کرد. سپس با بررسی بیماران از نظر معیارهای ورود به مطالعه با استفاده از داده های پرسشنامه ی داده های دموگرافیک و اطلاعات پزشکی(پیوست2) به عنوان افراد شرکت کننده جامعه ی نمونه گیری وارد مطالعه خواهند شد. این پرسشنامه شامل مشخصات عمومی فرد، اطلاعات مربوط به پیشینه ی سایر بیماریها، سن تشخیص توده خوش خیم، مدت زمانی که از زمان تشخیص گذشته، وضعیت یائسگی، پیشینه ی خانوادگی سرطان پستان و سایر بدخیمی ها و وضعیت دریافت دارویی می باشد. در پایان مطالعه نیز پرسشگری در زمینه های یاد شده انجام خواهد شد. نمونه گیری در دو گروه مداخله (25 نفر) و دارونما (25 نفر) با استفاده از روش تصادفی طبقه بندی شده بر پایه ی نوع بیماری صورت خواهد پذیرفت. در این مطالعه فرد سوم که از گروه بندی ناآگاه است. مسئول توزیع مکمل ها خواهد بود و نیز بسته های حاوی کپسول توسط فردی غیر از این فرد به صورتA وB کد گذاری می شود تا شرایط دو سوکور بودن مطالعه رعایت شود. مدت مداخله 13 هفته خواهد بود. گروه مداخله روزانه 1000 میلی گرم روغن حاوی CFA به صورت یک کپسول 1000 میلی گرمی و 10 واحد ویتامین E (در هر کپسول) و گروه دارونما یک عدد کپسول محتوی روغن ترکیبی خنثی 1000 میلی گرمی که از نظر مشخصات ظاهری مشابه کپسول های مداخله هستند به همراه 10 واحد ویتامین E روزانه دریافت خواهند کرد. بسته های حاوی کپسول برای مصرف4 هفته در اختیار بیماران قرار خواهد گرفت و از آنها خواسته می شود چک لیست مصرف کپسولها (پیوست 3) را در طول این مدت تکمیل نمایند و مقادیری را که مصرف نکرده اند در پایان 4 هفته بازگردانند. از تمام بیماران در آغاز مداخله و نیز در پایان مطالعه 8 میلی لیتر نمونه خون ناشتا جهت انجام آزمایشات بیوشیمیایی گرفته خواهد شد. بلافاصله پس از نمونه گیری (به فاصله ی 20 دقیقه) نمونه های خون در یخچال جمع آوری و سپس با سانتریفیوژ 3500 دور به مدت 15 دقیقه فازهای سرمی و پلاسمایی جدا می شوند. مایع رویی در میکرو تیوپ های جداگانه منتقل و در دمای 70- درجه ی سانتیگراد تا انجام آزمایش ذخیره می شوند. متغیرهای بیوشیمیایی شامل ارزیابی سطوح پلاسمایی IGF-1 و گلوکز و سطوح سرمی IGFBP-3، پپتیدC (C-Peptide)، انسولین و PPARγ می باشد. اندازه گیری سطح پلاسمایی IGF-1 با استفاده از دستگاه Automatched electrochemiluminescent immunoassay و کیت های مربوطه مطابق با دستورالعمل کیت انجام خواهد گرفت. و ارزیابی سطح گلوکز پلاسمایی توسط روش هگزوکیناز و نیز سطوح سرمی پپتید C (C-Peptide)، IGFBP-3، انسولین و PPARγ سرم توسط روش ELISA و کیت های مخصوص پیرو دستورالعمل کیت صورت خواهد پذیرفت. همچنین در این مطالعه حساسیت به انسولین به کمک مدل HOMA-IR و QUICKI و به ترتیب با استفاده از فرمول های HOMA-IR=[glucose(mmol/l)Îinsulin(mU/l)]/22.5 و QUICKI=1/[log[fasting insulin(μU/ml)]+ log[fasting glucose(mg/dl)]] محاسبه خواهد گردید. سطح فعالیت بدنی بیماران با استفاده از پرسشنامه ی استاندارد فعالیت بدنی(پیوست4) توسط کارشناس تغذیه ی آموزش دیده و ثبت خوراک 24 ساعته 3 روزه (2 روز کاری هفته و یک روز تعطیل) (پیوست5) پس از آموزش بیماران از نحوه ی تکمیل توسط خود بیماران در شروع مطالعه و هفته های چهارم و هشتم و پس از پایان مداخله تکمیل خواهد شد. نمایه های تن سنجی بیماران شامل وزن (کیلوگرم)، قد (سانتی متر)، دور کمر و دور باسن (سانتی متر) و نیز وضعیت مصرف داروها، فشارخون سیستولیک و دیاستولیک و شرایط بیمار(از لحاظ بالینی) در شروع مطالعه و هفته های چهارم و هشتم و پس از پایان مداخله ارزیابی خواهند شد. شرایط تن سنجی و سطوح فشار خون توسط کارشناس تغذیه ی آموزش دیده و مجرب ارزیابی و ثبت خواهد شد. نمایه ی توده ی بدنی با استفاده از فرمول نسبت وزن به ازای کیلوگرم بر مجذور قد به ازای متر، همچنین نسبت دور کمر به دور باسن محاسبه خواهند شد. بررسی سطح بیان ژن PPARγ با استفاده از روش Real-Time PCR صورت خواهد گرفت در این مطالعه تجزیه و تحلیل آماری داده ها توسط نرم افزار SPSS نسخه ی 16 صورت می گیرد. توزیع داده ها توسط هیستوگرام و آزمون Kolmogrov-smirnov بررسی خواهد شد. متغیرهای کمی نرمال بر اساس میانگین و انحراف معیار گزارش خواهد شد. متغیرهای کیفی نیز بر اساس درصد و فراوانی گزارش خواهد شد. متغیر های کمی که در طول مطالعه 2 بار اندازه گیری می شود جهت مقایسه ی میانگین آنها در هر گروه از آزمون t زوجی و برای مقایسه ی میانگین آنها بین دو گروه از آزمون t-test استفاده می شود و در صورتیکه توزیع آنها نرمال نباشد از آزمون های Wilcoxon و Man-Whitney استفاده بعمل می آید. جهت بررسی ارتباط بین متغیرهای رتبه ای از Odds ratio (95% CI) استفاده خواهد شد. تعدیل داده ها از نظر متغیرهای مخدوشگر نیز در مدل های فرضی توسط Logistic regression بدست می آید. در این مطالعه P<0.05 از نظر آماری معنی دار در نظر گرفته می شود.