ارزیابی اثر نانوذرات سیلیکای متخلخل حاوی سیس پلاتین و کورکومین بر بیان ژنهای BAX و BCL-2 در سلولهای سرطان دهان (HN5)
Effect of curcumin-cisplatin loaded mesoporous silica nanoparticles on the expression of BAX and BCL-2 in oral cancer cells (HN5)
مجریان: سیمین شریفی , محمدعلی قویمی
خلاصه روش اجرا: سلولهای HN5 انیستستو پاستور تهران خریداری خوهد شد. به منظور انجام این آزمایشات، سلولهای HN5 (که low passage می باشد) بصورت تک لایه در محیط DMEM با گلوکز بالا حاوی سرم 10% (FBS یا Fetal Bovin Serum) و آنتی بیوتیک کشت داده شده و پس از رسیدن به سطح Confluency ، با نانوذرات سیلیکای متخلخل حاوی سیس پلاتین و کورکومین مواجه می شوند. سپس RNA از سلول های مزبور استخراج خواهد شد. با استفاده از 1 میکرو گرم RNA واکنش RT ست می گردد. واکنش در دستگاه ترموسایکلر بر طبق برنامه دمایی خاص آغاز می شود. در ادامه با استفاده از روش Real time-PCR نسخه های ژنهای bax و bcl-2 بررسی و تعیین مقدار می شود. بطور خلاصه برای هر ژن یک جفت Primer طراحی خواهد شد. لازم به توضیح است که برای کنترل تغییرات بین نمونه ای، از Housekeeping Gene ß-Actin استفاده خواهد شد و از نسبت دانسیته ژن مورد نظر بر ß-Actin برای گزارش نتایج استفاده خواهد شد. نتایج مطالعه با استفاده از روشهای آماری توصیفی (میانگین ± انحراف معیار) گزارش خواهد شد. به منظور مقایسه بیان ژن های bcl-2 و bax با و بدون حضور نانوذرات، از آزمون t مستقل و یا معادل نا پارامتریک آن استفاده خواهد شد. آنالیز آماری با استفاده از نرم افزار SPSS ورژن 17 انجام شده و سطح معنی داری 0.05≥P در نظر گرفته خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 63939 |
| عنوان فارسی طرح | ارزیابی اثر نانوذرات سیلیکای متخلخل حاوی سیس پلاتین و کورکومین بر بیان ژنهای BAX و BCL-2 در سلولهای سرطان دهان (HN5) |
| عنوان لاتین طرح | Effect of curcumin-cisplatin loaded mesoporous silica nanoparticles on the expression of BAX and BCL-2 in oral cancer cells (HN5) |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه, گرنت پژوهشی |
| اولویت طرح | فناوریهای نوین در دندانپزشکی با تاکید بر فناوری نانو، نانوذرات، بایومتریالها و اپلیانسهای داخل دهانی |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دکتری عمومی |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | با توجه به این که عوارض داروهای شیمیایی همچون سیس پلاتین جهت شیمی درمانی در بیماران سرطانی چشمگیر می باشد و مصرف مواد غذایی طبیعی همانند کورکومین که اثرات ضد سرطانی و ویژگی های ممانعت از ایجاد سرطان را هم داراست، بر آن شدیم که در این تحقیق اثر ماده ضد سرطانی نانوذرات سیلیکای متخلخل حاوی سیس پلاتین و کورکومین بر روی سلولهای سرطان دهان مورد بررسی قرار دهیم. در این مطالعه اثر نانوذرات سیلیکای متخلخل حاوی سیس پلاتین و کورکومین بر روی برخی ژنهای BCL-2, bax مورد بررسی قرار خواهد گرفت. |
| اهداف اختصاصی | بررسی بیان ژن BAX و BCL-2 در سلولهای سرطان دهان تریت شده با نانوذرات سیلیکای متخلخل حاوی سیس پلاتین و کورکومین |
| چکیده انگلیسی طرح | HN5 cells will be purchased from Pasteur Institute of Tehran . HN5 cells will be cultivated in high glucose DMEM medium containing 10% fetal bovine serum (FBS) and antibiotics. HN5 cells will be treated with curcumin-cisplatin loaded mesoporous silica nanoparticles. mRNA of treated and control cells will be extracted with RNA extraction kit and then mRNA will be converted to cDNA via reverstranscrptase kit. Primers will be designed via Primer3 software. For evaluation of expression levels of Bax and bcl-2 genes will be evaluated via Real-time PCR. Housekeeping Gene ß-Actin will be used as control gene. The results of the study will be reported using descriptive statistical methods (mean and standard deviation). In order to compare the expression of bcl-2 and bax genes with and without the presence of nanoparticles, independent t-test or its non-parametric equivalent will be used. Statistical analysis was performed using SPSS software version 17 and a significance level of 0.05≥P would be considered. |
| کلمات کلیدی | آپوپتوز (Apoptosis): مرگ برنامه ریزی شده سلول (6) RT- PCR: واکنش زنجیره پلیمراز نسخه برداری معکوس ( Reverse Transcriptase-PCR ) که ابتدا ریبو نوکلئیک اسید (RNA ) توسط آنزیم نسخه بردار معکوس به DNA تبدیل شده و سپس توسط واکنش زنجیره پلیمراز (PCR) به نسخه های فراوان تکثیر می شود (14). Confluency: پوشیده شدن سطح کشت از تک لایه سلولی (15) |
| ذینفعان نتایج طرح | ذینفعان این طرح در صورت مثبت بودن نتایج مطالعه احتمالا بیماران مبتلا به سرطان دهان خواهند بود. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| سیمین شریفی | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| سولماز ملکی دیزج | مشاور |
| آنیتا بصیری ملکی | دانشجوی مالک پایان نامه |
| سپیده بهلولی | مشاور |
| حبیب ذره دار | همکار اصلی |
| محمدعلی قویمی | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| الهه دلیرعبدالهی نیا | همکار اصلی |
| مرضیه فتحی | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر نانوذرات سیلیکای متخلخل حاوی کورکومین می تواند بر بیان ژنهای BAX و BCL-2 در سلولهای سرطان دهان (HN5) اثرگذار باشند.متن خبر سرطان دهان سرطانی است که در محوطه دهان (زبان، کف دهان، کام سخت و لثه) تشکیل میگردد. کورکومین ماده گیاهی است که اثر ضدسرطانی آن اثبات شده است. همرا کردن کورکومین با نانوذرات باعث افزایش فراهمی زیستی و حلالیت آن می شود. در این مطالعه اثر نانوپارتیکل های سیلیکای متخلخل حاوی کورکومین بر میزان بیان ژنهای BAX و BCL2 به روش Real Time RT-PCR انجام شد.
مطابق نتایج به دست آمده، بیان ژن BAX در سلولهای HN5 که با نانوپارتیکل های سیلیکای متخلخل حاوی کورکومین تریت شده بودند، افزایش معنی داری پیدا کرد (p<0.05) و همچنین بیان ژن BCL2 بطور معنی داری کاهش یافت (p<0.05). نسبت BAX/BCL2 در تماس با این نانوذره بطور معنی داری افزایش یافت (p<0.05). با توجه به نتایج مکانیسم القا مرگ سلولی توسط نانوپارتیکل های سیلیکای متخلخل حاوی کورکومین، مسیر داخلی آپوپتوز بوده است و نانوپارتیکل های سیلیکای متخلخل باعث افزایش سطح تماس کورکومین با سلولها و اهمیت کاهش اندازه ذره ای تا ابعاد نانومتری می باشد. به نظر می رسد این ماده بتواند گزینه ای مناسب برای طراحی داروهای ضد سرطانی مخصوصاً در ترکیب با داروهای ضد سرطان شیمیایی باشد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
