بررسی مقاومت دارویی در ایزوله های اشریشیا کلی جدا شده از خون و سایر نمونه های بالینی از بیماران بستری و سرپایی وتشخیص ایزوله های مولد ESBLs در بیمارستان امام رضا تبریز در سال 1398
Evaluation of drug resistance of Escherichia coli isolated strains from blood and other clinical specimens among hospitalized patients and outpatients dianosing of ESBLs producing isolates from Emam Reza Hospital in Tabriz in year1398
مجریان: سید رضا مودب
خلاصه روش اجرا: در این پژوهش نمونه های جمع آوری شده در طی 5 ماه در سال 1398از بیماران سرپایی و بستری از بیمارستان امام رضا تبریز بر روی محیط کشت انتخابی ائوزین متلین بلو (Eosin Metylen Blue)وبلاد آگار(Blood agar)کشت داده می شوند و پلیت ها در دمای 37 درجه سانتی گراد به مدت 24 ساعت انکوبه می گردند .از طریق تست های بیوشیمیایی از قبیل VP,MR,SIM,TSIوسیمون سیترات بر روی کلنی ها ،اشریشیا کلی ها شناسایی می گردند و در دمای 70- سانتی گراد برای انجام آزمایشات بعدی ذخیره می شوند.ایزوله های اشریشیا کلی جمع آوری شده ، کشت داده می شوند و سپس به روش دیسک دیفیوژن با روش کریبی بائر تعیین حساسیت خواهد شد .کشت و شناسی نوع گونه ،براساس پروتکل (CLSI (Clinical and Laboratory Standard Institute خواهد بود. تعیین حساسیت نسبت به سفازولین،سفوتاکسیم،سفتریاکسون،ایمی پنم،جنتامایسین،سیپروفلوکسازین،تری متوپریم،نیتروفورانتوئن،آمیکاسین،سفتازیدیم،پیپراسیلین،آزوباکتام و تتراسایکلین خواهد بود.نوع مقاومت نسبت به آنتی بیوتیک ها به صورت حساس,نیمه حساس,مقاوم گزارش خواهد شد. غربالگری ارگانیسم های تولیدکنندهESBLبا استفاده از روش DDST) Double Disk Synergy Test) صورت می گیرد. در این روش ابتدا از سوسپانسیونی از باکتری های مورد آزمایش با کدورت معادل نیم مک فارلند تهیه می شوند و بوسیله سواپ استریل به روی محیط مولر هینتون آگار کشت داده می شوند. در(pH= 7/2 -7/4) بمدت 15 دقیقه پس از کشت باکتری، چهار دیسک، سفتازیدیم، سفوتاکسیم، سفپودوکسیم و سفپیم و دیسک ترکیبی آنها باکلاوولانیک اسید کلاولانیک اسید با فاصله 25 میلیمتر قرار داده می شوند. افزایش بیش از 5 میلی متر در قطر هاله هر کدام از آنتی بیوتیک های فوق در ترکیب با کلاولانیک اسید نسبت به آنتی بیوتیک تنها نشانه تولید ESBL توسط باکتری خواهد بود. تجزیه و تحلیل آماری تجزیه و تحلیل داده ها با استفاده از نرم افزارspss انجام می شود و داده ها با استفاده از شاخص های آماری توصیفی و تحلیلی بررسی می شوند. اختلاف مشاهده در میزان فراوانی مقاومت های آنتی بیوتیکی بین باکتریهای اشریشیاکلی دارای ESBL وفاقد ESBL با استفاده از آزمونهای مجذور کای و دقیق فیشر محاسبه می شوند.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 63808 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی مقاومت دارویی در ایزوله های اشریشیا کلی جدا شده از خون و سایر نمونه های بالینی از بیماران بستری و سرپایی وتشخیص ایزوله های مولد ESBLs در بیمارستان امام رضا تبریز در سال 1398 |
| عنوان لاتین طرح | Evaluation of drug resistance of Escherichia coli isolated strains from blood and other clinical specimens among hospitalized patients and outpatients dianosing of ESBLs producing isolates from Emam Reza Hospital in Tabriz in year1398 |
| نوع طرح | طرح تحقیقاتی |
| اولویت طرح | راهکارهای بهینهسازی تجویز و مصرف منطقی داروها با تاکید بر آنتی بیوتیکها |
| نوع مطالعه | مطالعه مورد/شاهد ( Case - Control ) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | کارشناسی |
| مدت اجرا - ماه | 5 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | اشریشیا کلی(E.coli) به عنوان یکی از عوامل مهم عفونت ها در بیماران بستری و سرپایی به شمار می رود و بروز مقاومت در ایزوله ها و همچنین تولید بتالاکتاماز های وسیع ESBLs توسط این گونه ،موجب چالش جدی در درمان بیماری های عفونتهای E.coliمقاوم شده است. لذا مشخص شدن میزان مقاومت در سویه های جدا شده از نمونه های بالینی دو گروه بستری و سر پایی و تشخیص دقیق نوع مقاومت به آنتی بیوتیک ها می تواند گامی موثر در راستای درمان سریع تر این نوع از عفونت ها حداقل در جامعه ما شود. برای کنترل انتشار بیشتر اینگونه مقاومت ها در سویه های اشریشیا کلی و درمان سریع و مناسب عفونت هایی که مشکوک به ارگانیسم های مولد بتالاکتاماز وسیع الطیف هستند و همچنین جهت کسب آگاهی بیشتر از شیوع مقاومت ها نسبت به آنتی بیوتیک ها و سویه های تولید کننده ESBL ،ایزوله های اشریشیا کلی ،از ضروریات اجرای طرح می باشد و به دلیل متفاوت بودن الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی اشریشیا کلی های جدا شده در هر منطقه در سالهای مختلف و در مقاطع زمانی متفاوت و حتی در بیمارستانهای مختلف یک منطقه نیز تغییر پذیر است، لذا مطالعه و بررسی مقاومت آنتی بیوتیکی این باکتری ها ضروری است.مصرف بی رویه آنتی بیوتیک ها در انسان و حیوان باعث از بین رفتن سویه های حساس و انتخاب سویه های مقاوم می شود. مقاومت سویه ها در برابر آنتی بیوتیک ها از مهم ترین مسائلی است که که دنیای پزشکی با آن مواجه است .گزارش حساسیت به عوامل ضد میکروبی معمولا بعد از 48 ساعت از تحویل نمونه به آزمایشگاه به دست پزشک می رسد.لذا در اکثر موارد درمان به صورت تجربی صورت می گردد و از آنجایی که درمان آنتی بیوتیکی به صورت تجربی در عفونت های ادراری باید بر روی اپیدومیولوژی و الگوی مقاومت اوروپاتولوژی شایع استوار باشد . از انجام آزمایشات حساسیت و مقاومت آنتی بیوتیکی در درمان این عفونت ها پیش از پیش احساس می گردد.لذا این مطالعه جهت تعیین جدایه های اشریشیا کلی تولید کننده آنزیم بتالاکتاماز وسیع الطیف و مقاومت آنتی بیوتیکی جدایه های اشریشیا کلی در نمونه های جدا شده از بیماران سرپایی و بستری در بیمارستان امام رضا تبریز در طی 5 ماه در سال 1398می باشد. |
| اهداف اختصاصی | ایزوله کردن اشریشیا کلی از بیماران بستری و سرپایی -تعیین مقامت دارویی در سویه های با روش دیسک دیفیوژن نسبت به آنتی بیوتیک های مختلف -شناسایی جدایه های اشریشیا کلی تولید کننده آنزیم های ESBLs به لحاظ فنوتیپی با روش دیسک ترکیبی -بررسی تفاوت میزان مقاومت در ایزوله های جداشده از بیماران بستری و سرپایی و مقایسه مقاومت در سویه های مولد آنزیمESBLs و غیر مولد آن |
| چکیده انگلیسی طرح | In this study, specimens collected during 5 months from outpatient and hospitalized patients of Imam Reza Hospital in Tabriz were cultured on Eosin Metylen Blue and Blood agar and blood agar plates. They are incubated at 37 ° C for 24 hours. Biochemical tests such as VP, MR, SIM, TSI and simon citrate on the colonies, Escherichia coli are detected and at -70 ° C for the other experiments are stored. Escherichia coli isolates are collected, cultured and then sensitized by disk diffusion method with Kirby Bauer method. Species culture will be based on the CLSI protocol(Clinical and Laboratory Standard Institute) . Determination of sensitivity to Cefazolin,Cefotaxime,Cefteriaxone,Imipenem,Gentamicin,Ciprofloxacin,Trimethoprim,Nitrofruntoin,Amikacin,Ceftazidime,Piperazine,Tazobactam and tetracycline. The type of antibiotic resistance will be reported as sensitive, semi-susceptible, resistant. Screening of ESBL-producing organisms is performed using the DDST (Double Disk Synergy Test) method. In this method, the suspension is first extracted from the bacteria tested with a half-Mc Farland equivalent opacity and cultured on sterile swabs on a Müller Hinton agar medium. In(pH = 7.2 -7.4) during 15 minutes after bacterial culture, four discs;ceftazidime, cefotaxime, cefepodoxime, and cefepime and their combined disc with clavulanic acid were placed in 25 mm distances. An increase of more than 5 mm in diameter of each of the above antibiotics in combination with clavulanic acid over the antibiotic would be the only indication of bacterial ESBL production. Statistical Analysis Data analysis was performed using SPSS software and data were analyzed using descriptive and analytical statistical indices. The observed differences in the frequency of antibiotic resistance between ESBL-free and ESBL-resistant Escherichia coli were calculated using chi-square and Fisher's exact tests. |
| کلمات کلیدی | اشریشیاکلی: گونه ای از باکتری های خانواده انتروباکتریاسه است که جزو فلور طبیعی بوده و در طبیعت بفور یافت می شود. بعضی از گونه های آن باعث بیماری می شوند، اغلب بیماری این سویه ها که بعلت تغییر جایگاه فلور طبیعی E.coli می باشد. مقاومت دارویی:عدم پاسخ گیری از تجویز دارو ها به علت مقاومت آنها در برابر داروی های تجویز شده می باشد. آنزیم های بتالاکتاماز وسیع الطیف ESBLs: آنزیمی است که بعضی از سویه های اشریشیا کلی تولید می کنند که باعث شکسته شدن حلقه بتالاکتام در آنتی بیوتیک ها شده در نتیچه موجب بی اثر شدن دارو می گردد. SIM, TSI, VP, MRو سیمون سیترات: تست های تشخیصی که براساس تخمیر و سایر واکنش های شیمیایی برای شناسایی انتروباکتریاسه و شناسایی ایزوله های اشریشیا کلی می باشد. |
| ذینفعان نتایج طرح | اولین ذینفعان این پژوهش بیماران می باشند. چراکه از نتایج طرح امکان پیشنهاد دارو های بی اثر و یا داروهای موثر باعواض کمتر را استخراج نمود. کمک به پزشکان در تجویز صحیح دارو ها، راهنمایی به دارو ساز ها در توصیه دارو های موثر به اطبا، کمک به جامعه با حذف سویه های مقاوم با درمان موثر، همچنین کمک در سیاستگذاری کلان منطقه ای در برنامه ریزی های کنترل بیماریهای عفونی میکرو ارگانیسمهای پاتوژن. مشاهده تفاوت مقاومت در سویه ها و همچنین وجود و یا عدم وجود تولید ESBLs در جدایه های بیماران بستری و غیر بستری و همچنین، تاثیر محل سکونت شهری ویا روستایی بودن بیمار در بروز مقاومت که منجر به اتخاذ تدبیر لازم توسط پزشکان و کادر درمانی میشود. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| محمد طاها بهلولی | مجری دانشجویی(کمیته تحقیقات دانشجویی) |
| سید رضا مودب | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
| حسین صمدی کفیل | همکار اصلی |
| مهدی اصغری عظمی | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر مقاومت باکتریایی می تواند با افزایش بیان ژن ESBLS در ارتباط باشد.متن خبر اشریشیا کلی به عنوان یکی از مهمترین عوامل ایجاد عفونتهای بیمارستانی است و گسترش مقاومت آنتیبیوتیکی در این باکتری، به ویژه مقاومت به بتالاکتامها، یکی از چالشهای اصلی در درمان است. آنزیمهای بتالاکتاماز با تجزیه بتالاکتامها، از جمله پنیسیلینها و سفالوسپورینها، موجب بیاثر شدن این دسته از آنتیبیوتیکها میشوند. در مطالعه حاضر، با هدف بررسی شیوع تولید آنزیمهای بتالاکتاماز در ایزولههای اشریشیا کلی و ارتباط آن با مقاومت آنتیبیوتیکی، از روش دیسک دیفیوژن استفاده شد.
نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که درصد قابل توجهی از ایزولههای اشریشیا کلی، قادر به تولید آنزیم بتالاکتاماز هستند. این موضوع، ارتباط مستقیمی با الگوی مقاومت آنتیبیوتیکی ایزولهها داشت به طوری که ایزولههای تولیدکننده بتالاکتاماز، مقاومت بالاتری نسبت به سفالوسپورینها از خود نشان دادند.
نتایج این مطالعه تأیید میکند که روش دیسک دیفیوژن، یک روش ساده و سریع برای شناسایی اولیه تولیدکنندگان بتالاکتاماز در ایزولههای اشریشیا کلی است. با استفاده از این روش، میتوان به سرعت ایزولههای مقاوم به بتالاکتامها را شناسایی کرده و از تجویز بیمورد این دسته از آنتیبیوتیکها جلوگیری کرد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
