مهار ترکیبی مولکول های CD73 و STAT3 به منظور سرکوب رشد سلول های سرطانی
Combinatorial inhibition of CD73 and STAT3 molecules in order to suppress the growth of cancer cells
مجریان: فرهاد جدیدی نیارق
خلاصه روش اجرا: خلاصه روش اجرا: این مطالعه دو فاز دارد: ۱.تولید نانو ذرات کیتوزان لاکتات حاوی siRNA : ابتدا با واکنش کیتوزان و اسید لاکتیک ترکیب کیتوزان لاکتات را تولید می کنیم. سپس باید نانوذرات کیتوزان لاکتات RNA مداخله گر را در بر بگیرند. کیتوزان لاکتات پتانسیل بالایی برای کپسوله کردن siRNA و حفاظت از آن در برابر تخریب سرمی دارد. تشکیل نانو ذرات کیتوزان لاکتات در اثر تعاملات یونی بین کیتوزان لاکتات و siRNA حل شده در سدیم تری پلی فسفات ( siRNA/TPP ) صورت می گیرد. و نانوذرات حاوی siRNA تولید می شوند که خصوصیات فیزیکو شیمیایی آن ها بررسی می شود. تولید کمپلکس نانوذرات-siRNA با ژل اکتروفورز در ژل 2% آگارز تایید می شود و میزان بارگیری siRNA به صورت کمی بوسیله روش اولتراسانتریفیوژ (در آزمایشگاه سیستم های نوین دارورسانی دانشکده داروسازی دانشگاه علوم پزشکی تهران) بررسی خواهد شد. مطالعه in vitro اثر بخشی نانو ذرات تهیه شده : از رده های سلول های سرطانی 4T1 (سرطان پستان) و B16F10 ( ملانوما ) و CT26 (سرطان کولون ) در این مطالعه استفاده خواهد شد که مطالعات گذشته تولید CD73و STAT3 توسط آن ها را اثبات کرده است و میزان تولید آن نیز در هر رده سلولی متفاوت است. این رده های سلولی در محیط RPMI1640حاوی 10%fetal bovine serum و آنتی بیوتیک کشت داده می شوند.پس از گذشت ۲۴ ساعت از کشت سلولی نانوذرات حاوی siRNA ضد CD73و STAT3 را به محیط کشت هر رده سلولی اضافه می کنیم. میزان تاثیر درمان های ترکیبی و تکی بر روی بیان ژن CD73 و STAT3 در کشت سلول ها توسط تکنیک Real-time PCR در فواصل زمانی مختلف بررسی می شود.تاثیر نانوذرات حاویsiRNA بر روی حیات سلولی توسط آزمون MTT ارزیابی می شود. همچنین، تاثیر درمان ترکیبی بر روی جلوگیری از بیان ژن های پیش برنده آپوپتوز، مهارکننده آپوپتوز، تکثیر سلولی، آنژیوژنز و متاستاز نیز توسط تکنیک Real-time PCR بررسی می گردد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 63762 |
| عنوان فارسی طرح | مهار ترکیبی مولکول های CD73 و STAT3 به منظور سرکوب رشد سلول های سرطانی |
| عنوان لاتین طرح | Combinatorial inhibition of CD73 and STAT3 molecules in order to suppress the growth of cancer cells |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | نانوفیبرها، نانوذرات و اسکافولدها (در طب بازساختی، مهندسی بافت و دارورسانی) |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دکتری عمومی |
| مدت اجرا - ماه | 18 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | نوآوری و ضرورت اجرای طرح: مطالعات نشان میدهد که STAT3یک فاکتور رونویسی بسیار مهم است که نقش مهمی در تنظیم مسیرهای سیگنالینگ داخل سلولی دارد، از جمله مکانیسم های سیگنالینگ ایمنی سرکوب شده توسط سلول های ایمنی که از محیط میکرو محور تومور نفوذ می کنند. نشان داده شده است که کاهش سیگنال STAT3 در سلولهای خونگرم موجب افزایش ایمنی ضد تومور می شود. ازطرفی مطالعات جمع آوری شده نشان داده است که CD73 یک مولکول اصلی نظارتی از گسترش سلول های سرطانی، مهاجرت و تهاجم، آنژیوژنز تومور و فرار از ایمنی تومور است. مطالعات جداگانه زیادی نشان داده است که رونویسی فاکتور STAT3 باعث القای CD73 میشود. در این مطالعه ما به کمک نانوذرات و RNAهای مداخله گر به دنبال معرفی روشی هدفمند هستیم که بیان ژن های CD73 و STAT3 را همزمان در ریزمحیط توموری سرکوب کند و با دوز کم ، بیشترین تاثیر و کمترین عارضه را داشته باشد. علاوه بر این، با کمک نانو ذرات امکان استفاده از RNAهای مداخله گر در موجود زنده و هم امکان دارو رسانی هدفمند وجود خواهد داشت که مقصود مطالعات بعدی ما خواهد بود. |
| اهداف اختصاصی | تولید نانو ذرات کیتوزان لاکتات حاوی siRNA -ارزیابی تاثیر نانوذرات بارگیری شده با مولکول های siRNA بر روی بیان ژن های CD73 و STAT3 -مطالعه in vitro اثر بخشی درمان ترکیبی بر روی بیان ژن های پیش برنده آپوپتوز، مهار کننده آپوپتوز، تکثیر سلولی، آنژیوژنز و متاستاز سلول های سرطانی با روش Real-time PCR: |
| چکیده انگلیسی طرح | Studies show that STAT3 is a very important transcription factor that plays an important role in regulating intracellular signaling pathways, including immune signaling mechanisms suppressed by immune cells that penetrate the micro axis of the tumor. It has been shown that decreasing the STAT3 signal in microenvironment cells increases the anti-tumor immunity. Collectively, studies have shown that CD73 is a major regulatory molecule of cancer cell proliferation, migration and invasion, tumor angiogenesis, and immune tumor escape. other studies have shown that the transcription of the STAT3 factor induces CD73. In this study, with the help of nanoparticles and interfering RNAs, we are going to introduce a targeted method that suppresses the expression of both CD73 and STAT3 genes simultaneously in the tumor micro-environment, with the lowest dose, the greatest effect, and the least complication. Also, with the help of nanoparticles, it will be possible to use RNAs in the living creature and target drug delivery, which will be the purpose of our next study. |
| کلمات کلیدی | SiRNA: (RNAi) مداخله گر اصطلاحی است که به مکانیسم خاموشی پس از رونویسی توسط RNA دو رشته ای گفته می شود.در تکنولوژیRNA های مداخله گر (siRNA) ، رشته مکمل mRNA ژن مورد نظر ساخته شده و این رشته به mRNA ژن هدف متصل و یک توالی دورشته ای (dsRNA) را بوجودمی آورد. از آنجا که سیستم سنتز پروتئین قادر به ترجمه mRNA دو رشته ای نمی باشد، و بنابراین بیان ژن هدف متوقف و اصطلاحاً ژن خاموش می شود. STAT3 :یکی از اعضای خانواده STAT است که توسط ژن STAT3 تولید می شود. در سیتوپلاسم به صورت مونومر های غیر فعال وجود دارند که در پاسخ به سایتوکین ها و فاکتور های رشد توسط JAK فسفریله شده و تشکیل همودایمر می دهند و به هسته نقل مکان کرده و با اتصال به توالی های خاص نسخه برداری ژن های مربوطه را تحریک می کنند :CD73 باعث دفسفوریله شدن AMP خارج سلولی شده و باعث تولید ادنوزین میشود. متاستاز Metastasis) ) : به گسترش و مهاجرت سلولهای سرطانی از یک بافت به بافتهای دیگر، متاستاز گفته میشود آنژیوژنز (Angiogenesis) : فرایندی فیزیولوژیکی است که در آن رگهای جدید از رگهای موجود رشد میکنند.ایجاد رگهای خونرسان در درون تومورها برایآنها حیاتی است. نانوذره (Nanoparticle) : ذراتی هستند که ابعاد آنها در حدود ۱ تا ۱۰۰ نانومتر است. لیپوزمها، درخت سانها، نانو ذرات پلیمری، نانو ذرات پوشش داده شده با پلیمرها، نانو ذرات کیتوزان و لستین و نانو ذرات دارویی نمونههایی از نانو ذراتی میباشند که برای دارو رسانی استفاده شده اند. کیتوزان : کیتوزان یک آمینو پلی ساکارید خطی و ترکیبی از پیوند های (۴→۱β) واحدهای D-گلوکزآمین وN-استیل -D-گلوکزآمین است. کیتوزان توسط داستیلاسیون کیتین ( پلی ساکارید طبیعی و فراوان موجود در اسکلت خارجی سخت پوستانی همچون خرچنگ و میگو)، تهیه می شود. این پلی ساکارید کاتیونی به دلیل دسترس پذیری فراوان، چسبندگی بی نظیر، خواص دارویی مناسب و دیگرخواص سودمند بیولوژیکی مثل زیست سازگاری، زیست تخریب پذیری، عدم سمیت و تحریک کم سیستم ایمنی، در موارد بیوپزشکی و دارویی مورد توجه گسترده قرارگرفته است |
| ذینفعان نتایج طرح | بیماران سرطانی |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| فرهاد جدیدی نیارق | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| وحید کارپیشه | همکار اصلی |
| محمد عرفان فتاحی | دانشجوی مالک پایان نامه |
| توحید کاظمی | مشاور |
| هادی حسن نیا | مشاور |
| قاسم قلم فرسا | مشاور |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر مهار هدفمند CD73 و STAT3 موجب سرکوب گسترش سلول های سرطانی می شود.متن خبر درگیری فاکتورهای چندگانه در ریزمحیط تومور در رشد و گسترش سرطان موجب شده است که مونوتراپی ها گزینه موثری برای درمان نباشند. از این رو، هدف قرار دادن چندین فاکتور در ریز محیط تومور به نظر ضروری و کارا می رسد. ما در این مطالعه نانوپارتیکل تری متیل کیتوزان پگیله شده و پوشیده شده از هیالورانات را برای انتقال هدفمند siRNA اختصاصی برای سرکوب محور CD73 و STAT3 بکار گرفتیم. نانوذرات تولید شده با داشتن خواص فیزیکوشیمیایی مناسب توانستند بطور قابل توجهی بیان فامتورهای CD73 و STAT3 را سرکوب نمایند. همچنین، سرکوب بیان این فاکتورها با کاهش بیان فاکتورهای موثر در تکثیر، بقا، آنژیوژنز و متاستاز همراه بود. این یافته ها نشان می دهند که استفاده از نانوذرات بارگیری شده با مولکول های siRNA بر ضد فاکتورهای CD73 و STAT3 می تواند روش موثری برای درمان سرطان باشد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
