جداسازی، تعیین ماهیت و بررسی شرایط کشت بهینه جهت تکثیر سلول های بنیادی خونساز +c-kit مشتق از مغز استخوان در مدل حیوانی رت
Isolation, identification and study of optimal culture condition for the proliferation of bone marrow-derived c-kit+ hematopoietic stem cells in a rat animal model
مجریان: راحله فرحزادی
خلاصه روش اجرا: تمامی سلول های خونی از جمعیت اندک سلول های پایه خون ساز منشاء می گیرند. این سلول ها قابلیت تبدیل به خود و قدرت تمایز به رده های مختلف سلول های خونی را دارا هستند. امروزه استفاده از این سلول ها در بسیاری از بیماری های خونی و غیرخونی مورد توجه قرار گرفته است. مغز استخوان به عنوان یکی از مهم ترین منابع مورد استفاده سلول های بنیادی خون ساز می باشد. امروزه سلول های بنیادی خون ساز c-kit+ یا CD117+ نظر محققین را به خود جلب کرده است که منبع اصلی این سلول ها مغز استخوان می باشد. مشکل عمده در استفاده از این سلول ها حجم اندک مغز استخوان هنگام نمونه گیری، تعداد بسیار اندک این سلول ها در جمعیت سلول های تک هسته ای مغز استخوان و همچنین عدم وجود شرایط بهینه برای نگهداری و تکثیر این سلول ها در محیط in vitro می باشد. با توجه به اینکه سلول های بنیادی خون ساز به دلیل دارا بودن خاصیت خودتجدیدی و توان تمایز می توانند در درمان انواع بیماری ها کارآمد باشند. کاربرد این سلول ها در درمان بیماری های ژنتیکی، بهبود خونسازی در بیماران سرطانی تحت درمان، بازسازی استخوان، کمخونی آپلاستیک (ناتوانی در ساختن نسوج جدید)، سرطان خون و سرطان مغز استخوان به خوبی نشان داده شده است. بنابراین یافتن یک محیط کشت مناسب جهت رشد، تکثیر این سلول ها امروزه مورد توجه محققین در زمینه سلول درمانی می باشد. در این پژوهش، از سلول های تک هسته ای مغز استخوان رت که در طرح قبلی مجری با کد پژوهان 61489 و کد اخلاق IR.TBZMED.REC.1397.322 استخراج شده است استفاده خواهد شد. پس از دفریز سلولی، درصد زنده مانی سلول های استخراج شده به روش تریپان بلو تأیید خواهد شد. در ادامه سلول های مربوطه با میکروبیدهای کونژوگه با c-kit انکوبه شده و با استفاده از دستگاه MACS، سلول های بنیادی خونساز c-kit+ جداسازی شده و تعیین هویت سلول های استخراج شده با روش فلوسایتومتری انجام خواهد شد. از طرف دیگر، جهت تعیین بهترین شرایط کشت سلولی سلول های مذکور، در روزهای مختلف 7، 14 و 21 با فاکتور SCF تیمار خواهند شد و درصد زنده مانی و رشد سلول ها با استفاده از رنگ Ki و دستگاه فلوسایتومتری بررسی خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 63634 |
| عنوان فارسی طرح | جداسازی، تعیین ماهیت و بررسی شرایط کشت بهینه جهت تکثیر سلول های بنیادی خونساز +c-kit مشتق از مغز استخوان در مدل حیوانی رت |
| عنوان لاتین طرح | Isolation, identification and study of optimal culture condition for the proliferation of bone marrow-derived c-kit+ hematopoietic stem cells in a rat animal model |
| نوع طرح | گرنت پژوهشی |
| اولویت طرح | سلولهای بنیادی، مهندسی بافت و پزشکی بازساختی و زیست مواد |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 18 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | شواهد نشان می دهند که سلول های بنیادی خونساز می توانند به عنوان ابزارهایی برای تحویل عوامل درمانی در بسیاری از بیماری های خونی و غیر خونی مورد توجه قرار گیرند. از آنجائیکه سلول های بنیادی خونساز c-kit+ نظر محققین را به خود جلب کرده است و تا کنون مطالعات اندکی در زمینه استفاده و کاربرد این سلول ها انجام شده است، مطالعات بیشتر در راستای شناسایی و پیدا کردن شرایط بهینه کشت سلولی این سلول ها مورد توجه محققین قرار گرفته است. مورد استفاده قرار گیرند. |
| اهداف اختصاصی | جداسازی سلول­های بنیادی خون­ساز c-kit+ با استفاده از روش MACS -تعیین هویت سلول­های بنیادی خون­سازc-kit+ جداسازی شده -بررسی نوع محیط کشت مناسب جهت رشد و تکثیر سلول­های بنیادی خون­سازc-kit+ |
| چکیده انگلیسی طرح | تمامی سلول های خونی از جمعیت اندک سلول های پایه خون ساز منشاء می گیرند. این سلول ها قابلیت تبدیل به خود و قدرت تمایز به رده های مختلف سلول های خونی را دارا هستند. امروزه استفاده از این سلول ها در بسیاری از بیماری های خونی و غیرخونی مورد توجه قرار گرفته است. مغز استخوان به عنوان یکی از مهم ترین منابع مورد استفاده سلول های بنیادی خون ساز می باشد. امروزه سلول های بنیادی خون ساز c-kit+ یا CD117+ نظر محققین را به خود جلب کرده است که منبع اصلی این سلول ها مغز استخوان می باشد. مشکل عمده در استفاده از این سلول ها حجم اندک مغز استخوان هنگام نمونه گیری، تعداد بسیار اندک این سلول ها در جمعیت سلول های تک هسته ای مغز استخوان و همچنین عدم وجود شرایط بهینه برای نگهداری و تکثیر این سلول ها در محیط in vitro می باشد. با توجه به اینکه سلول های بنیادی خون ساز به دلیل دارا بودن خاصیت خودتجدیدی و توان تمایز می توانند در درمان انواع بیماری ها کارآمد باشند. کاربرد این سلول ها در درمان بیماری های ژنتیکی، بهبود خونسازی در بیماران سرطانی تحت درمان، بازسازی استخوان، کمخونی آپلاستیک (ناتوانی در ساختن نسوج جدید)، سرطان خون و سرطان مغز استخوان به خوبی نشان داده شده است. بنابراین یافتن یک محیط کشت مناسب جهت رشد، تکثیر این سلول ها امروزه مورد توجه محققین در زمینه سلول درمانی می باشد. در این پژوهش، از سلول های تک هسته ای مغز استخوان رت که در طرح قبلی مجری با کد پژوهان 61489 و کد اخلاق IR.TBZMED.REC.1397.322 استخراج شده است استفاده خواهد شد. پس از دفریز سلولی، درصد زنده مانی سلول های استخراج شده به روش تریپان بلو تأیید خواهد شد. در ادامه سلول های مربوطه با میکروبیدهای کونژوگه با c-kit انکوبه شده و با استفاده از دستگاه MACS، سلول های بنیادی خونساز c-kit+ جداسازی شده و تعیین هویت سلول های استخراج شده با روش فلوسایتومتری انجام خواهد شد. از طرف دیگر، جهت تعیین بهترین شرایط کشت سلولی سلول های مذکور، در روزهای مختلف 7، 14 و 21 با فاکتور SCF تیمار خواهند شد و درصد زنده مانی و رشد سلول ها با استفاده از رنگ Ki و دستگاه فلوسایتومتری بررسی خواهد شد. |
| کلمات کلیدی | سلول های بنیادی خونساز +c-kit: یک دهم درصد از حجم سلول های بنیادی خونساز مغز استخوان را تشکیل می دهند و نشانگر c-kit یا CD117 را در سطح خود بیان می کنند. شرایط کشت بهینه سلول: شرایطی است که بیشترین و بهترین کارآیی سلول از نظر رشد، تکثیر و تعداد مطرح می شود. |
| ذینفعان نتایج طرح |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| راحله فرحزادی | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
| عزت اله فتحی | همکار اصلی |
| زهره صناعت | همکار اصلی |
| حجت اله نوزاد چروده | همکار اصلی |
| ایلجا ویتور | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر ال-کارنیتین سبب کاهش پیری سلول های بنیادی خونساز C-kit مشتق از مغز استخوان با تأثیر بر مسیرسیگنالینگ تلومری می شود.متن خبر امروزه استفاده از سلول های بنیادی خونساز در بسیاری از بیماری های خونی و غیرخونی مورد توجه قرار گرفته است. امروزه سلول های بنیادی خونساز C-kit نظر محققین را به خود جلب کرده است که منبع اصلی این سلول ها مغز استخوان می باشد. مشکل عمده در استفاده از این سلول ها تعداد بسیار اندک این سلول ها و پیری این سلول ها است. بنابراین استفاده از مواد آنتی اکسیدانت از قبیل ال-کارنیتین جهت شرایط بهینه برای تکثیر این سلول¬ها در محیط in vitro مورد توجه می باشد. نتایج مطالعه حاضر نشان داد که تیمار سلول های بنیادی خونساز C-kit با غلظت 0.2 میلی مولار ال-کارنیتین با افزایش میزان بیان ژن TERT و طول تلومر سبب افزایش قدرت زنده مانی این سلول ها شده و از پیری این سلول ها جلوگیری می کند. به نظر می رسد نتایج این مطالعه بتواند مسیری را برای تحقیقات بیشتر در زمینه استفاده از سلول های بنیادی خونساز فراهم کند. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
