بررسی اثر جینستین بر میزان فاکتورهای آنتی اکسیدانی و میزان miRNA در تخمدانهای پلی کیستیک(PCOS) موش صحرایی
Effect of Genistein on antioxidant factors and miRNA level in rat polycystic ovaries (PCOS)
مجریان: علی عابدالهی , علیرضا علی همتی
خلاصه روش اجرا: بررسی اثر جینستئین بر میزان فاکتورهای آنتی اکسیدانی و میزان بیان miRNA132 در تخمدانهای پلی کیستیک(PCOS) موش صحرایی. این مطالعه به صورت تجربی و بر روی 40 سر موش صحرائی ماده بالغ (رت) در 4 گروه 10 تائی (با میانگین وزن 20±200 و سن تقریبی 10 هفته) انجام خواهد گرفت. حیوانات در شرایط استاندارد (12 ساعت روشنائی و دمای 22 درجه سانتی گراد) و تهویه مناسب نگهداری شده و طی این مدت موشها دسترسی آزاد به آب و غذا دارند. سیکل جنسی همه موشها با تهیه اسمیر واژنی طی 14 روز تعیین و موشهای دارای سیکل جنسی منظم انتخاب شده و به طور تصادفی به 4 گروه تقسیم می شوند. 1 – گروه کنترل: بدون هیچ مداخله و تیمار 2- گروه کنترل درمان یا شم: جهت بررسی اثر جینستئین 1 میلیگرم روزانه ( زیر جلدی ) بر فاکتورهای اکسیدانی و miRNA132 3- گروه القاء تخمدان پلی کیستیک 4- گروه درمان جینستئین 1 میلیگرم روزانه ( زیر جلدی ) + القاء تخمدان پلی کیستیک. در نهایت پس از گذشت 2 ماه موش ها به وسیله جابجایی مهره های گردنی کشته شده و تخمدان راست به منظور بررسی آنزیم های استرس اکسیداتیو و تخمدان چپ برای بررسی miRNA21, 201 در نظر گرفته می شود.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا در دانشکده/مرکز |
| کد طرح | 63504 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثر جینستین بر میزان فاکتورهای آنتی اکسیدانی و میزان miRNA در تخمدانهای پلی کیستیک(PCOS) موش صحرایی |
| عنوان لاتین طرح | Effect of Genistein on antioxidant factors and miRNA level in rat polycystic ovaries (PCOS) |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | سلولهای بنیادی، مهندسی بافت و پزشکی بازساختی و زیست مواد |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | کارشناسی ارشد |
| مدت اجرا - ماه | 9 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | سندرم تخمدان پلی کیستیک یکی از شایع ترین اختلالات هورمونی زنان در سنین باروری است که باعث 5 تا 10 درصد اختلالات در این سنین می شود. علائم این سندرم عبارت است از پرمویی و آکنه (به دلیل تولید زیاد آندروژن) و اختلالات قاعدگی، عدم تخمک گذاری و ناباروری (1). عوارض دراز مدت این سندرم شامل افزایش فشار خون ،بیماریهای سیستم قلبی- عروقی و دیابت نوع دو است .علاوه برآن هیپرپلازی آندومتر و سرطان آندومتر نیز در زنانی که درمانی انجام نداده اند، مشاهده شده است. بنابراین PCOS نیازمند توجهات پزشکی خاصی میباشد(2). تحقیقات صورت گرفته نشان می دهد که در سندرم تخمدان پلی کیستیک تعدادی از اختلالات اندوکرین یکدیگر را تقویت و تشدید می کنند. این اختلالات عبارتنداز نقص در عملکرد محور هیپوتالاموس- هیپوفیز، عملکرد تخمدان و عملکرد آدرنال. در واقع سندرم تخمدان پلی کیستیک با ترشحات غیرطبیعی گنادوتروپین ها، افزایش ترشح استروئیدهای تخمدان و هم چنین مقاومت به انسولین همراه است. میزان هورمون زرده ای LH به طورچشمگیر در زنان مبتلا به سندرم تخمدان پلی کیستیک افزایش می یابد که به دلیل افزایش در میزان و تناوب ترشح این هورمون است. زمانی که غلظت هورمون LH نسبت به هورمون محرک فولیکولیFSH افزایش یابد، تخمدان ها به طور ترجیحی سنتز آندروژن ها را افزایش می دهند(3). کلیه اختلالات نظیر عدم تخمک گذاری، تخمدا ن های پر از کیست های مشخص، هیپرآندروژنیسم و ناهنجاری های متابولیکی مانند چاقی در نتیجه فاکتورهای متعدد محیطی و ژنتیکی ایجاد می گردند(4). از جمله فاکتورهای محیطی می توان به گونه های واکنش گر اکسیژن اشاره داشت. (Reactive Oxygen Species ROS) ROS تولید شده توسط میتوکندری، به عنوان محصول فرعی متابولیسم اکسیداتیو طبیعی در نظر گرفته می شود (5). این گونه ها شامل سوپراکسید آنیون (O2) پراکسید هیدروژن (H2O2) و رادیکال هیدورکسیل(OH)، اکسیژن تکی، رادیکال NO ، رادیکال هیپوکلریت و لیپیدپراکسید های مختلف بوده و نقش های فیزیولوژیکی در بسیاری از فرآیندهای مختلف دستگاه تولیدمثلی زنان از جمله بلوغ اووسیت، تخمک گذاری، لقاح و ریزش های آندومتری دارند (6). شواهد مبنی بر تاثیر اکسیداتیو استرس در تخمدان پلی کیستیک که باعث ایجاد آسیب در DNA میتوکندری و ژنوم می شود و به طور مستقیم با کاهش میزان باروری در ارتباط است. یکی از مکانیسم های محافظتی بدن در برابر اثرات ROS ، آنزیم های آنتی اکسیداتیو مانند ، سوپراکسید دیسموتاز (SOD)، کاتالاز(CAT)، گلوتاتیون پراکسیداز (GPX) و پراکسی ردوکسین ها هستند. وجود این فاکتورها در بدن به تعادل بین ROS تولید شده توسط سلول کمک می کند(7). تخمدان از نظر متابولیکی یک عضو فعال است، از این رو به طور مداوم تحت تاثیر انواع استرس ها می باشد( 8) . برای مثال در شرایط پاتولوژیکی مانند تخمدان پل یکیستیک، استرس اکسیداتیو بیش از حد، ممکن است به هایپرپلازی مزانشیم تخمدان کمک کند. اپیتلیوم تخمدانی یا آپوپتوز DNA باعث آسیب به ROS سلولی می شود. با این حال وضعیت اکسیداتیوی سلول، رشد فولیکولی، تشکیل جسم زرد، تمایز آندومتری و رشد جنینی را تعدیل می کند(7). میکرو RNA (miRNA ها) کوچک، RNA های غیر کدکننده هستند که قادر به تنظیم بیان ژن در سطح پس از رونویسی می باشند. سطح miRNA های تغییر یافته در ارتباط با دیابت، مقاومت به انسولین، التهاب و سرطان های مختلف است(9). مطالعات نشان داده اند که miRNA ها در خون در گردش ، سرم، پلاسما و مایع فولیکولی بیماران PCOS هستند ، که آنها ممکن است به عنوان نشانگرهای زیستی بالقوه و یک رویکرد جدید برای تشخیص PCOS باشند(10). بیان miRNA ها در سلول های گرانولوزا ممکن است یک اثر نظارتی مستقیم بر بیان ژن خاصی در فولیکول و استروئیدوژنز تخمدان داشته باشد(11). اطلاعات کمی در مورد نقش miRNA ها در طول توسعه فولیکولی، استروئیدوژنز و PCOS شناخته شده است. درک ما از miRNA ها، به ویژه در رابطه با PCOS، در حال حاضر در مراحل اولیه قرار دارد. مطالعات کمی در زمینه عملکردmiRNA ها در پاتوفیزیولوژی سندرم تخمدان پلی کیستیک صورت گرفته است و مطالعات اضافی بینشی مهم در مکانیسم های مولکولی در پشت این سندرم پیچیده و عملکرد ناهمگن ، نیاز است. در حال حاضر درسرم،miRNA ها می توانند به عنوان یک بیومارکرغیر تهاجمی برای PCOS بکار روند. به طوریکه آنها نشان داده اند که در سرم پایدارند و به فعالیت های هسته مقاوم هستند و به آسانی تشخیص داده می شوند(10). مطالعات متعددی در بیان miRNA تخمدان سالم و دست نخورده(مرغ، موش، خوک، گاو و گوسفند) و همچنین دراجزای مختلف تخمدان، مانند سلول های گرانولوزای موش، خوک، اسب و انسان، سلول های تکا، مایع فولیکولی انجام شده است(9). یکی از مهمترینmiRNA که در مایع فولیکولی کشف شده microRNA21, 201 است که موجب افزایش ترشح استرادیول می شود. برای اینکه PCOS یک اختلال شایع اندوکرینی در سیستم تولیدمثلی زنان است که همراه با استروییدزایی غیر طبیعی است. microRNA132 به طور معنی دار در افراد PCOS نسبت به گروه کنترل سطح بیان اش کمتر است(11و 12). به همین علت در این تحقیق سطح بیان microRNA21, 201 به عنوان مارکر PCOS اندازه گیری می شود.آنالیز های بیوانفورماتیک آشکار کرده که ژن هدف در افراد PCOS ژن High-mobility group AT-hook 2 (HMGA2) است که microRNA21, 201 به این ژن متصل شده و استروییدزایی را تنظیم می کند (11 و 12). این ژن از خانواده non histon chromosal HMG است حاوی سه دومایین DNA-binding (AT-hooks) که پروتینی ایجاد می کند که به ناحیه AT درDNA هسته ای متصل می شود که ترجمه ژنها را تنظیم می کند (13). روش های درمانی متعددی برای سندرم تخمدان پلی کیستیک مطرح شده است،مانند تغییر عادت زندگی، جراحی و مصرف دارو که در حال حاضر شناخته شده ترین روش درمانی استفاده از داروهایی مانند کلومیفن سیترات ، متفورمین و تاموکسیفن است(3). با توجه به عوارض جانبی ناشی از این داروها، شناسایی و تهیه داروهای جایگزین اهمیت زیادی دارد. از زمان های قدیم در طب سنتی همواره توجه ویژه ای به گیاهان دارویی وجود داشته است و امروزه نیز با بررسی های متعددی که در این زمینه تحت عنوان طب گیاهی صورت می گیرد، اثرات مفید و ارزنده گیاهان بسیاری را به دست آورده اند.(14) گیاه سویا که از گیاهان خانواده نخود است حاوی فیتواستروژن های جنیستئین، دایدزئین و گلیستین بوده که همگی در زمره ایزوفلاون ها هستند و روی رسپتورهای استروژن عمل می کنند .این نوع فیتو استروژن از نظر ساختمانی یک فنل است و برای گیرنده استروژن اثرات آگونیستی و آنتاگونیستی دارد (15). جنیستئین در دانه سویا حدود 99% به صورت ترکیب با مولکول قند وجود داردو دارای خواص ضد التهابی و آنتی اکسیدانی است (16)زمانی که ترکیبات حاوی جنیستین مورد مصرف قرارمی گیرند،این ترکیب تحت تاثیر باکتریها و آنزیمهای روده شکسته شده، مولکول قند آزاد گردیده و جنیستئین جذب می شود.(17 و 18) در این تحقیق از لتروزول جهت القای تخمدان پلی کیستیک استفاده می شود. لتروزول یک مهار کننده آروماتاز غیر استروئیدی است که باعث کاهش تبدیل آندروژن به استروژن میشود و در نتیجه باعث افزایش تستوسترون و کاهش استروژن می شود(18). در این تحقیق اثر جنیستئین را بر روی فاکتورهای آنتی اکسیدانی ( SOD، GPX، MDA،CAT) و آنتی اکسیدان تام (TAC) در تخمدان پلی کیستیک القا شده موش صحرایی مورد بررسی قرار می دهیم. همچنین در این تحقیق بیان miRNA21, 201 را در سندرم تخمدان پلی کیستیک مورد بررسی قرار می دهیم که درک بیشتری از مکانیسم مولکولی ممکن است به بهبود تشخیص و درمان این سندرم کمک نماید. |
| اهداف اختصاصی | میزان تغییرات کمی SOD ، GPX، CAT، TACو MDA در بافت تخمدان در سندرم تخمدان پلی کیستیک القائی ( PCOS ) در موش صحرائی -میزان تغییرات بیان miRNA21, 201 در تخمدان سندرم تخمدان پلی کیستیک القائی ( PCOS ) در موش صحرائی -اثر جینستئین بر میزان تغییرات کمی SOD ، GPX ، CAT، TAC و MDA در سرم سندرم تخمدان پلی کیستیک القائی ( PCOS ) در موش صحرائی -اثر جینستئین بر میزان تغییرات کمی miRNA21, 201 در سرم سندرم تخمدان پلی کیستیک القائی ( PCOS ) در موش صحرائی |
| چکیده انگلیسی طرح | بررسی اثر جینستئین بر میزان فاکتورهای آنتی اکسیدانی و میزان بیان miRNA132 در تخمدانهای پلی کیستیک(PCOS) موش صحرایی. این مطالعه به صورت تجربی و بر روی 40 سر موش صحرائی ماده بالغ (رت) در 4 گروه 10 تائی (با میانگین وزن 20±200 و سن تقریبی 10 هفته) انجام خواهد گرفت. حیوانات در شرایط استاندارد (12 ساعت روشنائی و دمای 22 درجه سانتی گراد) و تهویه مناسب نگهداری شده و طی این مدت موشها دسترسی آزاد به آب و غذا دارند. سیکل جنسی همه موشها با تهیه اسمیر واژنی طی 14 روز تعیین و موشهای دارای سیکل جنسی منظم انتخاب شده و به طور تصادفی به 4 گروه تقسیم می شوند. 1 – گروه کنترل: بدون هیچ مداخله و تیمار 2- گروه کنترل درمان یا شم: جهت بررسی اثر جینستئین 1 میلیگرم روزانه ( زیر جلدی ) بر فاکتورهای اکسیدانی و miRNA132 3- گروه القاء تخمدان پلی کیستیک 4- گروه درمان جینستئین 1 میلیگرم روزانه ( زیر جلدی ) + القاء تخمدان پلی کیستیک. در نهایت پس از گذشت 2 ماه موش ها به وسیله جابجایی مهره های گردنی کشته شده و تخمدان راست به منظور بررسی آنزیم های استرس اکسیداتیو و تخمدان چپ برای بررسی miRNA21, 201 در نظر گرفته می شود. |
| کلمات کلیدی | PCOS = سندرم تخمدان پلی کیستیک SOD = سوپراکسیدازدسموتاز GPX = گلوتاتیون پراکسیداز MDA = مالون دی آلدیید ROS = گونه های واکنش گر اکسیژن MicroRNA = ریبونوکلئویک اسید |
| ذینفعان نتایج طرح | 1- بیماران تخمدان پلی کیستیک تحت درمان 2- بیمارستان و متخصصین زنان و زایمان |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| علی عابدالهی | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| علیرضا علی همتی | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| سمیرا رجائی | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر فیتواستروژن ها و جنیستئین در گیاهان مانند سویا باعث بهبود شرایط مخرب تخمدان های زنان سندرم پلی کیستیک می شودمتن خبر جنیستئین و فیتواستروژنها به علت خاصیت آنتی اکسیدانی و استروژنی که دارند از تعداد فولیکولهای کیستیک کاسته و میزان باروری و لقاح را در این زنان افزایش می دهد. مشکل اساس که زنان پلی کیستیک دارند این است که تعادل هورمونهای جنسی در این زنان به هم می خورد و مشکلاتی نظیر اختلالات متابولیکی ، بی نظمی قاعدگی و عدم تخمک گذاری می شود . جنیستئین با برقرای نظم در هورمونهای جنسی، اثرات مخرب را به حداقل می رساند. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر تخمدان پلی کیستیک شایع ترین علل ناباروری زنان می باشد و جنیستین میزان بقاء فولیکول ها را با ترشح گنادوتروپین ها تحت تاثیر قرار می دهدمتن خبر تخمدان پلی کیستیک شایع ترین علل ناباروری زنان می باشد و از علایم آن هایپرآندروژنیسم، اختالات متابولیکی، بی نظمی قاعدگی و عدم تخمک گذاری است. در زنان سندرم پلی کیستیک میزان LH و تستوسترون افزایش یافته و میزان استروژن و FSH کاهش می یابد. FSH نقش ویژه ای در رشد فولیکول ها و انتخاب فولیکول برجسته و غالب داشته که به سمت تخمک گذاری پیش می روند. در صورت پایین آمدن میزان این هورمون رشد فولیکوله کند شده و به تخمک گذاری نمی رسند و عدم تخمک گذاری بوجود می آید. همچنین به علت واکنش های آروماتوزی میزان تستوسترون بلال رفته و اختلالات جنسی ثانویه نظیر رشد موهای زاید و کلفت شدن صدا و اختلالات در سنتز و حساسیت انسولینی پیش می آید.
فیتواستروژنها نظیر جنیستئین که در گیاه سویا به وفور دیده می شود با خاصیت آنتی اکسیدانی که دارند از تشکیل شرایط استرس اکسیداتیو در تخمدان پیشگیری می کنند و به علت داشتن حلقه های پلی فنولیک در ساختار خود به گیرنده های ااستروژنی که در تخمدان و رحم به وقور دیده می شوند با تحریک واکنش اروماتوزی از تشکیل بیشتر تستوسترون جلوگیری کرده و از اینطریق میزان این هورمون و اختلالات ناشی از ان را به حداقل می رسانند. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر به مکمل های دارویی حاوی جنیستیئن و فیتواستروژنها در زنان مسن و زنان با سندرم تخمدان پلی کیستیک اهمیت داده شودمتن خبر گیاهان حاوی فیتواستروژنها نظیر سویا در طب سنتی و مکمل های دارویی اهمیت داده شود به ویژه در جامعه امروز که تحرک بدنی مخصوصا در خانم کاهش یافته که احتمال چاقی این زنان پیش می آید و در زنان چاق احتمال به وجود آمدن شرایط تخمدان پلی کیستیک بالا می باشد. برای کاهش و پیشگیری شرایط وخیم این سندرم می توان در این زنان از فیتواستروژنها به عنوان داروهای مکمل استفاده کرد. و از طریق صدا و سیما و تبلیفات جامه را برای استفاده بیشتر از این گیاهان ترغیب کرد. |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر استفاده از فیتواستروژنها و جنیستئین به عنو.ان مکمل های دارویی در بهبود شرایط زنان تخمدان پلی سیستیک به ویژه در زنان چاق که احتمال ریسک این بیماری بیشتر می باشدمتن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
