بررسی بیان ژن های VWF و VEGFR-2 در سلول های اندوتلیال کشت داده شده در بیوراکتور در مقایسه با کشت معمولی
Evaluation of the expression VWF and VEGFR_2 gens in cultured endothelial cells in bioreactor compared with normal culture
مجریان: رضا رهبرقاضی
خلاصه روش اجرا: در مطالعه حاضر از رده سلول های اندوتلیال بند ناف انسانی (HUVEC)موجود در مرکز تحقیقات سلول های بنیادی دانشگاه علوم پزشکی تبریز استفاده می شود.در ابتدا سلول ها در محیط 2Dدر محیط کشت DMEM/HG حاوی 10%FBS و1%پنی سیلین-استرپتومایسین رشد داده می شوند. تعداد 105سلول به ازای هر سی سی به دستگاه بیوراکتور طراحی شده به صورت کاملا استریل در زیر هود لامینار انتقال داده می شود .در بیوراکتور سلول ها در محیط مشابه 3Dقرار می گیرند . سلول ها به وسیله آلژینات-ژلاتین و با استفاده از روش الکترواستاتیک میکروکپسوله شده و به بیوراکتور انتقال خواهند یافت. میکروکپسولاسیون سلولی یک روش انتقال سلولی به شمار می آید. بعد از زمان 5روز حیات سلولی در هردو گروه به وسیله تست MTTبررسی و با گروه کنترل مقایسه خواهند شد. همچنین استخراج RNA برای هر یک از گروه ها انجام شده و میزان بیان ژن های VWF و VEGFR-2 توسط روش Real-time pcr اندازه گیری شده و توانایی آنژیوژنزی سلول های مورد نظر بررسی خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 63187 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی بیان ژن های VWF و VEGFR-2 در سلول های اندوتلیال کشت داده شده در بیوراکتور در مقایسه با کشت معمولی |
| عنوان لاتین طرح | Evaluation of the expression VWF and VEGFR_2 gens in cultured endothelial cells in bioreactor compared with normal culture |
| نوع طرح | طرح تحقیقاتی |
| اولویت طرح | سلولهای بنیادی، مهندسی بافت و پزشکی بازساختی و زیست مواد |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | القاء آنژیوژنز که امروزه به عنوان یک روش درمانی بیماری های ایسکمیک مطرح می باشد نیازمند درک جامعی از فعالیت سلول های اندوتلیال و مطالعه ی عمیق تر فاکتور های بیولوژیک و سلول هایی با توان بالقوه بر روی سلول های اندوتلیال می باشد. بیماری هایی که درمان آنژیوژنیک در آن ممکن است سودمند واقع شود شامل بیماری های ایسمکیک مانند بیماری ایسکمیک شریان کرونری ، ایسکمی بحرانی اندام های حرکتی با اتیولوژی مختلف و بیماری زخم پای دیابتی می باشد. در این بیماری ها بخشی از جریان خون در یک ارگان یا اندام حرکتی از دست می رود. برای بیماری عروق کرونر که دلیل عمده مرگ و میر در جهان است روشهای درمانی موجود شامل کاهش ریسک فاکتور ها، حفظ جریان خون با استفاده از روش های آنژیوپلاستی یا پیوند بای پس ناکافی می باشند.در ایسکمی بحرانی اندام حرکتی، که تخمین زده می شود سالانه 500 تا1000 نفر در میلیون به آن مبتلا می شوند، وسعت آناتومیکی و انتشار انسدادهای شریانی بیمار را برای عمل جراحی نامناسب می کند. در حال حاضر هیچ درمان فارماکولوژیکی نمی تواند به طور مطلوب بر ایسکمی اثرگذار باشد. اغلب قطع عضو درمان توصیه شده برای این بیماران است. یکی دیگر از روش های درمان انواع آسیب های بافتی افزایش میزان خون رسانی می باشد. امروزه در بیماری های ایسکمیک و آسیب های بافنی داربست های مهندسی شده و یا منبع سلول های آندوتلیال به صورت مستقیم به موضع پیوند زده می شوند. متاسفانه کشت و افزایش میزان سلول های آندوتلیال با مشکلات عدیده¬ایی مواجه خواهد شد. یکی از این راهکاها استفاده از روش بیوراکتور و محیطهای سه بعدی می باشد.علاوه بر این در کشت های دو بعدی و افزایش میزان پاساژ سلولی میزان ژن ها دچار تغییرات قابل توجهی می گردند. در این طرح برای دستیابی به حجم زیادی از سلولها برای درمانهای بالینی و کاهش تعداد پاساژهای سلولی از کشت سه بعدی این سلولها در بیوراکتور استفاده میشود وبا کشت دوبعدی آن مقایسه میشود.از طرح دیگر امروزه یکی از معضلات پیش رو در زمینه پزشکی بازساختی کارایی کم روش های مستقیم تزریق سلول به محل های مورد مطالعه می باشد. بطوری که در طی فرآیند تزریق مستقیم سلولی تعداد کمی از سلول های تجویز شده خاصیت بهینه برای ترمیم را نشان می دهند. به نظر می¬رسد که میکروکپسولاسیون سلول¬های اندوتلیالی دارای چندین مزایا باشد که از آن جمله می¬توان به ایجاد یک محیط مجزا و امن از وجود نیروهای هیدرودینامیکی و مهار تراکم در طول توسعه در سیستم¬های سیال می¬باشد در واقع انتقال سلول¬ها پشت یک سد نیمه نفوذ پذیر و توانمندسازی سلولی برای ترشح و آزادسازی فاکتورهای رشد از سلول¬های کپسوله شده بدون مواجه با سیسم ایمنی را فراهم می¬کند. |
| اهداف اختصاصی | بررسی میزان بقاء سلول های آندوتلیال انسانی بعد از کشت در بیوراکتور و کشت معمولی -بررسی میزان بیان ژن های VEGFR-2 و vWF بعد از کشت در بیوراکتور و کشت معمولی -بررسی میزان بقا سلولی سلول های اندوتلیال انسانی در درون میکروکپسول های آلژیناتی/ژلاتینی ودر محیط بیوراکتور |
| چکیده انگلیسی طرح | In the present study, the human umbilical cord endothelial cell line (HUVEC) available at the Stem Cell Research Center of Tabriz University of Medical Sciences is used. Initially, the cells are grown in 2D environment in DMEM/HG culture medium containing 10% FBS and 1% penicillin-streptomycin. The number of 105 cells per cc is transferred to the bioreactor designed in a completely sterile manner under the laminar hood. In the bioreactor, the cells are placed in a similar 3D environment. |
| کلمات کلیدی | 1-بیوراکتور: دز واقع سیستمی است که توانایی انجام فرایند های شیمیایی و تولید مواد حاصل از فعالیت بیوشیمیایی ارگانیسم ها را فراهم میکند. 2- آنژیوژنز: فرایندی فیزیولوژیکی است که در آن رگهای جدید از رگهای موجود رشد میکنند. 3-میکروکپسولاسیون سلولی:روشی در جهت انتقال سلول ها به محل مورد نظر می باشد که این روش به وسیله یک سری بیومتریال های سازگار با محیط بدن طراحی می شود. نظام سلامت |
| ذینفعان نتایج طرح | در تمامی بیمارانی که کاندیدای پیوند بافت هستند یا افراد دچار سکته های قلبی و بیماریهای قلبی عروقی کاربرد دارد. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| رضا رهبرقاضی | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
| اکرم سلامی قلعه | همکار اصلی |
| شیرین صابریان پور | همکار اصلی |
| مهدی احمدی | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر بیوراکتور باعث افزایش تعداد و عملکرد مناسب سلول های رگ می شود.متن خبر کشت سلول های رگ در آزمایشگاه به عنوان یکی از دغدغه های سلول درمانی است. در این مطالعه مشخص شد که کشت سلول های رگ در داخل سیستم بیوراکتور موجب افزایش بقاء سلول و عملکرد مناسب این سلول ها در مقایشه با کشت رایج در محیط آزمایشگاه می شود. سلول ها در سیستم بیوراکتور دارای توان بالای عملکردی بوده و میزان مرگ آنها نیز کاهش می یابد. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
