ارائه روش های آنالیزی برای اندازه گیری داروها و بیومارکرها در پلاسمای بیماران کلیوی

مجریان: علی شایان فر

خلاصه روش اجرا: در این مطالعه هدف ارائه روش آنالیزی ساده سریع برای اندازه گیری داروی مایکوفنولیک اسید و همچنین برخی بیومارکرها مانند ایندوکسیل سولفات که یکی از سموم کلیوی و نشان دهنده شدت بیماری مزمن کلیوی می باشد، و اندازه گیری غلظت سیانید در پلاسمای این بیماران به علت مصرف ویتامین B12 به فرم سیانوکوبالامین می باشد. در این مطالعه سعی خواهد شد از روش های ساده آماده سازی نمونه مانند ترسیب پروتئین با حلال آلی یا روش های استخراج مایع-مایع همراه با salting out با کمک روش های اسپکتروسکوپی (اسپکتروفلوریمتری) که قابلیت انتخاب پذیری برای آنالیت داشته باشد یا روش های کروماتوگرافی (HPLC) برای تعیین غلظت خونی مایکوفنولیک اسید (مشتق سازی با ترکیبات مختلف مانند تربیوم) و ایندوکسیل سولفات (دارای فلورسانس ذاتی) در پلاسمای بیماران کلیوی استفاده گردد. به منظور اندازه گیری غلظت سیانید از یک روش کلاسیک رنگ سنجی به کمک یک وسیله تجاری به نام Conway diffusion cell (اغلب برای اندازه گیری آمونیاک و الکل استفاده می شود) استفاده خواهد شد. مقداری از نمونه پلاسما با مقدار مناسبی سولفوریک اسید مخلوط و در اثر این واکنش سیانید به هیدروسیانیک اسید تبدیل می شود و در بخش مرکزی سل در داخل هیدروکسید سدیم 0.1 مولار جذب خواهد شد. سپس طی یکسری واکنش های شیمیایی با ماده ای بنام کلرامین، پیریدین و باربیتوریک اسید، ماده رنگی حاصل شده و میزان شدت رنگ در طول موج 580 نانومتر اندازه گیری خواهد شد. دقت و صحت روش آنالیز بررسی و به استناد منحنی کالیبراسیون بدست آمده و روش برای اندازه گیری غلظت سیانید در نمونه پلاسمای بیماران استفاده خواهد شد. لازم به ذکر است کاربرد این روش های آنالیزی در قالب طرح های تحقیقاتی و پایاننامه های جداگانه توسط همکاران بالینی به دانشگاه ارائه شده و بعد از دریافت کد اخلاق مربوطه و تهیه نمونه های حقیقی برای اندازه گیری غلظت این آنالیت ها در نمونه واقعی استفاده خواهد شد.