بررسی عملکرد siRNA بر مهار بیان ژنE6 ویروس پاپیلومای انسانی بر آپوپتوز سلولی از طریق فعالیت Caspase10 بر روی سلول های Hela
Effects of HPV E6-inhibting siRNA on development of cellular apoptosis through activation of Caspase 10 in CaSki and Hela cell line
مجریان: حسین بنازاده باغی , امیر علی مختارزاده
خلاصه روش اجرا: اهداف اختصاصی: 1-تعیین سطح بیان ژن های HPV E5, E6, E7 و P53 رده ی سلولی Helaو CaSki قبل از transfection با siRNA 2-Transfection رده ی سلولی Helaو CaSki دارای ژنوم HPV با siRNA هدف گزاری شده برای مهار بیان ژن HPV E6 3-تعیین سطح بیان ژن های HPV E5, E6, E7 و P53 رده ی سلولی Hela وCaSki بعد از transfection با siRNA و مقایسه ی سطح بیان P53و E6 در شرایط قبل و بعد از transfection ابتدا سطح بیان ژن های E5, E6, E7 و p53 در سلول های Helaو CaSki با روش RT-qPCR اندازه گیری خواهد شد. سپس سلول ها در معرض مقدار مشخص از siRNA قرار خواهند گرفت. پس از گذشت زمان در نظر گرفته شده طبق پروتوکول سطح بیان ژن های E5, E6, E7 و P53 با روش RT-qPCR دوباره اندازه گیری خواهند شد. در نهایت نتایج بدست آمده با هم مقایسه می شوند.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 63094 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی عملکرد siRNA بر مهار بیان ژنE6 ویروس پاپیلومای انسانی بر آپوپتوز سلولی از طریق فعالیت Caspase10 بر روی سلول های Hela |
| عنوان لاتین طرح | Effects of HPV E6-inhibting siRNA on development of cellular apoptosis through activation of Caspase 10 in CaSki and Hela cell line |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | اپیدمیولوژی، پیشگیری، تشخیص زودهنگام، درمان و بازتوانی در سرطانهای شایع |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | کارشناسی ارشد |
| مدت اجرا - ماه | 6 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | سطح بیان ژن های ویروس HPV و بخصوص E6 در رده های سلولی اپی تلیالی مختلف متفاوت است. در این مطالعه برای اولین بار ، با استفاده از siRNA ، سطح بیان ژن E6 ویروس پاپیلومای انسانی در سلول های Helaو CaSki کاهش خواهد یافت تا میزان تأثیر این مهار بر بیان ژن P53در سلول های آلوده به ویروس مورد ارزیابی قرار گیرد. در صورت تأیید مثبت این ارتباط ، می توان مهار بیان ژن E6 ویروس پاپیلومای انسانی را به عنوان یکی از اهداف کاربردی در درمان های مولکولی سرطان های وابسته به HPV ، در نظر گرفت. |
| اهداف اختصاصی | تعیین سطح بیان ژن های HPV E5, E6, E7 و CASPASE 10 رده ی سلولی CaSki قبل ازtransfection siRNA -Transfection رده ی سلولی,HeLa CaSki دارای ژنوم HPV با siRNA هدف گزاری شده برای مهار بیان ژن HPV E6 -تعیین سطح بیان ژن های HPV E5, E6, E7 و CASPASE 10رده ی سلولی CaSki و Helaبعد از transfection با siRNA و مقایسه ی سطح بیان CASPASE 10و E5, E6, E7 در شرایط قبل و بعد از transfection -بررسی سطح آپوپتز سلولها پس از transfection به روش MTT |
| چکیده انگلیسی طرح | Specific objectives: 1-Determination of the expression levels of HPV E5, E6, E7 and P53 genes in Hela and CaSki cell lines before transfection with siRNA 2-Transfection of Hela and CaSki cell lines containing HPV genome with siRNA targeted to inhibit HPV E6 gene expression 3-Determination of the expression levels of HPV E5, E6, E7 and P53 genes in Hela and CaSki cell lines after transfection with siRNA and comparison of the expression levels of P53 and E6 in the conditions before and after transfection First, the expression levels of E5, E6, E7 and p53 genes in Hela and CaSki cells will be measured by RT-qPCR method. Then, the cells will be exposed to a certain amount of siRNA. After the specified time, the expression levels of E5, E6, E7 and P53 genes will be measured again by RT-qPCR method according to the protocol. Finally, the results obtained will be compared. |
| کلمات کلیدی | پروتئین های E ویروسی: پروتئین هایی که ویروس در فاز اولیه ی آلوده کردن سلول شروع به ساخت آنها می کند. پروتئین های L ویروسی: پروتئین هایی که ویروس در فاز تأخیری آلوده کردن سلول شروع به ساخت آنها می کند. ترانسفورماسیون: فرآیند تغییر شکل و تغییر مسیر های متابولیکی سلول در جهت بدخیم شدن را گویند. موتاسیون: فرآیند جهش در ژن را گویند. P53 و pRb: نوعی از پروتئین های سرکوب کننده ی تومور زایی در چرخه ی سلولی هستند. رشد anchorage-independent: نوعی رشد سلولی که در سلول های ترنسفورم یافته دیده می شود. EGF receptor : گیرنده ی فاکتور رشد اپیدرمال را گویند. endothelin-1: نوعی پروتئین منقبض کننده ی عروق است که در اپیتلیال رگ ها دیده می شود. G-protein: پروتئینی است که در فرآیند انتقال سیگنال های سلولی دخالت دارد. P21: یکی از مهار کننده های چرخه ی سلولی می باشد. Vacuolar-ATPase (V-ATPase) : نوعی پمپ H+ است که در غشاء اندوزوم ها دیده می شود. Transfection: انتقال یک ژن خاص به درون سلول بواسطه ی وکتور را گویند. CaSkiو Hela: رده های سلولی سرطان دهانه ی رحم که دارای ژنوم ویروس پاپیلومای انسانی هستند و همچنین رو نوشت های پروتئین HPV E6 در آن ها موجود می باشد. |
| ذینفعان نتایج طرح |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| حسین بنازاده باغی | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| امیر علی مختارزاده | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| فرناز راثی بناب | دانشجوی مالک پایان نامه |
| نیما همت | همکار اصلی |
| بهزاد برادران | مشاور |
| محمد امین دوستوندی | همکار اصلی |
| حبیب عنصری | مشاور |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر مهار ژنE6 ویروس پاپیلومای انسانی با روشهای مولکولی بعنوان مقدمه ای جهت پیشگیری و یا درمان سرطان دهانه رحم در آینده می باشدمتن خبر تقریبا تمام موارد گزارش شده از سرطان دهانه رحم مرتبط با ویروس پاپیلومای انسانی است، این سرطان به عنوان چهارمین سرطان شایع در بین زنان در سراسر جهان میباشد. بنابراین ارائه راهبردی مناسب جهت پیشگیری، تشخیص و درمان ضروری میباشد. از سوی دیگر، داروهای شیمی درمانی به دلیل عدم اختصاصیت منجر به افزایش مقاومت دارویی و سمیت سیستمیک می گردند؛ در نتیجه،روشهای مولکولی و ژن درمانی با داروهای ضد سرطان یک روش درمانی موثر در آینده میباشد. به عبارت دیگر، درمان ترکیبی منجر به افزایش قابل توجه اثربخشی درمان در مقایسه با تک درمانی می شود. در این راستا، مطالعه ما که مهار ژنE6 ویروس پاپیلومای انسانی با روشهای مولکولی بوده است نشان داد که درمان این سرطان با روشهای مولکولی و siRNA به طور جالب توجهی بافت توموری را هدف قرار داده و متعاقبا آسیب به بافت طبیعی و پیشرفت بدخیمی کاهش می یابد که می تواند در آینده جهت پیشگیری و یا درمان سرطان دهانه رحم مورد استفاده قرار بگیرد. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
