اثر روتین بر بیان ژنهای Bax و Bcl2 در سلولهای سرطان دهان (HN5)
The effect of rutin on the expression of Bax and Bcl2 genes in oral cancer cells (HN5)
مجریان: سیمین شریفی , سپیده بهلولی
خلاصه روش اجرا: به منظور انجام این آزمایشات، سلولهای HN5 (که low passage می باشد) بصورت تک لایه در محیط DMEM با گلوکز بالا حاوی سرم 10% (FBS یا Fetal Bovin Serum) و آنتی بیوتیک کشت داده شده و پس از رسیدن به سطح Confluency ، با روتین تهیه شده در رقتهای مختلف مواجه می شوند. پس از کشت سلولهای سرطان دهان تریت سلولها با روتین، RNA از سلول های مزبور استخراج خواهد شد. با استفاده از 1 میکرو گرم RNA واکنش RT ست می گردد. واکنش در دستگاه ترموسایکلر بر طبق برنامه دمایی خاص آغاز می شود. در ادامه با استفاده از روش Real time-PCR نسخه های ژنهای bax و bcl-2 بررسی و تعیین مقدار می شود. بطور خلاصه برای هر ژن یک جفت Primer طراحی شده و با استفاده از 10 نانوگرم cDNA ، بافر، پرایمرها، کلرید منیزیم، dNTP’s و آنزیم Tag-Polymerase واکنش PCR آماده می گردد. لازم به توضیح است که برای کنترل تغییرات بین نمونه ای، از Housekeeping Gene ß-Actin استفاده خواهد شد و از نسبت دانسیته ژن مورد نظر بر ß-Actin برای گزارش نتایج استفاده خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 62992 |
| عنوان فارسی طرح | اثر روتین بر بیان ژنهای Bax و Bcl2 در سلولهای سرطان دهان (HN5) |
| عنوان لاتین طرح | The effect of rutin on the expression of Bax and Bcl2 genes in oral cancer cells (HN5) |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | مکانیسم سلولی مولکولی اثربخشی فرآوردههای دارویی، ترکیبات بیولوژیک |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دکتری عمومی |
| مدت اجرا - ماه | 8 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | با توجه به این که عوارض داروهای شیمیایی جهت شیمی درمانی در بیماران سرطانی چشمگیر می باشد و مصرف مواد غذایی طبیعی همانند روتین که اثرات ضد سرطانی و ویژگی های ممانعت از ایجاد سرطان را هم داراست، بر آن شدیم که در این تحقیق اثر ماده ضد سرطانی روتین بر روی سلولهای سرطان دهان مورد بررسی قرار دهیم. در این مطالعه اثر روتین بر روی برخی ژنهای BCL-2, bax مورد بررسی قرار خواهد گرفت. |
| اهداف اختصاصی | بررسی اثر روتین بر بیان ژنهای Bax و Bcl2 در سلولهای سرطان دهان (HN5) توسط روش RT-Real time PCR |
| چکیده انگلیسی طرح | HN5 cells will be cultivated in high glucose DMEM medium and will be treated with rutin then expression levels of bax and bcl-2 genes will be evaluated. |
| کلمات کلیدی | آپوپتوز (Apoptosis): مرگ برنامه ریزی شده سلول RT- PCR: واکنش زنجیره پلیمراز نسخه برداری معکوس ( Reverse Transcriptase-PCR ) که ابتدا ریبو نوکلئیک اسید (RNA ) توسط آنزیم نسخه بردار معکوس به DNA تبدیل شده و سپس توسط واکنش زنجیره پلیمراز (PCR) به نسخه های فراوان تکثیر می شود. Confluency: پوشیده شدن سطح کشت از تک لایه سلولی فراورده هاي دارويي و گياهي |
| ذینفعان نتایج طرح | ذینفعان این طرح در صورت مثبت بودن نتایج مطالعه احتمالا بیماران مبتلا به سرطان دهان خواهند بود. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| سیمین شریفی | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| سپیده بهلولی | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| سولماز ملکی دیزج | مشاور |
| امیر ایمانی | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر نانوذرات روتین می توانند بر بیان ژنهای Bax و Bcl2 در سلولهای سرطان دهان (HN5) موثر باشند.متن خبر سرطان دهان سرطانی است که در محوطه دهان (زبان، کف دهان، کام سخت و لثه) تشکیل میگردد. روتین ماده طبیعی موجود در بسیاری از گیاهان و مواد غذایی از جمله گندم سیاه، چای سیاه، پوست سیب، پیاز، مرکبات، و توتون است. مطابق مطالعات گزارش شده، این ماده دارای خواص ضدباکتریایی، خواص ضدالتهابی و خواص آنتی اکسیدانی می باشد. در این مطالعه اثر نانوروتین بر بیان ژنهای Bax و Bcl2 در سلولهای سرطان دهان بررسی شد. مطابق نتایج به دست آمده، میزان بیان ژن Bcl2 در سلولهای HN5 در مواجهه با نانوروتین، کاهش معنی دار نسبت به گروه کنترل نشان داد (p<0.05). نسبت Bax/Bcl-2 در سلولهای HN5 مواجه شده با روتین، تفاوت معنی داری نکرد ولی نانوروتین باعث افزایش نسبت با توجه به نتایج مکانیسم القا مرگ سلولی نانوروتین، مسیر داخلی آپوپتوز بوده و با توجه به افزایش بیش از 100 برابر سمیت نانوروتین نسبت به روتین روی سلول های سرطان دهان که نشانگر اهمیت افزایش سطح تماس روتین با سلولها و اهمیت کاهش اندازه ذره ای تا ابعاد نانومتری می باشد. به نظر می رسد این ماده بتواند گزینه ای مناسب برای طراحی داروهای ضد سرطانی مخصوصاً در ترکیب با داروهای ضد سرطان شیمیایی باشد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
