بررسی بیان miR-383 و PD-L1 در بافت سرطانی سینه و اثر جایگزینی miR-383 در مهار بیان PD-l1 و رشد سلولی و مهاجرت سلولی و القای آپوپتوز در رده سلول سرطان سینه
Investigating the expression of miR-383 and PD-L1 in breast cancer tissue and the effect of replacing miR-383 mimic in inhibition of the expression of PD-l1, cell growth and cell migration, and apoptosis induction in the breast cancer cell line
مجریان: بهزاد برادران
خلاصه روش اجرا: .نمونهگیری از بیمار که طی آن بافت های سرطانی از بیماران مبتلا به سرطان سینه توسط جراح متخصص از بیمار جدا و بلافاصله به نیتروژن مایع جهت نگهداری برای آزمایشات آتی منتقل خواهد شد. 2. استخراج RNA کل از نمونه ها واستخراج توسط کیت مخصوص استخراج RNA و سنجش خلوص آن با اسپکتروفوتومتر و نیز الکتروفورز بررسی خواهد شد. 3. واکنش RT-PCR، که با استفاده از پرایمرهایی علیه PD-L1 و miR-383 جهت ساخت cDNA از ژنهای فوق انجام میگیرد. 4. Real-Time PCR، که با استفاده از کیت SyberGreen واکنش Real-Time PCR را برای محصول واکنش RT-PCR انجام گرفته و میزان بیان ژن سنجیده میشود. 5.کشت رده های سلولی سرطان سینه وانتخاب رده سلولی که کمترین مقدار بیان miR-383 را نشان میدهد. 6. ترانس فکت mimic miR-383 به رده سلولی سرطان سینه منتخب و سنجش بیان PD-L1 و miR-383 و مقایسه بیان قبل و بعد از ترانسفکت. 7. انجام تست های MTT 8. انجام تستwound healing assay برای بررسی مهاجرت سلولی 9.انجام تست Annexin V برای بررسی آپوپتوز 10. انجام محاسبات آماری
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 62774 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی بیان miR-383 و PD-L1 در بافت سرطانی سینه و اثر جایگزینی miR-383 در مهار بیان PD-l1 و رشد سلولی و مهاجرت سلولی و القای آپوپتوز در رده سلول سرطان سینه |
| عنوان لاتین طرح | Investigating the expression of miR-383 and PD-L1 in breast cancer tissue and the effect of replacing miR-383 mimic in inhibition of the expression of PD-l1, cell growth and cell migration, and apoptosis induction in the breast cancer cell line |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | مطالعات سلولی- مولکولی و ایمونولوژیک در زمینــه تولید واکسن |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دکتری تخصصی PhD |
| مدت اجرا - ماه | 16 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | تعداد افراد مبتلا به سرطان سینه در حال افزایش است بنابراین نیاز وافری برای پیدا کردن مسیرهای مولکولی جدید که دریچه امیدبخشی برای افراد مبتلا مباشد وجود دارد بنابراین در این مطالعه ما مسیر مولکولی ژن miR-383 و اثر آن روی بیان PD-l1 را بررسی میکنیم تا ببینیم آیا میتوان با جایگرینی بیان miR-383 از بیان PD-L1 جلوگیری کرد و در مطالعات آتی به نوعی باعث فعال سازی سیستم ایمنی بیماران مبتلا شد و بقای بیماران مبتلا را بالا برد |
| اهداف اختصاصی | بررسی بیان miR-383 و PD-L1 در بافت سرطانی سینه - بررسی بیان miR-383 و PD-L1در رده سلولی سرطان سینه قبل از تراتسفکتmiR-383 وبعد از ترانسفکت - بررسی میزان رشد سلولی بعد از ترانسفکشن mimic miR-383 -بررسی میزان آپوپتوز بعد از ترانسفکشن mimic miR-383 -بررسی میزان مهاجرت سلولی بعد از ترانسفکشن mimic miR-383 |
| چکیده انگلیسی طرح | ;h.نمونهگیری از بیمار که طی آن بافت های سرطانی از بیماران مبتلا به سرطان سینه توسط جراح متخصص از بیمار جدا و بلافاصله به نیتروژن مایع جهت نگهداری برای آزمایشات آتی منتقل خواهد شد. 2. استخراج RNA کل از نمونه ها واستخراج توسط کیت مخصوص استخراج RNA و سنجش خلوص آن با اسپکتروفوتومتر و نیز الکتروفورز بررسی خواهد شد. 3. واکنش RT-PCR، که با استفاده از پرایمرهایی علیه PD-L1 و miR-383 جهت ساخت cDNA از ژنهای فوق انجام میگیرد. 4. Real-Time PCR، که با استفاده از کیت SyberGreen واکنش Real-Time PCR را برای محصول واکنش RT-PCR انجام گرفته و میزان بیان ژن سنجیده میشود. 5.کشت رده های سلولی سرطان سینه وانتخاب رده سلولی که کمترین مقدار بیان miR-383 را نشان میدهد. 6. ترانس فکت mimic miR-383 به رده سلولی سرطان سینه منتخب و سنجش بیان PD-L1 و miR-383 و مقایسه بیان قبل و بعد از ترانسفکت. 7. انجام تست های MTT 8. انجام تستwound healing assay برای بررسی مهاجرت سلولی 9.انجام تست Annexin V برای بررسی آپوپتوز 10. انجام محاسبات آماری |
| کلمات کلیدی | replacement که عبارت است از بیان مصنوعی ژنی که بنا به دلایلی کاهش بیان پیدا کرده است |
| ذینفعان نتایج طرح |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| بهزاد برادران | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| رضا صفرعلیزاده | همکار اصلی |
| محمدعلی حسینپورفیضی | همکار اصلی |
| شیرین آذربرزین | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر MicroRNA -383-5p تکثیر و مهاجرت سلولهای سرطانی پستان را از طریق مهار PD-L1 مهار می کند و باعث آپوپتوز می شود.متن خبر این مطالعه با هدف بررسی تأثیر miR-383-5p در سلولهای سرطانی پستان و سلولهای T و ارتباط آن با ویژگی های بالینی پاتولوژیک در بیماران مبتلا صورت گرفته است.
در مقایسه با بافت های غیر بدخیم ، افزایش بیان PD-L1 و کاهش بیان miR-383-5p در بافتهای سرطانی پستان دیده شد. علاوه بر این ، miR-383-5p از طریق القا آپوپتوز و تعدیل بیان ژنهای مربوط به آپوپتوز باعث کاهش زنده ماندن سلول سلول سرطان پستان می شود. علاوه بر این ، miR-383-5p می تواند باعث مهار مهاجرت سلولهای سرطانی پستان از طریق تنظیم ژن های مرتبط با متاستاز بشود . درضمن ، ترانسفکشن miR-383-5p باعث ترشح سیتوکین های التهابی از سلول های T می شود. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
