بررسی اثر چاپرونها بر بیان قطعه آنتی بادی Fab در ٍ E. coli
Evaluation of the Effects of Molecular Chaperone on the Soluble Expression of Recombinant Fab Fragment in E. coli
مجریان: صفر فرج نیا
خلاصه روش اجرا: در تحقیق پلاسمید بیان کننده آنتی بادی Fab در سویه های مختلف باکتری E. coli ترانسفرم شده و کلونهای بیانی در شرایط مناسب کشت و تکثیر داده خواهند شد. سپس این سلولها با پلاسمید های بیان کننده چاپرونهای سیتوپلاسمی ترانسفرم شده و بر روی محیطهای انتخابی مناسب شناسایی خواهند شد در مرحله بعد این سلولها درحضور سلکشن مارکرهای مناسب کنستراکت Fab و هرکدام از چاپرونها کشت و القا شده و اثر بیان توام چاپرونها با آنتی بادی Fab مورد بررسی قرار خواهد گرفت.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 62749 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثر چاپرونها بر بیان قطعه آنتی بادی Fab در ٍ E. coli |
| عنوان لاتین طرح | Evaluation of the Effects of Molecular Chaperone on the Soluble Expression of Recombinant Fab Fragment in E. coli |
| نوع طرح | گرنت پژوهشی |
| اولویت طرح | مطالعات سلولی- مولکولی و ایمونولوژیک در زمینــه تولید واکسن |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | چاپرونها از عوامل مهم در فولدینگ پروتئینها بوده و مطالعات زیادی در مورد آنها وجود دارد. اما اثر چاپرونها بر روی فولدینگ صحیح آنتی بادیهای ضد TNF بسیار محدود می باشد. |
| اهداف اختصاصی | بیان توالی کد کننده آنتی بادی Fab در e. coli -بیان توام چاپرون های سیتوپلاسمی و آنتی بادی Fab در E. coli |
| چکیده انگلیسی طرح | Evaluation of the Effects of Molecular Chaperone on the Soluble Expression of Recombinant Fab Fragment in E. coli Evaluation of the Effects of Molecular Chaperone on the Soluble Expression of Recombinant Fab Fragment in E. coli |
| کلمات کلیدی | FAB: قسمتی از مولکول آنتی بادی است که در اتصال به آنتی ژن نقش دارد و به عنوان ابزاری قدرتمند در درمان، تشخیص و مطالعات پایه نقش دارد. . Chaperone: ملکولهایی هستند که با اتصال به قسمتهای آب گریز پروتئین هدف، از تجمع آنها به شکل نامحلول و غیرفعال انکلوژن بادی جلوگیری کرده و به پروتئینها کمک می کنند که شکل طبیعی پایدارشان را به دست آورند. |
| ذینفعان نتایج طرح | مراکز تحقیقاتی و دانشگاهها |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| صفر فرج نیا | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
| حسن داریوش نژاد | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر چاپرونهای مولکولی باعث افزایش بیان آنتی بادیهای نوع Fab در E. coli میشود.متن خبر چاپرون های مولکولی تعدیل کننده های فولدینگ پروتئین هستند که نقشی محوری در کنترل کیفیت ساختاری پروتئوم داشته و
و باعث تسهیل فولدینگ پروتئینها میشوند. در این مطالعه ، تأثیر چاپرونهای سیتوپلاسمی بر تولید
آنتی بادی ضد TNF-α Fab در اشرشیاکلی بررسی شد. برای افزایش حلالیت ضد TNF-α Fab ، چاپرون پلاسمیدها ی مختلف
از جمله (pG-KJE8, GroELS و DnaKJE) ، pGro7 (GroELS) ، pKJE7 (DnaKJE) ، pG-Tf2 (GroELS و TF) و
pTf16 (TF) در سلولهای BL21 حاوی سازه ژنی pET-22b-Fab مورد استفاده قرار گرفت. حلالیت آنتی بادی
anti TNF توسط SDS-PAGE مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. همچنین فعالیت پروتئین نوترکیب با استفاده از روش ELISA و dot blot مورد آزمایش قرار گرفت.
تجزیه و تحلیل SDS-PAGE نشان داد که همزمان سازی بیان چاپرون باعث افزایش حلالیت آنتی بادی Fab می شود.
در میان مجموعه های چاپرون که با سازه Fab بمورد بررسی قرار گرفتند ، چاپرونهای dnaK / dnaJ / grpE بیشترین تأثیر را بر روی
بیان محلول آنتی بادی محلول Fab نشان دادند |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
