بررسی اثر لیزات گلبول های قرمز بر الگوی اسیدچرب فراکسیون های لیپیدی سرم

مجریان: امیر مهدی زاده حقیقی

خلاصه روش اجرا: این مطالعه بصورت تجربی (Experimental) روی نمونه های انسانی انجام خواهد شد. در این مطالعه از نمونه های سرم و گلبول های قرمز استفاده خواهد شد. نمونه های از تعداد 5 نفر فرد بالغ در محدوده سنی 50-20 سال گرفته خواهد شد. افراد مورد نظر از بین مردان سالم انتخاب خواهند شد. ابتلا به هرگونه بیماری به عنوان معیار خروج از مطالعه در نظر گرفته خواهد شد. برای جداسازی سرم و گلبول های قرمز از هر فرد داوطلب مقدار 10 میلی لیتر خون وریدی گرفته خواهد شد. جداسازی سرم از 5 میلی لیتر خون بدون ضد انعقاد و جداسازی گلبول های قرمز از 5 میلی لیتر خون بهمراه ضد انعقاد EDTA انجام خواهد شد. یک جفت نمونه سرم و گلبول قرمز به نسبت تعیین شده مخلوط خواهند شد. سپس گلبول های قرمز با روش مکانیکی (استرس سرنگی) لیز خواهند شد و توده های باقیمانده از گلبول های قرمز با استفاده از سانتریفوژ جداسازی خواهند شد. تیمارها در انکوباتور 37 درجه سانتیگراد در لوله های در بسته در مدت زمان های تعیین شده انجام خواهد شد. در وضعیت کنترل، تیمار در مدت زمان مشابه در دمای 4 درجه سانتیگراد انجام خواهد گرفت. جداسازی فراکسیون های لیپیدی فسفولیپیدی، اسیدهای چرب آزاد و تری گلیسیریدها با استفاده از روش کروماتوگرافی لایه نازک انجام خواهد گرفت و متیل استر اسیدهای چرب هر یک از فراکسیون ها در محیط اسیدی با استفاده از متانول انجام خواهد شد. ترکیب اسیدهای چرب با استفاده از روش کروماتوگرافی گازی تعیین خواهد شد. شناسایی پیک ها با استفاده از استاندارد متیل استر اسیدهای چرب بصورت خالص و مخلوط انجام خواهد شد و مقادیر بدست آمده با استفاده از استاندارد داخلی نرمالیزه خواهند شد.