بررسی القاء آپاپتوز در رده سلولی لوسمی لنفوئیدی حاد (Molt-4) متعاقب هم کشتی با سلول های بنیادی مزانشیمی

مجریان: حمیدرضا حیدری سورشجانی , راحله فرحزادی

خلاصه روش اجرا: خلاصه روش اجرا: امروزه بیماری های خونی متعددی از قبیل تالاسمی، سایر کم خونی¬ها با زمینه ارثی و اکتسابی و انواع لوسمی¬ها جامعه بشری را رنج می-دهند. لوسمی لنفوئیدی حاد فرمی‌از سرطان سلول‌های سفید خون است که به واسطه ازدیاد لمفوبلاست‌ها و لنفوسیت¬های نابالغ مشخص می‌شود. درمان¬های متعددی برای غلبه بر این بیماری¬ از قبیل شیمی درمانی با میزان بالا، رادیوتراپی کل بدن و ... وجود دارد که عواملی از قییل آسیب به سایر سلول¬ها در شیمی درمانی و عفونت¬های اولیه استفاده از این روش¬ها را محدود کرده است. اما امروزه روش پیوند مغز استخوان با استفاده از سلول¬های بنیادی، مؤثرترین روش درمان برای این بیماری می¬باشد. سلول بنیادی خواستگاه و منشاء انواع سلول¬ها بوده و دارای ویژگی مهم پرتوانی و خودنوسازی می¬باشد یعنی هم قدرت تبدیل به انواع سلول¬ها را دارد و هم می¬تواند به سلولی تمایز نیافته مشابه خودش تبدیل شود تا منبع اصلی سلول بنیادی باقی بماند. این سلول¬ها به دلیل دارا بودن خاصیت خودتجدیدی و توان تمایز به بافت¬های مختلف می¬توانند در درمان انواع بیماری¬ها کارآمد باشند. کاربرد این سلول¬ها در درمان بیماری¬های ژنتیکی، بهبود خونسازی در بیماران سرطانی تحت درمان، بازسازی استخوان، کم‌خونی آپلاستیک (ناتوانی در ساختن نسوج جدید)، سرطان خون و سرطان مغز استخوان به خوبی نشان داده شده است. شواهد زیادی وجود دارند که تنظیم آپاپتوز فرآیند مهمی در ممانعت از پیشرفت تومور می¬باشد و این قضیه کمک شایانی در درمان در اختیار محققان و پزشکان می¬گذارد. در این مطالعه، هدف تعیین اثر فاکتورها و سایتوکاین¬های مترشحه از سلول¬های بنیادی مزانشیمی بر میزان آپاپتوز و همچنین بررسی تغییرات سیکل سلولی در رده سلولی لوسمی لنفوئیدی حاد ¬که به روش هم¬کشتی در مجاورت یکدیگر قرار گرفته¬اند به عنوان یک پیش¬آگهی در درمان لوسمی لنفوئیدی حاد است. در این پژوهش سلول¬های بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی از موسسه رویان تهران خریداری شده و پس از بررسی نشانگرهای سطح سلولی و توانایی تمایز چندگانه این سلول¬ها، درصد زنده¬مانی سلول¬های خریداری شده به روش تریپان بلو تأیید خواهد شد. از طرف دیگر سلول¬های رده لوسمی لنفوئیدی حاد (ALL)، به طور جداگانه کشت داده شده و تکثیر می¬شوند. در مرحله بعد، هر دو سلول با استفاده از پلیت¬های مخصوص هم¬کشتی (Trans well) به مدت 7 روز در مجاورت هم، کشت داده می¬شوند. پس از اتمام دوره هم¬کشتی سلول¬های بنیادی مزانشیمی و سلول¬های رده ALL، بررسی آپاپتوز سلولی با استفاده از روش Ki/Caspase3انجام می¬شود. در ادامه بررسی میزان بیان ژن¬های دخیل در آپاپتوز P53 و BAD به روش Real time-PCR انجام خواهد شد.