بررسی اثرات پلاسمای غنی ازپلاکت (PRP ) در تکثیر و آپوپتوز سلولهای گرانولوزای انسان تیمار شده با سیکلوفسفامید (CTX).
Effects of Platelet-rich Plasma (PRP) on the proliferation and apoptosis of cyclophosphamide(CTX) treated human granulosa cells.
مجریان: محمد نوری , مهدی عدالتی
خلاصه روش اجرا: 1. بررسی سمیت داروی سیکلوفسفامید و تعیین IC50 آن روی سلولهای گرانولوزای تخمدان انسانی. 2. تیمار سلولهای گرانولوزا با داروی سیکلوفسفامید در دوز IC50 به مدت 12 ساعت. 3. تهیه نمونه خون برای به دست آوردن پلاسمای غنی از پلاکت (PRP) . 4. تیمار سلولهای گرانولوزا با پلاسمای غنی از پلاکت در سه رقت مختلف برای بدست آوردن تاثیر بهینه روی سلول ها. 5. بررسی تاثیر پلاسمای غنی از پلاکت روی آپوپتوز و تکثیر سلولی به ترتیب با روش فلوسایتومتری و MTT assay. 6. جمع آوری سلولهای تیمار شده جهت استخراج RNA و سنتز c-DNA . 7. بررسی بیان ژنهای مرتبط با مسیر تکثیر سلولی و آپوپتوز(Ras,PI3K,Caspase3,P27,Bcl2) .
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 62657 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثرات پلاسمای غنی ازپلاکت (PRP ) در تکثیر و آپوپتوز سلولهای گرانولوزای انسان تیمار شده با سیکلوفسفامید (CTX). |
| عنوان لاتین طرح | Effects of Platelet-rich Plasma (PRP) on the proliferation and apoptosis of cyclophosphamide(CTX) treated human granulosa cells. |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | سلولهای بنیادی، مهندسی بافت و پزشکی بازساختی و زیست مواد |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دکتری تخصصی PhD |
| مدت اجرا - ماه | 24 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | استفاده از فاکتورهای رشد پلاکتی در کاهش آپوپتوز و بهبود فعالیت سلولهای گرانولوزای تخمدان تیمار شده با سیکلو فسفامید. پیشرفت های اخیر در درمان سرطان، میزان بقاء بیماران را افزایش داده است. با این حال، اثرات مخرب درمان های ضد توموری روی باروری زنان هنوز به عنوان یک مشکل بزرگ باقی مانده است. خطر آسیب های گنادی به عواملی مانند پروتکل شیمی درمانی، دوز کلی تجویز شده و سن و میزان ذخایر فولیکولهای تخمدان در زمان درمان بستگی دارد. درمان سرطان می تواند منجر به تسریع از دست رفتن ذخایر تخمدان و آتروفی آن شود که در نتیجه باعث نارسایی زودرس تخمدان (POF ) خواهد شد. (1). در سالهای اخیر استفاده از PRP ی اتولوگ به طور ایمن در بسیاری از زمینه ها از جمله ارتوپدی، پزشکی ورزشی، دندانپزشکی، ENT ، جراحی مغز و اعصاب، چشم پزشکی، اورولوژی، ترمیم زخم، زیبایی، جراحی قلب و فک و صورت مورد استفاده قرار گرفته است(2) .بسیاری از پروتئین های بیواکتیو آزاد شده از پلاکتها که مسئول جذب ماکروفاژها، سلولهای بنیادی مزانشیمال و استئوبلاستها می باشند، در پیشبرد برداشت بافتهای نکروتیک دخیل هستند و در بازسازی و ترمیم بافتها نقش مهمی بازی می کنند(3). روشهای متفاوتی برای حفظ عملکرد تخمدانها و فعالیت اووسیتها وجود دارد از جمله درمان جایگرینی هورمونی (HRT) ، محافظت از تخمدان در سرما(Cryopreservation)، آگونیستهای هورمون آزاد کننده گنادوتروپین(GnRHa) و پیوند سلولهای بنیادی مزانشیمی(MSCT ) (4) که هر کدام از این روشها دارای معایبی از جمله گرانی، در دسترس نبودن عموم، مشکلات اخلاقی، ایجاد تومورهای دیگر، مشکلات ایمنی زایی و غیره هستند(5). فرضیه ما بر این اساس است که اگر بتوان با استفاده از بیومولکولها و فاکتورهای رشد مترشحه از پلاکتهای اتولوگ، سلولهای گرانولوزای تخمدان را حفظ و فعالیت آنها را بهبود بخشید یک روش نوین و جایگزین روشهای موجود خواهد بود که عملا هیچگونه خطرات جانبی را در پی نخواهد داشت. |
| اهداف اختصاصی | هدف اختصاصی شماره 1) تعیین اثرات PRP در کاهش آپوپپتوز در سلولهای گرانولوزای انسانی تیمار شده با CTX : -تعیین اثرات PRP در افزایش تکثیر در سلولهای گرانولوزای انسانی تیمار شده با CTX: -بررسی میزان بیان ژنهای مرتبط با مسیر آپوپپتوز (Bcl2 وCasp3) و تکثیر سلولی (PI3K وRas ) در سلولهای گرانولوزا تیمار شده با CTX که تحت تاثیر PRP قرار گرفته اند: |
| چکیده انگلیسی طرح | Effects of Platelet-rich Plasma (PRP) on the proliferation and apoptosis of cyclophosphamide(CTX) treated human granulosa cells. |
| کلمات کلیدی | Premature Ovarian Failure(POF) : نارسایی زودرس تخمدان (POF)، به ازبین رفتن عملکرد طبیعی تخمدان قبل از 40 سالگی اشاره دارد که به دلایل ژنتیکی، ایمنولوژیک و ایدروژنیک (شیمی درمانی و پرتودرمانی) و دیگر عوامل ایدئوپاتیک ایجاد می شود(1). Granulosa cells : سلولهای گرانولوزا در فولیکولهای اولیه تخمدان و بعدا در رشد فولیکولها (فولیکولوژنز)، به شکل سلولهای چند لایه اطراف اووسیتها را می پوشاند و منبع اصلی مهمترین استروئید های تخمدان هستند (استرادیول و پروژسترون) و بیشترین میزان استروئیدوژنز در سلول های گرانولوزای فولیکولی را دارند که سطوح بالایی از سیتوکروم P450 و 3β-هیدروکسی استروئید دهیدروژناز را دارا می باشند(32). Cyclophosphamide(CTX): سیکلوفسفامید یکی از داروهای شیمی درمانی است که کاربرد زیادی در درمان اکثر سرطانها دارد و پس از مصرف در کبد توسط سیستم سیتوکروم P450 به متابولیتهای فعال از جمله فسفورامید موستارد تبدیل می شود. اثر اصلی سیکلوفسفامید به علت این متابولیت است. فسفورامید موستارد اتصالاتی بین دورشته DNA در موقعیت های گوانین N-7 ایجاد می کند که غیر قابل برگشت بوده و منجر به آپوپتوز سلول می شود وتنها ماده موثری است که می تواند وارد سلول شود(33). Platelet Rich Plasma (PRP): PRP یک فراورده خونی است که سطح بالایی از پلاکت ها در آن تغلیظ شده است (حدود 000 1000 پلاکت / میکرو لیتر در 5 میلی لیتر پلاسما)، اما غلظت فاکتورهای رشد 3 تا 5 برابر بیشتر از پلاسما است. فاکتورهای رشد در گرانول های α ذخیره می شوند و شامل فاکتور رشد مشتق از پلاکت (PDGF)، فاکتور رشد تغییر شکل دهنده بتا (TGF-β)، فاکتور رشد اندوتلیال عروق (VEGF)، فاکتور رشد اپیدرمی (EGF)، فاکتور رشد فیبروبلاست (FGF)، فاکتور رشد شبه انسولینی (IGF) و برخی دیگر. این سیتوکین ها نقش مهمی در تکثیر سلولی، کموتاکسی و تمایز سلولهای مزانشیمی و دیگر سلول ها و افزایش آنژیوژنز دارند(34). |
| ذینفعان نتایج طرح | پیشرفت در درمان انواع سرطان در جامعه و افزایش طول عمر و بهبود کیفیت بیماران پس از شیمی درمانی مخصوصا در زنان جوانی که در دوران باروری قرار دارند، دست یابی به روشی غیر تهاجمی برای حفظ و بازگرداندن فعالیت سلولهای گرانولوزای تخمدان و در نهایت ایجاد باروری لازم و ضروری بود. از این رو انتظار می رود پژوهش فعلی مسیر رسیدن به درمان مناسب در بیماران مبتلا به نارسایی تخمدان که تحت تاثیر داروهای شیمی درمانی قرارگرفته اند را هموار نماید. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| محمد نوری | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| مهدی عدالتی | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| عباس ابراهیمی کلان | مشاور |
| فاطمه رمضانی | مشاور |
| عباس کریمی | همکار اصلی |
| یحیی یحیوی | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر PRP رشد و تکثیر و جلوگیری از آپوپتوز سلولهای گرانولوزای تخمدان انسانی آسیب دیده با سیکلوفسفامید را می تواند افزایش دهد.متن خبر پیشرفتهای اخیر در درمان سرطان، میزان بقاء بیماران را افزایش داده است، اما اثرات مخرب درمانهای ضد توموری بر باروری زنان همچنان چالش بزرگی است. درمان سرطان میتواند منجر به نارسایی زودرس تخمدان (POF) شود. استفاده از پلاسمای غنی از پلاکت (PRP) در بسیاری از زمینه های پزشکی به کار رفته و در بازسازی و ترمیم بافتها نقش مهمی دارد. فرضیه ما بر این اساس بود که استفاده از بیومولکولها و فاکتورهای رشد مترشحه از پلاکتهای می تواند بصورت کم خطر برای حفظ و بهبود فعالیت سلولهای گرانولوزای تخمدان موثر باشد. در این مطالعه، سلولهای گرانولوزای آسیب دیده با سیکلوفسفامید در معرض غلظتهای مختلف PRP کشت داده شدند. نتایج ریل تایم نشان داد که PRP باعث افزایش بیان ژنهای دخیل در چرخه سلولی و تکثیر سلولی (PI3K, Bcl2, Ras ) و کاهش بیان ژنهای دخیل در آپوپتوز (Casp3, P27) شد. همچنین نتایج فلوسیتومتری نشان داد که وقتی سلولهای آسیب دیده در معرض غلظتهای بالای PRP (۵۰درصد) قرار می گیرند میزان رشد و تکثیر افزایش و آپوپتوز کاهش بیشتری پیدا می کند. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
