فراوانی ژن blaPER1 در ایزوله های بالینی آسینتوباکتر بومانی و ارتباط آن با ژنهای کوئوروم سنسینگ (luxI، luxR)، تولید بیوفیلم (pgaB، bap) و فاکتورهای ویرولانس (pld، epsA و ptk) در شهر تبریز و تایپینگ ایزوله ها با روش RAPD-PCR
Frequency of blaPER-1 in clinical isolates of Acinetobacter bumannii and its assocition with quorum sensing (luxI, luxR), biofilm production (pgaB, bap) and virulence factors (pld, epsA, ptk) in Tabriz and typing of isolates by RAPD-PCR
مجریان: محمد آهنگرزاده رضایی , آلکا حسنی
خلاصه روش اجرا: ایزوله های آسینتوباکتر جدا شده از نمونه های بالینی بیماران در مرکز آموزشی درمانی تبریز جمع آوری و پس از تعیین هویت با روشهای استاندارد در محیط تریپتی کیس سوی براث (TSB) حاوی 20% گلیسرول در دمای 80- درجه سانتیگراد برای بررسیهای بعدی ذخیره میکنیم. جهت تائید مولکولی ایزوله ها بعنوان آسینتوباکتر بومانی از ژن rpoB استفاده خواهد شد. برای تعیین الگوی مقاومت آنتیبیوتیکی از روش دیسک دیفیوژن آگار و جهت تعیین حداقل غلظت مهار کننده کلیستین برای ایزولههای XDR از روش آگار دایلوشن استفاده خواهد شد. ایزوله ها را از نظر فراوانی ژن blaPER1 بررسی کرده همچنین ایزوله ها از نظر توانایی تشکیل بیوفیلم به روش پلیت میکروتیتر و توانایی تولید ژلاتیناز، پروتئاز و همولیزین مورد بررسی قرار خواهند گرفت. سپس ایزولههای را از نظر ژنهای کوئوروم سنسینگ (luxI،luxR)، تولید بیوفیلم (pgaB، bap) و فاکتورهای ویرولانس (pld، epsA و ptk) به روش PCR مورد ارزیابی و مقایسه قرار خواهند گرفت و تایپینگ ایزوله ها نیز به روش RAPD-PCR صورت خواهد گرفت. نتایج بدست آمده با استفاده از نرم افزار SPSS مورد آنالیز قرار خواهند گرفت.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 62656 |
| عنوان فارسی طرح | فراوانی ژن blaPER1 در ایزوله های بالینی آسینتوباکتر بومانی و ارتباط آن با ژنهای کوئوروم سنسینگ (luxI، luxR)، تولید بیوفیلم (pgaB، bap) و فاکتورهای ویرولانس (pld، epsA و ptk) در شهر تبریز و تایپینگ ایزوله ها با روش RAPD-PCR |
| عنوان لاتین طرح | Frequency of blaPER-1 in clinical isolates of Acinetobacter bumannii and its assocition with quorum sensing (luxI, luxR), biofilm production (pgaB, bap) and virulence factors (pld, epsA, ptk) in Tabriz and typing of isolates by RAPD-PCR |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | مقاومت های میکروبی |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | کارشناسی ارشد |
| مدت اجرا - ماه | 15 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | با وجود آنکه شواهدی از ارتباط ژن blaPER1 و توانایی اتصال باکتری آسینتوباکتر به سلولهای میزبان مطرح شده است اما بررسی جامعی درخصوص ارتباط ژن مذکور با سایر ویژگیها و عوامل بیماریزایی این پاتوژن خطرناک انجام نشده است، بنابراین هدف از تحقیق حاضر بررسی ارتباط بین کوئوروم سنسینگ، تولید بیوفیلم و برخی فاکتورهای ویرولانس آن با فراوانی ژن بتالاکتاماز blaPER1 و شیوع این فاکتورها در ایزوله-های شهر تبریز می باشد. |
| اهداف اختصاصی | جمع ­آوری و تعیین هویت ایزوله­ های بالینی آسینتوباکتر با استفاده از روش­های فنوتیپی و ژنوتیپی -تعیین الگوی مقاومت دارویی ایزوله­ های بالینی آسینتوباکتر بومانی به روش دیسک دیفیوژن آگار -اندازه گیری حداقل غلظت مهارکنندگی (MIC) کلیستین در ایزوله­ های XDR -بررسی فراوانی ژنblaPER1 در ایزوله ­ها به روش PCR -بررسی توانایی تشکیل بیوفیلم در ایزوله­ ها -بررسی توانایی تولید ژلاتیناز، پروتئاز و همولیزین در ایزوله ها -بررسی فراوانی ژن­های کوئوروم سنسینگ در ایزوله­ ها به روش PCR بررسی فراوانی ژن­های بیوفیلم در ایزوله­ ها به روش PCR بررسی فراوانی ژن­های فاکتورهای ویرولانس در ایزوله ها به روش PCR تایپینگ ایزوله ها با روش RAPD-PCR |
| چکیده انگلیسی طرح | Acinetobacter isolates isolated from clinical samples of patients at Tabriz Educational and Medical Center were collected and after identification by standard methods, they were stored in Tryptic Soy Broth (TSB) medium containing 20% glycerol at -80°C for further studies. The rpoB gene will be used for molecular confirmation of the isolates as Acinetobacter baumannii. The agar disk diffusion method will be used to determine the antibiotic resistance pattern and the agar dilution method will be used to determine the minimum inhibitory concentration of colistin for XDR isolates. The isolates will be examined for the abundance of the blaPER1 gene. The isolates will also be examined for their ability to form biofilms by the microtiter plate method and their ability to produce gelatinase, protease, and hemolysin. Then, the isolates will be evaluated and compared for quorum sensing genes (luxI, luxR), biofilm production (pgaB, bap), and virulence factors (pld, epsA, and ptk) by PCR method, and typing of the isolates will be performed by RAPD-PCR method. The results obtained will be analyzed using SPSS software. |
| کلمات کلیدی | آسینتوباکتر بومانی: کوکو باسیلهای گرم منفی غیر تخمیری متعلق به خانواده موراکسلاسه که عامل عفونتهای مختلف مانند عفونتهای مجاری ادراری، پنومونی، تراکئوبرونشیت، اندوکاردیت، سپتی سمی، مننژیت و عفونتهای پوست میباشند. کوئوروم سنسینگ: سیستم ارتباطی سلول به سلول در ارگانیسمهای تک سلولی میباشد که از طریق ترشح مولکولهای ارتباطی به داخل محیط و سپس اتصال آنها به پروتئینهای گیرنده عمل میکند. بنابراین بطور مستقیم یا غیرمستقیم رونویسی و ترجمه را تحت تاثیر قرار داده و اطلاعات را مبادله و رفتار ارگانیسم دیگر را تغییر میدهد. بیوفیلم: به اجتماع سلولهای میکروبی که از طریق ماتریکس پلی-ساکاریدی با منشاء میکروبی بطور محکم به سطوح متصل میشوند اطلاق میشود. فاکتور ویرولانس: فاکتور ویرولانس یا حدت عبارت است از قابلیت کمی باکتریها در ایجاد بیماری و مرگ و میر که عمدتاً شامل خاصیت تهاجم، انتشار و یا توانایی تولید توکسین میباشد. |
| ذینفعان نتایج طرح | با توجه به موضوع طرح، نتایج این تحقیق می تواند جهت کنترل و مهار عفونت های مقاوم به درمان این باکتری بویژه در محیطهای بیمارستانی مورد استفاده متخصصان حوزه های بهداشتی و درمانی قرار گیرد. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| محمد آهنگرزاده رضایی | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| آلکا حسنی | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| جاوید صادقی | مشاور |
| حسین صمدی کفیل | مشاور |
| محمد حسین سروش برحقی | مشاور |
| فاطمه یگانه سفیدان | همکار اصلی |
| فریبا نعیمی مزرعه | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر آنزیم بتالاکتاماز و مقاومت دارویی چندگانه در ایزوله های آسینتوباکتر بومانی از شیوع بالایی برخوردار است.متن خبر پایش مداوم مقاومت آنتی بیوتیکی گسترده در بین ایزوله های آسینتوباکتر بومانی از اهمیت بالایی در سیستم درمانی کشور برخوردار است. در پژوهشی که طی سال 1399 در بیمارستان های آموزشی تبریز بر روی 70 ایزوله آسینتوباکتر جدا شده از بیماران انجام شد، کلیه سویه ها دارای مقاومت دارویی چندگانه (MDR) و حدود 9% آنها مقاوم به تمام آنتی بیوتیک های مورد استفاده بودند. شیوع آنزیم بتالاکتاماز blaPER-1 در میان ایزوله های بالینی بدست آمده از بیمارستان های تبریز بطور نگران کننده ای افزایش یافته است. ضمناً بررسی انجام شده نشان داد که بین حضور ژن بتالاکتاماز blaPER-1 در ایزوله ها و فعالیت برخی از فاکتورهای ویرولانس باکتری (تولید ژلاتیناز، فعالیت همولیزی) ارتباط وجود دارد. بر اساس نتایج این پژوهش لزوم اتخاذ تدابیر درمانی صحیح و مؤثر برای جلوگیری از پیدایش و انتشار ایزوله های آسینتوباکتر مقاوم به درمان از یک سو و پیشگیری از گسترش ایزوله های خطرناک در محیط های بیمارستانی از سوی دیگر بیش از پیش احساس می شود. ضمناً پیشنهاد می شود خصوصیات ژنتیکی و الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی این ایزوله ها بطور مداوم بررسی و به پزشکان گزارش گردد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
