بررسی مولکولی پلی مورفیسم Ex3 VNTR ژن DRD4دربیماران اختلال طیف اوتیسم در شمال غرب ایران
Molecular Analysis of Ex3 VNTR polymorphism of DRD4 gene in autistic spectrum disorder patients in northwest of Iran
مجریان: شاهرخ امیری
خلاصه روش اجرا: انتخاب بیماران اختلال طیف اوتیسم : بیماران پس از اخذ شرح حال دقیق و معاینه وضعیت روانی و بررسی بیمار براساس معیارهای اختلال طیف اوتیسم در رفرانس DSM5 توسط فوق تخصص مربوطه ( فوق تخصص مغز و اعصاب کودکان- فوق تخصص روان پزشکی کودک و نوجوان) به کلنیک ژنتیک معرفی شده اند و بعد از مشاوره و توضیح اهداف آزمایش و امضاء رضایت نامه آگاهانه توسط والدین قانونی از بیماران خون گیری شده اند.این طرح در ادامه طرح قبلی با عنوان " موتاسیون های ژن FMR1 در بیماران اختلال طیف اوتیسم در شمال غرب ایران " که به شماره 5/4/6545 مورخه 29/8/90 در کمیته منطقه ای اخلاق به تصویب رسیده است انجام خواهد شد از نمونه های خون جمع آوری شده در همانطرح استفاده خواهد شد از بیماران خون گیری مجدد انجام نخواهد گرفت و با بیماران هیچ گونه ارتباط نخواهد بود تعداد بیماران= حدود 100 بیمار (پسر) در سنین کمتر از 15 سالگی تعداد کنترل= افراد سالم (پسر) به تعداد 100 نفر کمتر از 15 سالگی خون گیری: 5-3 سی سی خون از ورید بازویی در شرایط استریل تهیه شده است بررسی مولکولی: DNA از نمونه خون بیماران مبتلا به اختلال طیف اوتیسم و افراد کنترل استخراج خواهد شد. قطعه Ex3 VNTR ژن DRD4 با استفاده از روش پرایمرهای اختصاصی به روش PCR معمولی تکثیر خواهد شد و دونوع الل مختلف پلی مورفیسم فوق با استفاده از روش ژل اکریلامید بررسی خواهد شد. توالی های پرایمر با استفاده از نرم افزار Primer 3 نسخه 4 طراحی خواهند شد. فراوانی و توزیع واریانت با استفاده از نرم افزار POPGENE نسخه 1.32 محاسبه خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 62500 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی مولکولی پلی مورفیسم Ex3 VNTR ژن DRD4دربیماران اختلال طیف اوتیسم در شمال غرب ایران |
| عنوان لاتین طرح | Molecular Analysis of Ex3 VNTR polymorphism of DRD4 gene in autistic spectrum disorder patients in northwest of Iran |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | ناهنجاری های مادرزادی و اختلالات ژنتیکی |
| نوع مطالعه | بررسی مقطعی ( Cross Sectional) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دکتری عمومی |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | به دلیل طبیعت هتروژنی اختلالات طیف اوتیسم برخی مطالعات ارتباط بین ژنتیک و اختلال طیف اوتیسم را نشان داده اند در حالی که سایر مطالعات چنین ارتباطی را نشان نداده اند. از آنجایی که پیوستگی و ارتباط بین واریانت های ژن DRD4 و اختلال طیف اوتیسم در جمعیت شمال غرب کشور مورد بررسی قرار نگرفته است، در این مطالعه قصد بررسی اثرات احتمالی پلی مورفیسم Ex3 VNTR ژن DRD4 را در جمعیت های مبتلا به اختلال طیف اوتیسم در شمال غرب کشور داریم. |
| اهداف اختصاصی | بررسی مولکولی پلی مورفیسم Ex3 VNTR ژن DRD4دربیماران اختلال طیف اوتیسم در شمال غرب ایران -بررسی مولکولی پلی مورفیسم Ex3 VNTR ژن DRD4در جمعیت کنترل در شمال غرب ایران |
| چکیده انگلیسی طرح | Selection of Autism Spectrum Disorder Patients: After taking a detailed history and examining the patient's mental status and examining the patient based on the criteria for autism spectrum disorder in the DSM5 reference by the relevant specialist (Child Neurology Specialist - Child and Adolescent Psychiatry Specialist), the patients were introduced to the genetic clinic and after counseling and explaining the objectives of the test and signing an informed consent form by the legal parents, blood was collected from the patients. This project is a continuation of the previous project titled "FMR1 gene mutations in autism spectrum disorder patients in northwest Iran" which was approved by the Regional Ethics Committee under number 5/4/6545 dated 8/29/90. Blood samples collected in the same project will be used. No blood sampling will be performed from the patients again and there will be no contact with the patients. Number of patients = about 100 patients (boys) under the age of 15 Number of controls = 100 healthy individuals (boys) under the age of 15 Blood collection: 3-5 cc of blood from the brachial vein in Sterile conditions have been prepared Molecular study: DNA will be extracted from blood samples of patients with autism spectrum disorder and control subjects. The Ex3 VNTR fragment of the DRD4 gene will be amplified using the conventional PCR method using specific primers, and the two different alleles of the above polymorphism will be examined using the acrylamide gel method. Primer sequences will be designed using Primer 3 version 4 software. The frequency and distribution of variants will be calculated using POPGENE version 1.32 software. |
| کلمات کلیدی | SNP: چند شکلی تک نوکلئوتیدی: در ژنوم یک فرد یک نوکلئوتید تغییر یافته وجود دارد که متفاوت از ناحیه متناظر در سایر افراد جمعیت می باشد، که در حداقل 1% از سایر افراد آن جمعیت رخ می دهد. VNTR: a variable number tandem repeat. توالی های VNTR یا ماهوارکها قسمتی از DNA هستند که شامل ردیفهای تکراری بوده و تحت عنوان توالی های تکراری پشت سرهم با تعداد متنوع یا VNTRS نامیده میشوند. این واحدها به صورت پراکنده در ژنوم وجود داشته و هرواحد تکرار شونده دارای 60-10 جفت باز بوده که به صورت پیدرپی صدها و حتی هزاران بار تکرار میشوند. به نظر میرسد این توالیها مناطق غیرکدکننده DNA را شامل میشوند. برای تعیین چندشکلی در این روش، ابتدا DNA ژنومی توسط آنزیمهای محدودگر برش داده میشود. سپس قطعات با الکتروفورز جداسازی میگردند و لکهگذاری ساترن انجام گرفته و دورگهسازی با کاوشگرهایی با توالیهای تکراری جهت شناسایی قطعات با طول متفاوت انجام میگردد. به این ترتیب از روی تنوع واحدهای تکراری، چند شکلی تعیین میگردد. از نشانگرهای ماهوارک به خوبی برای شناسایی افراد و تعیین رابطه خویشاوندی بین افراد استفاده میشود. زیرا مقدار زیادی از تنوع در داخل جمعیتها قابل بررسی میباشد. همچنین از این تکنیک جهت تهیه نقشههای پیوستگی ژنتیکی استفاده میشود. |
| ذینفعان نتایج طرح | بیماران: کلیه بیماران مبتلا به اختلال طیف اوتیسم که تحت درمان می باشند. امید است که نتایج مطالعه در جهت یافت روش های کاربردی مدیریت بیماری این بیماران مورد استفاده قرار گیرد. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| محمود شکاری خانیانی | مشاور |
| شاهرخ امیری | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| علیرضا شفیعی | مشاور |
| آرمان محمدی | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر بین پلی مورفیسم EX 3 VNTR ، ژن DRD4 و اختلالات طیف اوتیسم رابطه معنی دار وجود داشت..متن خبر اختلال طیف اوتیسم اختلال چند عاملی پیچیده است که شامل آسیبهای ژنتیکی مختلف که در تعامل با فاکتورهای محیطی و برای توصیف گروهی از اختلالات رشد نموی عصبی به کار میرود که معمولا شروع علائم آن قبل از 3سالگی میباشد.جامعه مورد بررسی در این مطالعه شامل بیماران مبتلا به اختلال طیف اوتیسم مراجعه کننده به درمانگاه بیمارستان رازی،که به روش نمونهگیری در دسترس انتخاب و پس از اخذ شرح حال و معاینه وضعیت روانی و بررسی براساس معیارهای اختلال طیف اوتیسم در DSM5 توسط فوق تخصص روان پزشکی کودک و نوجوان به کلینیک ژنتیک معرفی شدهاند.تعداد 100 بیمار (پسر) کمتر از 15 سال و تعداد گروه کنترل 100 نفر سالم کمتر از 15 سال.ابتدا 5-3 سی سی خون ورید بازویی در شرایط استریل تهیه شد و DNA از نمونه خون بیماران مبتلا به اختلال طیف اوتیسم و افراد کنترل استخراج شد. قطعه Ex3 VNTR ژن DRD4 با استفاده از روش پرایمرهای اختصاصی به روش PCR معمولی تکثیر شد و دونوع الل مختلف پلی مورفیسم فوق با استفاده از روش ژل اکریلامید بررسی شد.براساس نتایج حاصل از مطالعه فراوانی آلل 700 bp در هر دو گروه بیمار و کنترل بیشتر از سایر آلل ها بود. همچنین میزان فراوانی کلی آلل ها در دو گروه بطور معنی داری با هم اختلاف داشت. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
