هدف قرار دادن همزمان فاکتورهای HIF-1alpha و IL-6 به منظور مهار رشد و گسترش سلول های سرطانی
Cotargeting of HIF-1alpha and IL-6 for blocking the growh and development of cancer cells
مجریان: فرهاد جدیدی نیارق , قاسم قلم فرسا
خلاصه روش اجرا: این مطالعه دو فاز دارد: ۱. تولید نانو ذرات کیتوزان لاکتات حاوی siRNA : ابتدا با واکنش کیتوزان و اسید لاکتیک ترکیب کیتوزان لاکتات را تولید می کنیم. سپس باید نانوذرات کیتوزان لاکتات RNA مداخله گر را در بر بگیرند. کیتوزان لاکتات پتانسیل بالایی برای کپسوله کردن siRNA و حفاظت از آن در برابر تخریب سرمی دارد. تشکیل نانو ذرات کیتوزان لاکتات در اثر تعاملات یونی بین کیتوزان لاکتات و siRNA حل شده در سدیم تری پلی فسفات ( siRNA/TPP ) صورت می گیرد. و نانوذرات حاویsiRNA تولید می شوند که خصوصیات فیزیکو شیمیایی آن ها بررسی می شود. تولید کمپلکس نانوذرات-siRNA با ژل اکتروفورز در ژل 2% آگارز تایید می شود و میزان بارگیریsiRNA به صورت کمی بوسیله روش اولتراسانتریفیوژ بررسی خواهد شد. از رده سلول های سرطانی4T1 (سرطان پستان) در این مطالعه استفاده خواهد شد. این رده سلولی در محیط RPMI1640 حاوی fetal bovine serum ۱۰ درصد و آنتی بیوتیک کشت داده می شوند.پس از گذشت ۲۴ ساعت از کشت سلولی نانوذرات حاوی siRNA را به محیط کشت هر رده سلولی اضافه می کنیم. میزان تاثیر نانوذرات بارگیری شده با siRNA بر روی بیان ژن HIF-1αو IL-6در کشت سلول ها توسط تکنیک Real-time PCR در فواصل زمانی مختلف بررسی می شود.تاثیر نانوذرات حاویsiRNA بر روی حیات سلولی توسط آزمون MTT ارزیابی می شود. علاوه بر این میزان تاثیر نانوذرات بارگیری شده با siRNA بر روی فاکتورهای پیش آپوپتوزی (Bax) فاکتورهای ضد آپوپتوزی (Bcl-2 ) فاکتورآنژیوژنز (VEGF) فاکتورهای متاستاز (MMP2, MMP9) با استفاده از تکنیک Real-time PCR در فواصل زمانی مختلف بررسی می شود
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 62483 |
| عنوان فارسی طرح | هدف قرار دادن همزمان فاکتورهای HIF-1alpha و IL-6 به منظور مهار رشد و گسترش سلول های سرطانی |
| عنوان لاتین طرح | Cotargeting of HIF-1alpha and IL-6 for blocking the growh and development of cancer cells |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | نانوفیبرها، نانوذرات و اسکافولدها (در طب بازساختی، مهندسی بافت و دارورسانی) |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دکتری عمومی |
| مدت اجرا - ماه | 14 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | همزمان با رشد سریع سلول های توموری,شرایط هایپوکسیک و به دنبال آن محیط غنی از آدنوزین در ناحیه تومور ایجاد می شود که می توانند فعالیت ضد توموری سلول های T و NK را مهار کنند.طبق مطالعات انجام شده بیشترین فاکتوری که در این شرایط فعال می شود HIF-1 است که می تواند موجب رشد سلول های توموری شود و بر متاستاز ‚رگزایی و مقاومت دارویی تومور تاثیر بگذارد.HIF-1 همچنین می تواند روی بیان IL-6 تاثیر داشته باشد و شرایط غنی از آدنوزین در محیط ایجاد شود که نقش مهمی در مکانیسم فرار تومور ایفا می کند.مطالعات جداگانه زیادی برای مهار HIF-1α و IL-6 انجام شده است که گاها به علت اختصاصی نبودن عوارض جانبی زیادی داشتند.ولی در این مطالعه ما به کمک نانوذرات و RNA های مداخله گر به دنبال معرفی روشی هدفمند هستیم که بیان ژن های IL-6 و HIF-1α را برای اولین بار بطور همزمان در ریزمحیط توموری سرکوب کند و با دوز کم ، بیشترین تاثیر و کمترین عارضه را داشته باشد. |
| اهداف اختصاصی | هدف اختصاصی شماره1: تولید نانو ذرات کیتوزان لاکتات حاوی : siRNA -مطالعه in vitro اثر بخشی درمان ترکیبی بر روی بقای سلول های سرطانی با روش MTT -مطالعه in vitro اثر بخشی درمان ترکیبی بر روی بیان ژن های پیش برنده آپوپتوز، مهار کننده آپوپتوز، آنژیوژنز و متاستاز سلول های سرطانی با روش Real-time PCR |
| چکیده انگلیسی طرح | ابتدا با واکنش کیتوزان و اسید لاکتیک ترکیب کیتوزان لاکتات را تولید می کنیم. سپس باید نانوذرات کیتوزان لاکتات RNA مداخله گر را در بر بگیرند. کیتوزان لاکتات پتانسیل بالایی برای کپسوله کردن siRNA و حفاظت از آن در برابر تخریب سرمی دارد. تشکیل نانو ذرات کیتوزان لاکتات در اثر تعاملات یونی بین کیتوزان لاکتات و siRNA حل شده در سدیم تری پلی فسفات ( siRNA/TPP ) صورت می گیرد. و نانوذرات حاویsiRNA تولید می شوند که خصوصیات فیزیکو شیمیایی آن ها بررسی می شود. تولید کمپلکس نانوذرات-siRNA با ژل اکتروفورز در ژل 2% آگارز تایید می شود و میزان بارگیریsiRNA به صورت کمی بوسیله روش اولتراسانتریفیوژ بررسی خواهد شد. |
| کلمات کلیدی | siRNA RNA مداخله گر (RNAi) اصطلاح کلی است که به تکنولوژی خاموشی پس از رونویسی توسط RNA دو رشته ای اطلاق می گردد.در تکنولوژی RNA مداخله گر (RNAi) ، رشته مکمل mRNA ژن مورد نظر ساخته شده و این رشته به mRNA ژن هدف متصل و یک توالی دورشته ای (dsRNA) را بوجودمی آورد. از آنجا که سیستم سنتز پروتئین قادر به ترجمه mRNA دو رشته ای نمی باشد، بیان ژن هدف متوقف و اصطلاحاً ژن خاموش می شود. HIF-1α: جزئی از فاکتور رونویس هترو دایمر HIF-1 است که از دو جزء HIF-1α وHIF-1β تشکیل شده است.یک جزء حساس به اکسیژن است که بیان آن تحت شرایط کمبود اکسیژن القا می گردد. به عنوان تنظیم کننده اصلی رونویسی در پاسخ سلولی به شرایط کمبود اکسیژن عمل می کند.در بقا و تهاجم سلول های توموری و رگزایی نقش دارد. IL-6: یکی از اینترلوکین ها مهم می باشد که از گلبول های سفید ترشح می شود و نقش عمده ای در پاسخ های ایمنی و التهابی دارد. این فاکتور از ماکروفاژها، لنفوسیت های Thelper، لنفوسیت های B و آستروسیت ها ترشح می گردد و بر پلاسما سل ها و لنفوسیت ها موثر می باشد. اصلی ترین عملکرد این فاکتور در تسهیل تمایز و رشد سلولی لنفوسیت های B و تولید بیشتر ایمونوگلوبولین ها می باشد، ولی مشاهده شده است که در پروسه های تهاجم و تمایز سلولی و پرولیفراسیون سلول های سرطانی نیز دخیل می باشد. VEGF: ماده ای است که توسط سلول ها تولید می شود و تشکیل رگ های جدید را تحریک می کند. TGFβ: فاکتور تغییر دهنده رشد β از طریق مهار لنفوسیت ها و فاگوسیت ها باعث تعدیل و تنظیم پاسخ های ایمنی می گردد. این سایتوکین هم اثر ضد التهابی و هم اثر پیش التهابی را نشان می دهد که بسته به زمان و مقدار تولید و سیستمیک یا موضعی بودن آن دارد. TGF-β از سلول های T تحریک شده ، بیگانه خوارهای تک هسته ای فعال شده با LPS و بسیاری دیگر از سلول ها تولید می شود. MDSC: از سلول های رده میلوئیدی است که موجب مهار پاسخ های ایمنی می شود. |
| ذینفعان نتایج طرح | بیماران سرطانی |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| فرهاد جدیدی نیارق | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| قاسم قلم فرسا | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| هادی حسن نیا | مشاور |
| علی جهانی حیدرلو | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر مهار همزمان فاکتورهای HIF-1a و IL-6 مانع رشد سرطان می شود.متن خبر همزمان با رشد سریع سلول های توموری,شرایط هایپوکسیک و به دنبال آن محیط غنی از آدنوزین و سایتوکاین IL-6 در ناحیه تومور ایجاد می شود که سرکوبگر ایمنی می باشد. بنابراین هدف قرار دادن فاکتورهای HIF-1a و IL-6 می تواند یک روش موثر برای مهار سرطان باشد.بنابراین، در این مطالعه نانوذرات بارگیری شده با siRNA به منظور سرکوب بیان فاکتورهای فوق در سلول های سرطان سینه موشی 4T1 استفاده شد.نتایج این مطالعه نشان داد که درمان ترکیبی با استفاده از نانوذرات بارگیری شده با مولکول های siRNA می تواند موجب کاهش بقای سلول های سرطانی و مهار تکثیر سلول های سرطانی شده و بیان ژن های پیش برنده تومور را سرکوب نماید.این یافته ها نشان از پتانسیل بالای درمان ترکیبی بر اساس مهار بیان 1a-HIF و 6-IL بوسیله نانوذرات بارگیری شده با مولکول های siRNA برای مهار رشد و گسترش سرطان دارد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
