بررسی اثر مهار let7i در مهار متاستاز ردهای سلولی ملانومایی (A-375) , (C8161)
evaluation of let7-i inhibition of melanoma cell line metastasis (A-375)و (C8161)
مجریان: سیامک صندوقچیان , بهزاد برادران
خلاصه روش اجرا: تومورها میتوانند خوشخیم (غیرسرطانی) و یا بدخیم (سرطانی) باشند. تومورهای خوشخیم سرطانی نیستند. آنها بهندرت زندگی انسان را تهدید میکنند.معمولاً، تومورهای خوشخیم را میتوان برداشت و بهندرت دوباره رشد میکنند. سلولهای تومورهای خوشخیم به بافتهای اطراف خود و یا دیگر قسمتهای بدن گسترش نمییابند. تومورهای بدخیم سرطانی هستند. آنها عموماً جدیتر بوده و ممکن است زندگی را تهدید کنند. تومورهای بدخیم را میتوانند با جراحی بردارند، اما آنها گاهی دوباره رشد میکنند. miRNAها مولکولهای RNAکوچک 25-21 نوکلئوتیدی هستند که با اتصال به mRNA هدف در تنظیم بیان ژن نقش اساسی دارند. این RNAها به دو دسته تومور ساپرسور و انکوژن دستهبندی شدهاند. از miRNAهای تومورساپرسور که در ملانوما دچار کاهش بیان میشودmir-143 میباشد، در نتیجه کاهش بیان این miRNA بیان ژنهای MMP-1,e-cadherin,vimentin,CXCR4دچار بینظمی میگردد، این ژنها در مهاجرت و متاستاز نقش دارند(3). روشهای درمانی مختلفی برای درمان ملانومابکار گرفته میشود، هرکدام از این روشها مزایا و معایبی دارند، یکی از اهداف درمانی در ملانومابازگرداندن میزان بیان miRNAهای تومورساپرسور به سطح طبیعی در سلولهای سرطانی میباشد که توسط تکنیک miRNA replacement therapyانجام میگیرد. برای این منظور ابتدا سلولهای سرطانی در محیط کشت RPMI حاوی FCS 10% در دمای 37ₒc و CO2 5% کشت داده میشود، سپس ژن Let7-i همراه وکتور و معرف ترانسفکت کننده Lipofectamin2000 به محیط کشت اضافه میگردد، انکوباسیون انجام میگیرد، بعد از گذشت زمان لازم میزان بیان miR-143 و ژنهای مورد مطالعه بوسیله qRT-PCR اندازهگیری میشود. میزان رشد و پرولیفراسیون سلولهای سرطانی توسط تکنیک MTT مورد بررسی قرار میگیرد. بعد از ترانسفکت Let7-i وگذشت مدت زمان لازم محیط کشت با محیط کشت حاوی MTT تعویض میشود و بعد از 4 ساعت انکوباسیون توسط دستگاه ELISA Plate Reader جذب نوری در طول موج 570nm قرائت میشود. میزان مهاجرت و متاستاز سلولهای سرطانی بعد از ترانسفکت Let7-i بوسیله آزمایش Wound healing assay بررسی میگردد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 62296 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثر مهار let7i در مهار متاستاز ردهای سلولی ملانومایی (A-375) , (C8161) |
| عنوان لاتین طرح | evaluation of let7-i inhibition of melanoma cell line metastasis (A-375)و (C8161) |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | ایمونوتراپی بیماریهای شایع با استفاده از ژن درمانی |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دکتری عمومی |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | در حال حاضر با پیشرفت علم ایمونولوژی ایجاد داروهای بیولوژیکی و ایمنولوژیکی در بیماریهای خود ایمنی و سرطانها نقش بسزایی دارد. ایمونوتراپی سرطان نیاز به شناخت مکانیسم های ایمنی در سطح ملکولی و سلولی دارد که MiRNA ها در این رابطه نقش مهمی را ایفا میکنند که با اتصال به mRNA هدف در تنظیم بیان ژن نقش اساسی دارند.با توجه به اینکه این موضوع برای اولین بار در روی ملانوما انجام میگردد لذا امید است با نتایج این طرح به مکانیسم های دخیل ملانوما رسیده و در تحقیقات بعدی راههای مهار مکانیسم و بهبودی ملانوما حاصل آید. |
| اهداف اختصاصی | بررسی میزان بیان let7-i وژن‏های MMP-9,E-cadherin,vimentin,CXCR4 پس از جایگزینی let7-i در سلول‏های ملانوما به روش Quantitative real-time PCR. -بررسی میزان تکثیرسلول‏های سرطانی پس از جایگزینی let7-i در سلول‏های ملانوما به روش MTT -بررسی میزان تها‏جم سلول‏های سرطانی پس از جایگزینی let-7i به روش Wound healing assay |
| چکیده انگلیسی طرح | Tumors can be benign (non-cancerous) or malignant (cancerous). Benign tumors are not cancerous. They rarely threaten human life. Generally, benign tumors can be removed and rarely grow again. Benign tumor cells do not spread to the surrounding tissues or other parts of the body. Malignant tumors are cancerous. They are generally more serious and may be life threatening. Malignant tumors can be surgically removed, but they sometimes grow again. MiRNAs are small 25-21 nucleotide RNA molecules that play a key role in regulating gene expression by binding to the target mRNA. These RNAs are classified into two types of tumor suppressor and oncogene. Of miRNAs of tumor suppressor, which is expressed in melanoma, is mir-143, thereby reducing the expression of this miRNA, the expression of MMP-1, e-cadherin, vimentin, and CXCR4 genes is irregular, these genes In migration and metastasis (3). Different therapies are used to treat melanoma metabolism. Each of these methods has advantages and disadvantages. One of the therapeutic goals in melanoma is to restore the expression of tumor osteoporic miRNAs to normal levels in cancerous cells, by miRNA technique replacement therapy is done. For this purpose, the cancer cells were first cultured in RPMI containing FCS containing 10% FCS at 37 ° C and 5% CO2, then the Let7-i gene was added to the medium and the vector of the Lipofectamin2000 transfection agent was added. , Incubation is carried out, after the required time the miR-143 expression and the genes studied are measured by qRT-PCR. The growth and proliferation of cancer cells are monitored by the MTT technique. After the Let7-i transfection, the time period of the culture medium was replaced with the medium containing MTT, and after 4 hours of incubation, ELISA Plate Reader reads optical absorption at 570 nm. Immunization and metastasis of cancer cells after the Let7-I transfection are investigated by Wound healing assay. |
| کلمات کلیدی | microRNA: RNA های کوچک غیرکدکننده به طول 24-21نوکلئوتید. melanoma: ملانوماعبارت است از رشد خارج از کنترل سلولهای بدخیم درسلول های اپیدرم پوست. متاستاز: فرایندی پیچیده و چند مرحلهای است که منجر به گسترش سرطان در مکانهای دورتر از جایگاه اولیه سرطان میشود. microRNA Replacement therapy: تکنیکی است که در آن ژن microRNA تومور ساپرسور را توسط یک وکتور وارد سلول سرطانی میکنند. MMP-9: ژن Matrix metallopeptidase IX که در متاستاز سلولهای سرطانی نقش دارد. apoptosis: آپوپتوز یا مرگ برنامهریزی شده سلول بعنوان روش حفاظت شده، تحت کنترل ژنهاست که به منظور حذف سلولهای ناخواسته و غیر ضروری موجودات زنده بکار میرود. |
| ذینفعان نتایج طرح | بیماران : جهت درمان ملانوما بصورت ایمونوتراپی که موثر تر از شیمی درمانی خواهد بود. صنعت: تهییه و بومی نمودن داروهای سرطانی بر پایه ایمنولوژی |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| سیامک صندوقچیان | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| بهزاد برادران | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| شیرین شیخ نجفی | همکار اصلی |
| رامین حشمتی | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر اثر مثبت مهار اسید ریبونوکلوئیک های کوچک در مهار گسترش سرطان پوستمتن خبر اسید ریبونوکلوئیک های کوچک زیرگروه بزرگی از اسید ریبونوکلوئیک هاهستند که از نظر تکاملی حفاظت شده میباشند. این مولکولها بیان ژن را پس از رونویسی از طریق مهار ترجمهاسید ریبونوکلوئیک ها یا القا تجزیه آنها کنترل می کنند بیوژنز اسید ریبونوکلوئیک ها در هسته وسیتوپلاسم صورت میگیرد.مطالعه حاضر در مورد مهار تسید ریبونوکلئیک های کوچک در گسترش سرطان پوست میباشد. نتایج این مطالعه نشان داد که با مهار اسید ریبونوکلئیک های کوچک از طریق مهار گیرنده های سیستم ایمنی میتوان گسترش و مهاجرت سلول های سرطانی پوست را مهار کرد. یکی از این اسید ریبونوکلئیک ها let7i میباشد. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
