جداسازی قطعات کوچک نواحی متغیر آنتی بادی (scFv) علیه Hsp70 از کتابخانه آنتی بادی فاژ
Isolation of anti Hsp70 scFvs antibody from phage antibody library
مجریان: جلال عبدالعلیزاده , ام لیلا مولوی
خلاصه روش اجرا: ابتدا کتابخانهscFv تکثیر داده می شود. سپس جداسازی و panning قطعات کوچک نواحی متغیر آنتی بادی علیه Hsp70 از کتابخانه آنتی بادی فاژ انجام می گیرد. امروزه در بسیاری از سرطان ها ارتباط بین ایجاد و متاستاز سرطان و تغییر در میزان بیان Hsp70مشخص شده است. مطالعات نشان می دهند که می توان از Hsp70بعنوان یک مارکر تشخیصی و هدف درمانی بهره جست که پیشرفت در هر دو مورد، مستلزم تهیه آنتی بادی های مونوکلونال بر ضد Hsp70 است. این امر موجب خروج سالانه بالغ بر میلیون ها دلار از کشور می شود. لذا ما بر آن شدیم تا با استفاده از تکنیک Phage Display آنتی بادی بر علیه آن تولید و با استفاده از تکنیک های لازم، اتصال اختصاصی آنرا به Hsp70بررسی کنیم. از این آنتی بادی می توان علاوه بر درمان بیماران مبتلا به انواع بیماری های مذکور، درعکس برداری و تشخیص های آزمایشگاهی این بیماری ها در تست های مختلف Immunoassay از قبیل الایزا، وسترن بلات، تست های ایمونوهیستوشیمی و فلوسیتومتری استفاده کرد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 62076 |
| عنوان فارسی طرح | جداسازی قطعات کوچک نواحی متغیر آنتی بادی (scFv) علیه Hsp70 از کتابخانه آنتی بادی فاژ |
| عنوان لاتین طرح | Isolation of anti Hsp70 scFvs antibody from phage antibody library |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | تولید واکسن، فراورده های بیولوژیکی و آنتی بادیهای مونوکلونال و پلی کلونال |
| نوع مطالعه | طرح تحقیقاتی-پژوهشی |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دوره تکمیلی PhD |
| مدت اجرا - ماه | 24 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | آنتی بادی مونوکلونال بر علیه Hsp70 برای اولین بار تولید می شود. |
| اهداف اختصاصی | |
| چکیده انگلیسی طرح | First, the scFv library is amplified. Then, small fragments of the variable regions of the antibody against Hsp70 are isolated and panned from the phage antibody library. Today, in many cancers, a relationship has been identified between the development and metastasis of cancer and changes in the expression level of Hsp70. Studies show that Hsp70 can be used as a diagnostic marker and therapeutic target, and progress in both cases requires the preparation of monoclonal antibodies against Hsp70. This leads to an annual outflow of millions of dollars from the country. Therefore, we decided to produce an antibody against it using the Phage Display technique and examine its specific binding to Hsp70 using the necessary techniques. In addition to treating patients with the aforementioned diseases, this antibody can be used in imaging and laboratory diagnosis of these diseases in various Immunoassay tests such as ELISA, Western blot, immunohistochemistry and flow cytometry tests. |
| کلمات کلیدی | قطعات کوچک نواحی متغیر آنتی بادی(scFv): قطعات کوچک از آنتی بادی که شامل دومین های نواحی متغیر زنجیره های سبک و سنگین است و توسط یک قطعه متصل کننده به هم متصل شده اند. آنتی بادی مونوکلونال(mAb): آنتی بادی هائی که توسط یک کلون از سلول های B و بر علیه یک اپی توپ از آنتی ژن تولید می شوند. |
| ذینفعان نتایج طرح |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| جلال عبدالعلیزاده | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| ام لیلا مولوی | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| مهدی اصغری وسطی کلایی | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر پادتن جدید علیه انواع مختلف سرطان های انسانی تولید شدمتن خبر سرطان به عنوان دومین عامل مرگ و میر در جهان شناخته شده است. روش¬هایی مانند جراحی و شیمی درمانی از جمله روش¬های معمول در درمان این بیماری هستند. اما، متاسفانه به دلیل عوارض جانبی آنها، این روش ها رضایت بخش نیستند. از اینرو، در پژوهش های امروزی روش هایی را دنبال می کنند که با آنها بتوان ضمن هدف قرار دادن مستقیم سلول های سرطانی، دستگاه ایمنی بدن فرد بیمار را نیز علیه سرطان تحریک کنند. یکی از ابزارهای مهم و کلیدی در این روش، پادتن ها هستند. پادتن ها ترکیبات پروتئینی هستند که می توانند خواص ضد سرطان زیادی از خود نشان دهند. در پژوهش حاضر به کمک روش های مهندسی ژنتیک، پادتن کوچکی ساخته شده است که می تواند به اکثر سلول های سرطانی متصل شود. این پادتن که G6A نام دارد ضمن عدم عوارض جانبی، هزینه تولید و تخلیص آن نیز پایین می باشد. نتایج اولیه حاصل از ارزیابی عملکرد این پادتن نیز نشان می دهد که این پروتئین کوچک می تواند ابزار مناسبی جهت توسعه¬ی عوامل درمانی و تشخیصی علیه سرطان¬ باشد. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر قطعات آنتی بادی علیه Hsp70 میتواند به تشخیص و درمان سرطان کمک کندمتن خبر نتایج بیش از دو دهه مطالعه نشان می دهند که پروتئین Hsp70 که معمولاً در سلول های طبیعی بیان بسیار اندکی دارد در ایجاد و پیشرفت سرطان های مختلف نقش دارد. از اینرو این پروتئین می تواند بعنوان یک هدف تشخیصی و درمانی جدید به کمک آنتی بادی ها باشد. تولید آنتی بادی های مونوکلونال که یکی از قویترین ابزارهای تشخیصی و درمانی هدفمند هستند به طور سنتی بسیار وقت گیر، گران قیمت و محدودیت هایی جهت تزریق به انسان دارد. لذا در مطالعه حاضر، طراحی و ساخت یک قطعه از آنتی بادی انسانی جهت هدف قرار دادن Hsp70 مد نظر قرار گرفت. در این پژوهش، به کمک جدیدترین تکنیک به نام نمایش فاژی یک قطعه آنتی بادی به نام G6A علیه Hsp70 از کتابخانه قطعات آنتی بادی کاملاً انسانی انتخاب و در میزبان باکتریایی بیان شد که پس از تخلیص، عملکرد آن توسط تکنیک هایی مانند وسترن بلات، فلورسنس میکروسکوپی و SPR مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج این مطالعه نشان می دهند که G6A ضمن بیان مناسب، عملکرد قابل قبولی نیز در شناسایی سلول های سرطانی دارد. بنابراین، این آنتیبادی می تواند بستر مناسبی جهت توسعه¬ی عوامل درمانی و تشخیصی علیه سرطان¬های بیان کننده ی Hsp70 فراهم کند که البته مستلزم مطالعات بیشتر می باشد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر جداسازی نواحی متغییر آنتی بادی تک زنجیری (scFv) علیه Hsp70 از کتابخانه آنتی بادی فاژمتن خبر نتایج بیش از دو دهه مطالعه نشان می دهند که پروتئین Hsp70 که معمولاً در سلول های طبیعی بیان بسیار اندکی دارد در ایجاد و پیشرفت سرطان های مختلف نقش دارد. از اینرو این پروتئین می تواند بعنوان یک هدف تشخیصی و درمانی جدید به کمک آنتی بادی ها باشد. تولید آنتی بادی های مونوکلونال که یکی از قویترین ابزارهای تشخیصی و درمانی هدفمند هستند به طور سنتی بسیار وقت گیر، گران قیمت و محدودیت هایی جهت تزریق به انسان دارد. لذا در مطالعه حاضر، طراحی و ساخت یک قطعه از آنتی بادی انسانی جهت هدف قرار دادن Hsp70 مد نظر قرار گرفت. در این پژوهش، به کمک جدیدترین تکنیک به نام نمایش فاژی یک قطعه آنتی بادی به نام G6A علیه Hsp70 از کتابخانه قطعات آنتی بادی کاملاً انسانی انتخاب و در میزبان باکتریایی بیان شد که پس از تخلیص، عملکرد آن توسط تکنیک هایی مانند وسترن بلات، فلورسنس میکروسکوپی و SPR مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج این مطالعه نشان می دهند که G6A ضمن بیان مناسب، عملکرد قابل قبولی نیز در شناسایی سلول های سرطانی دارد. بنابراین، این آنتیبادی می تواند بستر مناسبی جهت توسعه¬ی عوامل درمانی و تشخیصی علیه سرطان¬های بیان کننده ی Hsp70 فراهم کند که البته مستلزم مطالعات بیشتر می باشد. |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر جداسازی نواحی متغییر آنتی بادی تک زنجیری (scFv) علیه پروتیین شوک حرارتی 70 کیلو دالتونی (Hsp70) از کتابخانه آنتی بادی فاژمتن خبر سرطان از دلایل اصلی مرگ و میر در سراسر جهان است. درمان های رایج همانند شیمی درمانی و پرتودرمانی فاقد اختصاصیت و مداومت اثربخشی هستند. در واقع آنها تمایزی بین سلول های سرطانی و سلول های سالم بدن بیمار قائل نیستند. بنابراین به روشی نیاز است که با اختصاصیت بالا تنها سلولهای سرطانی را مورد هدف قرار دهد و همچنین با کاهش مرگ و میر ناشی از عوارض درمانی، بهبودی در طولانی مدت را فراهم سازد بدون اینکه سلول های سالم را از بین ببرد. مطالعات نشان داده اند که بیش از 50% تومورها پروتیین شوک حرارتی 70 کیلو دالتونی (Hsp70) را در سطح غشائ سلولی خود بیان می کنند. از آنجا که این پروتیین در سلول های سالم بیان نمی شود، از اینرو پروتیین Hsp70 یک هدف درمانی امیدوارکننده در سرطان های انسانی می باشد.
در این مطالعه آنتیبادی مونوکلونال جدیدی علیه پروتیین Hsp70 تولید شد که این آنتی بادی می تواند قابلیت ایمونوتراپی بالقوه در کاربردهای پاراکلینیکی و کلینیکی را داشته باشد. |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
