آنالیز همراهی سطح بیان miR-16 و miR-15 با پاسخ به درمان با استروئیدها در بیماران مبتلا به سندروم نفروتیک
Analysis of association between microRNA-16 and microRNA-15 expression levels with responses to steroid treatment in patients with nephrotic syndrome
مجریان: محمد رضا اردلان
خلاصه روش اجرا: سندرم نفروتیک (NS) یک بیماری کلیوی التهابی شایع است که با پروتئینوری تظاهر می یابد. گلوکوکورتیکوئیدها (GCs) مخصوصا پردنیزون یا پردنیزولون خط اول درمان بیماران NS محسوب میشود. با این حال، مقاومت به GC یک چالش اصلی برای درمان بیماران مبتلا به NS می باشد. با توجه به اینکه microRNA ها در تنظیم پاسخ دهی به درمان با GCs ها از طریق مکانیسم های مختلف نقش ایفا میکنند، هدف ما از این مطالعه بررسی سطح بیان microRNA-16 و microRNA-15در بیماران مبتلا به NS می باشد. در این طرح 40 نمونه خون از افرادی که قبلا با کمک تشخیص پزشک متخصص از طریق آزمایش خون، بیوپسی و ... بیماری فوکال سگمنتال گلومرواسکلوروزیس یا نفروپاتی غشایی در آنها دیده شده است، گرفته می شود. افراد بر اساس پاسخ به درمان در دو گروه پاسخ به درمان (بعنوان گروه کنترل) و مقاوم به درمان تقسیم خواهند شد. پس از نمونه گیری سلولهای خون محیطی با فایکول استخراج می گردد. از نمونه ها استخراج total RNA صورت گرفته و با استفاده از آنزیم ترانسکریپتاز، پرایمرهای استم لوپ ویژه، و رونویسی معکوس microRNA-16 and microRNA-15 تبدیل به cDNA می گردند. سپس بررسی نسخه های این RNA ها در سلول های خونی نمونه های مورد مطالعه با real-time PCR و به کمک primerهای اختصاصی صورت میگیرد. آنالیز نتایج با محاسبه فولد تغییرات RNA ها و روش های آماری صورت خواهد شد. ارتباط میزان بیان RNA ها با داده های کلینیکی بررسی خواهد شد و آنالیز همبستگی داده ها ی بدست آمده در بررسی پاسخ به درمان صورت می گیرد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 61888 |
| عنوان فارسی طرح | آنالیز همراهی سطح بیان miR-16 و miR-15 با پاسخ به درمان با استروئیدها در بیماران مبتلا به سندروم نفروتیک |
| عنوان لاتین طرح | Analysis of association between microRNA-16 and microRNA-15 expression levels with responses to steroid treatment in patients with nephrotic syndrome |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | غربالگری و پایش روند بیماریهای غیرواگیر با تاکید بر بیماریهای کلیوی |
| نوع مطالعه | بررسی مقطعی ( Cross Sectional) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | فلوشیپ |
| مدت اجرا - ماه | 15 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | بر اساس مطالعات اخیر microRNA بعنوان نشانگرهای تشخیصی و درمانی و همچنین به عنوان مارکرهای پاسخ به درمان می توانند نقش ایفا کنند. با توجه به اینکه بررسی این فاکتور اپی ژنتیک در بیماران کلیوی و در جمعیت ما تاکنون صورت نگرفته است، بررسی ارتباط یا عدم ارتباط این فاکتور با مقاومت به استروئید ضرورت دارد با اندازه گیری تغییرات بیان microRNAهای درگیر در انتقال و متابولیسم، می توان پی به وضعیت درمان در فرد برد. با تشخیص زود هنگام مقاومت بیمار به گلوکوکورتیکوئید ها و با شروع درمان مناسب در زمان مناسب می توان کمک شایانی به بیماران و کلینیک نمود. |
| اهداف اختصاصی | تعیین میزان بیان miR-16 و miR-15 در نمونه خون بیماران مبتلا به سندروم نفروتیک حساس و مقاوم به درمان با استروئیدها -تعیین ارتباط بین میزان بیان miR-16 و miR-15 و پیامدهای بالینی در بیماران مبتلا به سندروم نفروتیک حساس و مقاوم به درمان با استروئیدها |
| چکیده انگلیسی طرح | سندرم نفروتیک (NS) یک بیماری کلیوی التهابی شایع است که با پروتئینوری تظاهر می یابد. گلوکوکورتیکوئیدها (GCs) مخصوصا پردنیزون یا پردنیزولون خط اول درمان بیماران NS محسوب میشود. با این حال، مقاومت به GC یک چالش اصلی برای درمان بیماران مبتلا به NS می باشد. با توجه به اینکه microRNA ها در تنظیم پاسخ دهی به درمان با GCs ها از طریق مکانیسم های مختلف نقش ایفا میکنند، هدف ما از این مطالعه بررسی سطح بیان microRNA-16 و microRNA-15در بیماران مبتلا به NS می باشد. در این طرح 40 نمونه خون از افرادی که قبلا با کمک تشخیص پزشک متخصص از طریق آزمایش خون، بیوپسی و ... بیماری فوکال سگمنتال گلومرواسکلوروزیس یا نفروپاتی غشایی در آنها دیده شده است، گرفته می شود. افراد بر اساس پاسخ به درمان در دو گروه پاسخ به درمان (بعنوان گروه کنترل) و مقاوم به درمان تقسیم خواهند شد. پس از نمونه گیری سلولهای خون محیطی با فایکول استخراج می گردد. از نمونه ها استخراج total RNA صورت گرفته و با استفاده از آنزیم ترانسکریپتاز، پرایمرهای استم لوپ ویژه، و رونویسی معکوس microRNA-16 and microRNA-15 تبدیل به cDNA می گردند. سپس بررسی نسخه های این RNA ها در سلول های خونی نمونه های مورد مطالعه با real-time PCR و به کمک primerهای اختصاصی صورت میگیرد. آنالیز نتایج با محاسبه فولد تغییرات RNA ها و روش های آماری صورت خواهد شد. ارتباط میزان بیان RNA ها با داده های کلینیکی بررسی خواهد شد و آنالیز همبستگی داده ها ی بدست آمده |
| کلمات کلیدی | مقاومت به استروئیدها: بیمارانی که بعد استفاده از گلوکواستروئید بمدت ۸-۱۲ هفته، پروتئین اوری دارند بعنوان بیماران مقاوم به درمان در نظر گرفته میشوند. پاسخ به استروئید: بیمارانی که بعد ۸-۱۲ هفته درمان، پروتئین اوری آنها به زیر ۵۰۰ میلی گرم در روز (complete response to treatment) رسید یا پروتئین اوری آنها به ۵۰درصد (partial response to treatment) کاهش یافت بعنوان پاسخ دهنده به درمان در نظر گرفته میشوند. فوکال سگمنتال گلومرواسکلوروزیس (FSGS): یکی از مهم ترین بیماری های گلومرولی است و از شایع ترین علل سندروم نفروتیک به شمار میرود. این بیماری به صورت پیدایش اسکلروز در قسمت هایی از تعداد محدودی گلومرول تعریف میشود. miRNA: :microRNA به معنای ریبونوکلئیک اسیدهای کوچک غیر کد کننده پروتئین می باشد و اندازه آنها از بین 20-22 نوکلئوتید است که در داخل سلول وظیفه تغییر بیان mRNAها از طریق اتصال به آنها را بر عهده دارند. پیامدهای بالینی: اولین علامت سندرم نفروتیک در کودکان معمولا تورم چهره است. این با تورم کل بدن دنبال می شود. بزرگسالان می توانند با ادم وابسته حضور داشته باشند. ادرار کف آلود ممکن است یک ویژگی ارائه شود. یک عارضه ترومبوزی، مانند ترومبوز ورید عمقی ورید های ساق پا و یا حتی آمبول ریوی، ممکن است اولین نشانه سندرم نفروتیک باشد. سندرم نفروتیک می تواند خطر ابتلا به عفونت ها و لخته های خون را افزایش دهد. |
| ذینفعان نتایج طرح | کلیه بیمارانی که با استروئید درمان می شوند. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| محمد رضا اردلان | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| سپیده زنونی واحد | مشاور |
| شهرام غیاثوند | دانشجوی مالک پایان نامه |
| سیده مینا حجازیان | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر miR-15A-5p و miR-16-5p در تشخیص سندرم نفروتیک می توانند موثر باشند.متن خبر سندرم نفروتیک بیماری کلیوی شایع همراه با پروتئینوری است و گلوکوکورتیکوئیدها برای درمان این بیماران بکار می رود. به علاوه، microRNAها مولکولهای کوچک غیر کد شونده ای هستند که در تنظیم بیان ژن در سطح رونویسی یا ترجمه دخالت می کنند. هدف این مطالعه بررسی سطح بیان miR-16-5p و miR-15a-5p در خون محیطی 60 نفر از بیماران مبتلا به سندروم نفروتیک اولیه و مقایسه با افراد سالم در کنار آنالیز in-silico بود. نتایج نشان داد افزایش معنی داری در سطح بیان miR-15a-5p در خون محیطی گروه های سندرم نفروتیک، ممبرانوس گلرومرولونفریتیس و گلومرولواسکلروزیس کانونی در مقایسه با افراد سالم وجود دارد. به علاوه، سطوح بیانی miR-16-5p در بیماران سندرم نفروتیک و گلومرولواسکلروزیس کانونی بطور قابل توجهی نسبت به گروه کنترل کاهش یافت. هرچند که برای تعیین ارزشهای تشخیصی این microRNAها مطالعات بیشتری باید انجام شود. آنالیز in-silico ثابت کرد که miR-16-5p و miR-15a-5p ممکن است از طریق چرخه سلولی و ژن p53 روی بیماران NS اثر گذار باشند. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
