طراحی رزین کروماتوگرافی IMAC برای خالص سازی آنتی بادی scFv تولید شده در باکتری E.coli
Design of IMAC chromatography resin for purification of the scFv antibodies
مجریان: یداله امیدی
خلاصه روش اجرا: در تحقیق حاضر آنتی بادی scFv با جرم مولکولی حدود 30kDa که در باکتری E. coli بیان و استخراج شده است مورد استفاده واقع شده و با انجام عملیات پیش تصفیه آماده فرآیند کروماتوگرافی می گردد. برای انجام فرآیند کروماتوگرافی نیاز به طراحی و ساخت رزین مورد نظر وجود دارد که مراحل به شرح زیر می باشند: الف) طراحی و سنتز زئولیت های مناسب برای انجام عملیات تبادل کاتیونی ب) انتخاب زئولیت مناسب با قابلیت تبادل کاتیونی مناسب ج) تثبیت یون نیکل بر روی زئولیت های مورد نظر برای ساخت رزین IMAC (Immobilized Metal Affinity Chromatography) د) انجام فرآیند کروماتوگرافی توسط رزین های طراحی شده ه) انتخاب شرایط بهینه برای انجام عملیات جذب و واجذب آنتی بادی scFv برای انجام بهینه سازی در فرآیندهای مورد نظر، از طراحی آزمایش¬های آماری و نرم افزار های مرتبط بهره برده خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 61607 |
| عنوان فارسی طرح | طراحی رزین کروماتوگرافی IMAC برای خالص سازی آنتی بادی scFv تولید شده در باکتری E.coli |
| عنوان لاتین طرح | Design of IMAC chromatography resin for purification of the scFv antibodies |
| نوع طرح | طرح تحقیقاتی |
| اولویت طرح | فناوریها و تجهیزات پزشکی بازساختی و نانوفناوری |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 9 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | امروزه آنتی بادی های مونوکلونال به عنوان یکی از داروهای مهم در صنایع زیست دارویی شناخته شده و قریب به 40 داروی آنتی بادی مونوکلونال دارای تأیید FDA می باشند. افزایش قابل ملاحظه در مقدار تولیدی سیستم های کشت سلولی باعث افزایش حجم خوراک بخش خالص سازی شده و تکنولوژی خالص سازی را مجبور به پیشرفت و نوآوری نموده است به عبارتی حتی موفق ترین روش خالص سازی IgG نیز در امان نبوده و جایگزین سازی روش های بهتر مورد نظر قرار گرفته است. در حال حاضر آنتی بادی های scFv به عنوان یکی از ابزارهای درمانی مهم برای انسان محسوب می شوند. این مولکول ها دارای عملکرد مشابه با آنتی بادی های کامل بوده و به تبع آن کاربرد های وسیعی در زمینه های پزشکی، دارویی و تحقیقاتی دارند. تاکنون استفاده از زئولیت سنتزی و اصلاح سطح شده و به عبارتی نانو زئولیت کروی میکرونی که دارای عملکرد اختصاصی برای خالص سازی آنتی بادی های scFv با دنباله هیستیدینی باشد در ایران وجهان گزارش نشده است. |
| اهداف اختصاصی | ارزیابی و طراحی زئولیت های مختلف برای تبادل کاتیونی - شناسایی پارامترهای فیزیکی و شیمیایی تأثیرگذار -طراحی رزین کروماتوگرافی IMAC -بررسی پارامترهای مؤثر بر فرآیند های جذب و واجذب آنتی بادی scFv بر روی رزین IMAC |
| چکیده انگلیسی طرح | In the present study, scFv antibody with a molecular mass of about 30kDa, which is expressed and extracted in E. coli bacteria, is used and prepared for the chromatography process by performing pre-purification. To perform the chromatography process, there is a need to design and manufacture the desired resin, the steps of which are as follows: a) Design and synthesis of suitable zeolites for cation exchange operation b) Selection of suitable zeolite with suitable cation exchange capability c) Immobilization of nickel ions on the desired zeolites for the manufacture of IMAC resin (Immobilized Metal Affinity Chromatography) d) Carrying out the chromatography process using the designed resins e) Selection of optimal conditions for the adsorption and desorption of scFv antibody |
| کلمات کلیدی | فرآیند خالص سازی: فرآیندی است که شامل مراحل استخراج و زلال سازی، پیش تصفیه، خالص سازی میانی و خالص سازی نهایی می باشد. scFv: آنتی بادی قطعات مناطق متغیر تک زنجیره ای، فقط از نواحی متغیر زنجیره های سنگین و سبک ملکول های ایمونو گلوبولین تشکیل شده است که بوسیله یک رابط پپتیدی پانزده اسیدآمینه ای به همدیگر متصل گردیده اند. کروماتوگرافی افینیتی فلزی (IMAC): یکی از روش های کروماتوگرافی برای خالص سازی میانی پروتئین ها می باشد که بر اساس تمایل دنباله هیستیدینی در ساختار پروتئین ها به فلز واسطه تثبیت شده بر روی بستر عمل می کند. |
| ذینفعان نتایج طرح | دستاوردهای این طرح می تواند در صنایع داروهای نوترکیب و سایر صنایع تولیدی پروتئینی مورد استفاده قرار گیرد |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| یداله امیدی | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
| ژاله برار | همکار اصلی |
| علی مسگری شادی | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر رزین کروماتوگرافی IMAC بر پایه زئولیت برای خالص سازی پروتئین های نوترکیب تهیه گردیدمتن خبر با توجه به اینکه روشهای کروماتوگرافی جزء مراحل اساسی فرآیندهای خالص سازی پروتئین های دارویی محسوب میشوند تحقیقات متعددی برای ارتقاء رزین های تجاری موجود در حال انجام هست. لذا در این طرح، طراحی و ساخت رزین IMAC برای خالص سازی پروتئین های نوترکیب با موفقیت انجام گردید. همچنین این رزین برای خالص سازی آنتی بادی scFv مورد آزمایش قرار گرفت که نتیجه این خالص سازی درجه خلوص بالای 90 درصد را نشان داد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
