بررسی اثر نانوذرات SPION کونژوگه با کایتوزان تیوله و پپتید در رده سلولی سرطانی 4T1 در محیط invitro
The effect of SPIONs nanoparticles conjugated Thiolated chitosan and peptide in breast cancer cell line(4T1), in vitro
مجریان: فرناز حاجی زاده
خلاصه روش اجرا: این مطالعه دو فاز دارد: 1-تولید نانوذرات بارگیری شده : ابتدا spion و کیتوزان تیوله را با هم مجاور می کنیم تا ترکیب spion –کایتوزان تیوله تولید شود و سپس با اضافه کردن پپتید واکنش بین گروه تیول پلی مر و گروه تیول انتهایی پپتید صورت می گیرد.نانوذرات spion توانایی بالایی برای کپسوله کردن siRNA و حفاظت از آن در برابر تخریب سرمی دارد.بعد از اینکه نانوذرات شکل گرفتند بارگذاری siRNA در نانوذرات با استفاده از واکنش polyelectrolyte complexation صورت می گیرد. تولید کمپلکس نانوذرات-siRNA با ژل اکتروفورز در ژل 2% آگارز تایید می شود و میزان بارگیریsiRNA به صورت کمی بوسیله روش اولتراسانتریفیوژ بررسی خواهد شد. ضمن اینکه ویژگی های فیزیکوشیمیایی نانوذرات نظیر اندازه، پتانسیل زتا و مقاومت در برابر سرم نیز بررسی خواهد شد. علاوه براین برای بررسی ورود نانوذرات به سلول از روش کونفوکال میکروسکوپی استفاده خواهد شد. ۲. مطالعه in vitro اثر بخشی نانو ذرات تهیه شده : از رده سلولی سرطانی 4T1 (سرطان پستان) در این مطالعه استفاده خواهد شد. ضمن اینکه از siRNAضد مولکول CD73 به عنوان الیگونوکلئوتیدی که در این نانوذرات بارگیری می شود استفاده خواهد شد که مطالعات گذشته بیانCD73 توسط این رده سلولی را اثبات کرده است. این رده سلولی در محیط RPMI1640حاوی 10%fetal bovine serum و آنتی بیوتیک کشت داده می شوند.پس از گذشت ۲۴ ساعت از کشت سلولی نانوذرات حاوی siRNA را به محیط کشت هر رده سلولی اضافه می کنیم. .میزان سمیت نانوذرات حاویsiRNA بر روی حیات سلولی نیز توسط آزمون MTT ارزیابی می شود. ضمن اینکه توانایی siRNAبارگیری شده بوسیله نانوذرات بر روی بیان ژن CD73 بوسیله آزمون Real-time PCR ارزیابی می شود.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 61596 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثر نانوذرات SPION کونژوگه با کایتوزان تیوله و پپتید در رده سلولی سرطانی 4T1 در محیط invitro |
| عنوان لاتین طرح | The effect of SPIONs nanoparticles conjugated Thiolated chitosan and peptide in breast cancer cell line(4T1), in vitro |
| نوع طرح | طرح تحقیقاتی |
| اولویت طرح | سیستم های نوین دارورسانی |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | کارشناسی ارشد |
| مدت اجرا - ماه | 14 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | به خاطر ویژگی های خاص محیط تومور و آنژیوژنز سلول های توموری , می توان یک سیستم دارورسانی طراحی کرد که به طور اختصاصی سلول های توموری را مورد هدف قرار دهد. بیشتر داروهای شیمی درمانی رایج دارای سمیت هستند و اثرات جانبی زیادی دارند .بنابراین توسعه سیستم های دارورسانی که قادر باشد محل تومور را مورد هدف قرار دهد, یک چالش جدی است.نانوذرات می توانند به صورت غیرفعال از طریق منافذی که در رگ های اطراف بافت توموری وجود دارد وارد محیط تومور شوند همچنین نانوذرات می توانند حاوی لیگاند هایی باشند که به رسپتورهای سطح سلول های توموری متصل شوند و به صورت فعال وارد محیط تومور شوند. در این مطالعه ما از نانوذرات SPION استفاده می کنیم که این ها تنها نانوذرات اکسید فلزی هستند که استفاده از آنها در پزشکی تایید شده است. Spion ها قادر هستند ویژگی های فیزیکی و شیمیایی ذره را کنترل کنند و در تشخیص بیماری های التهابی و هدف قرار دادن مارکرهای سطحی سلول های توموی کاربرد دارد.در این مطالعه این نانوذرات برای اولین بار به همراه کایتوزان تیوله و پپتید تولید خواهد شد چرا که ترکیب این ها در کنار هم می تواند روشی هدفمند برای استفاده در ریزمحیط تومور باشد و با دوز کم بیشترین تاثیر را داشته باشد. |
| اهداف اختصاصی | تولید نانو ذرات spion حاوی siRNA - مطالعه میزان سمیت نانوذرات بر روی بقای سلول های سرطانی با روش MTT -مطالعات invitro میزان جذب نانوذرات spion بارگیری شده با siRNA توسط سلول های سرطانی -بررسی تاثیر نانوذرات SPION بارگیری شده با siRNA بر روی بیان مولکول CD73 |
| چکیده انگلیسی طرح | Due to the specific characteristics of the tumor environment and angiogenesis of tumor cells, it is possible to design a drug delivery system that specifically targets tumor cells. Most of the current chemotherapy drugs are toxic and have many side effects. Therefore, developing drug delivery systems that are able to target the tumor site is a serious challenge. |
| کلمات کلیدی | : siRNA RNAمداخله گر (RNAi) اصطلاح کلی است که به تکنولوژی خاموشی پس از رونویسی توسط RNA دو رشته ای اطلاق می گردد.در تکنولوژی RNA مداخله گر (RNAi) ، رشته مکمل mRNA ژن مورد نظر ساخته شده و این رشته به mRNA ژن هدف متصل و یک توالی دورشته ای (dsRNA) را بوجودمی آورد. از آنجا که سیستم سنتز پروتئین قادر به ترجمه mRNA دو رشته ای نمی باشد، بیان ژن هدف متوقف و اصطلاحاً ژن خاموش می شود. Spion: ذرات اکسید آهن هستند که سایز آنها در حدود 1-100 نانومتر است.این نانوذرات قادر هستند ویژگی های فیزیکی و شیمیایی نانوذره را کنترل کنند .درتشخیص بیمار های التهابی و هدف قرار دادن مارکرهای سطحی سلول های توموری کاربرد دارند کیتوزان: کیتوزان یک آمینو پلی ساکارید خطی و ترکیبی از پیوند های (۴→۱ β) واحدهای D-گلوکزآمین وN-استیل -D-گلوکزآمین است. کیتوزان توسط داستیلاسیون کیتین ( پلی ساکارید طبیعی و فراوان موجود در اسکلت خارجی سخت پوستانی همچون خرچنگ و میگو)، تهیه می شود. این پلی ساکارید کاتیونی به دلیل دسترس پذیری فراوان، چسبندگی بی نظیر، خواص دارویی مناسب و دیگرخواص سودمند بیولوژیکی مثل زیست سازگاری، زیست تخریب پذیری، عدم سمیت و تحریک کم سیستم ایمنی، در موارد بیوپزشکی و دارویی مورد توجه گسترده قرارگرفته است. Cd73: یک پروتئین غشای پلاسمایی است که در بسیاری از سرطان ها افزایش بیان می یابد.نوکلئوتید خارج سلول ((AMP را به آدنوزین تبدیل می کند. که آدنوزین نقش مهمی در مکانیسم های سرکوب سیستم ایمنی در محیط تومور ایفا می کند. . |
| ذینفعان نتایج طرح | سرطان در کشور ما از مهم ترین معضلات سلامت عمومی استوبیماران سرطانی ذینفعات اصلی نتایج این طرح خواهند بود |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| فرناز حاجی زاده | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
| فرهاد جدیدی نیارق | مجری دانشجویی(کمیته تحقیقات دانشجویی) |
| علی رستگاری | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر مهار عملکرد CD73 با نانوذرات اکسید آهن باعث کاهش تکثیر و گسترش سلول های سرطانی در محیط آزمایشگاهی گردید.متن خبر کمبود اکسیژن در محیط تومور با بیان فاکتور القا کننده هیپوکسی همراه است که می تواند منجر به افزایش بیان بسیاری از عوامل تحریک کننده سرطان شود. آدنوزین یک فاکتور سرکوبگر ایمنی مهم است که می تواند هم به وسیله سلول های توموری و هم سلول های ایمنی ترشح شود. محیط هیپوکسیک و بیان بیش از حد CD73 با تغییر متابولیسم، تکثیر سلولهای سرطانی و گسترش عروق تومور همراه است. در مطالعه پیش رو ما نانوذرات اکسید اهن پوشیده شده از کایتوزان تیوله و تری متیل کایتوزان را برای انتقال هدفمند siRNA اختصاصی HIF-1 و CD73 تولید کرده ایم. خصوصیات فیزیکو شیمیایی مناسب نانوذرات و رها سازی کنترل شده ی siRNA موجب شده که این نانوذرات عامل ایده آلی در ژن درمانی باشد. نانوذرات بارگیری شده با siRNA به طور چشم گیری محور HIF-1 / CD73 را مهار کردند که این مهار توام با سرکوب تکثیر، توانایی ایجاد کلنی، مهاجرت و رگزایی در سلول های سرطانی بود. نانوذارت اکسید آهن بارگذاری شده با siRNA می توانند برای طیف گسترده ای از تومورها به منظور تحویل siRNA ها استفاده شوند. علاوه بر این، سرکوب محور HIF-1α می تواند به عنوان یک استراتژی مؤثر برای جلوگیری از پیشرفت سرطان در نظر گرفته شود. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
