اثر افزودن نانوذرات اکسید تیتانیوم برخصوصیات ضد میکروبی سرامیکهای فلدسپاتیک

مجریان: رودابه کودریان

خلاصه روش اجرا: در پروتزهای تمام سرامیکی سطوح کمتری از تجمع باکتریهای دهانی مشاهده می شود اما پوسیدگی ثانویه هنوز یکی از دلایل شکست کراون های تمام سرامیک می باشد. بنابراین اگر سرامیک خصوصیت ضد باکتری داشته باشد می تواند مانع از ادهیژن و پرولیفراسیون پاتوژنها در طولانی مدت شود. نمونه ها بر اساس روش افزودن ذرات نانو به سه گروه ( 1-افزودن به پودر پرسلن و 2- افزودن به مایع گلیز) و 3- گروه بدون تغییر( n=10) تقسیم خواهند شد. در گروه اول پودر نانوذرات تیتانیوم (Titanium(IV) oxide, nanopowder <25 nm particle size, 99.7% trace metals basis , Sigma-Aldrich Chemie GmbH, Germany) به نسبت وزنی 5% ، 10%، 15% وزنی به پودرپرسلنفلدسپاتیک(A3.5B vintage MP, Shofu) افزوده می شود. 30 عدد دیسک پرسلنی (10 نمونه برای هر نسبت وزنی) با قطر 6 و ضخامت 5 میلیمتر تهیه و در کوره (Vita Vacumat 6000, Zahnfabrik, Germany)، طبق دستور کارخانه سازنده پخته خواهند شود. گلیز کردن نمونه ها به صورت مرحله ای جداگانه انجام خواهد شد. یک لایه مواد گلیز(30µl) با قلم مو بر روی سطح نمونه اعمال و طبق دستور سازننده گلیز خواهند شد. درگروه دوم ، پودر نانوذرات تیتانیوم به نسبت وزنی 5% ، 10%، 15% وزنیبه پودرگلیز افزوده می شود. مایع گلیز اضافه شده و سپس30µl از هر کدام از محلولها با کمک قلم مو به سطح نمونه ها آغشته می شود برای بررسی اثرات ضد میکروبی ذرات تیتانیوم از Staphylococcus aureus (NBRC122135) ، Streptococcus mutants (MT8148)، Escherichia coli( NBRC3972) و Aggregatibacter actinomycetemcomitans(ATCC33384) استفاده خواهد شد. هر سوش بر اساس پیش نیازهای خاص خود کشت خواهد شد. دانسیته اپتیکال محلول باکتریها تا رسیدن به غلظت(CFU)/mL 0.4- 3 × 108 با کمک اسپکترومتر ماورای بنفش مرئی (UV-vis, V-550, JASCO, Tokyo, Japan ) اندازه گیری می شود. روی سطح تمامی نمونه ها با محلول باکتریها آغشته شده و در دمای 37 درجه به مدت 24 ساعت انکوبه می شوند. باکتریها از نمونه های انکوبه شده جمع آوری ، رقیق و در پلیتهای تغذیه آگار قرار می گیرد و به مدت یک شب در دمای 37 درجه انکوبه می شود. تعداد سلولهای زنده با شمردن تعداد کلونی ها و فعالیت ضد میکروبی بر اساس استاندارد ISO 22196:2007 تعیین خواهد شد. حلالیت ذرات نانو تیتانیوم برای تسریع شستشوی ذرات نانو تیتانیوم ، PH بزاق مصنوعی با افزودن اسید لاکتیک در 2 تنظیم می شود. تمامی نمونه ها در محلول 1ml بزاق مصنوعی و در تیوبهای بسته در دمای 37 درجه به مدت 1 ، 7، 14 ، 21 و28 روزنگهداری می شوند. مقدار تیتانیوم آزاد شده با کمکcoupled plasma atomic emission spectrometry (ICP-AES, ICPS-7000 ver.2, Shimadzu Corp., Kyoto, Japan). اندازه گیری می شود.آنالیز آماری با کمک تست Mann–Whitney U test و Bonferroni corrections برای توزیع اندازه ذرات انجام خواهد شد. مقادیر P کمتر از 5/0 از نظر آماری معنادار تلقی می شود.