بررسی اثر بتا-لاپاکون بر نفروتوکسیسیتی ناشی از داروی دوکسوروبیسین در موش های نر C57BL/6از طریق مسیرهای سیگنالینگ NAD+-AMPK-NFkB/ iNOS-ERK1
Assessment of the effect of β-lapachonea gainst doxorubicin-induced nephrotoxicity in male C57BL/6 mice through NAD+-AMPK-NFkB/ iNOS-ERK1 signaling pathways
مجریان: مهران مسگری عباسی
خلاصه روش اجرا: 42 موش (mouse) نر از نژاد C57BL/6 دو تا چهار ماهه و با وزن 22- 18 گرم که در شرایط یکسانی از دما (22-20) ، رطوبت (% 5 ± 50) ، محیط عاری از پاتوژن و سیکل h 12/12 روز/ شب نگه داری می شوند را به 6 گروه 7 تایی تقسیم می کنیم :1-گروه شم 2-گروه دوکسوروبیسین mg/kg20 3-گروه (β-lapachone(mg/kg5 4-گروه دوکسوروبیسین(mg/kg20) + بتا-لاپاکون با دوز پایین(mg/kg 1/25) 5- گروه دوکسوروبیسین (mg/kg 20) + بتا-لاپاکون با دوز متوسط (mg/kg 2/5) 6- گروه دوکسوروبیسین(mg/kg20)+ بتا-لاپاکون با دوز بالا(mg/kg 5). البته شایان به ذکر است که موش ها طبق رژیم استاندارد، آب و غذا داده خواهند شد و به منظور جلوگیری از خطر ریزش نمونه ها ما با احتمال در نظر گرفتن مرگ و میر 15 درصدی، 48 موش نر از نژاد C57BL/6 را مورد آزمایش قرار خواهیم داد. در یک روز داروی β-lapachone در 3 دوز mg/kgBW 1/25 و mg/kgBW 2/5 و mg/kgBW5 به صورت خوراکی (oral) داده می شود و بعد از 24 ساعت، یک دوز mg/kg 20 وزن موش داروی دوکسوروبیسین به صورت داخل صفاقی (I.P) تزریق می شود و بعد به مدت 4 روز دیگر β-lapachone در 3 دوزBW mg/kg 1/25 و mg/kgBW 2/5 وBW mg/kg5 وزن موش داده می شود. بعد از گذشت 4 روز از تزریق داخل صفاقی دوکسوروبیسین، موش ها بیهوش شده و از موش ها خون گیری کرده و سرم آن ها با سانتریفیوژ جدا شده و در فریزر 70- به منظور انجام تست های بیوشیمیایی (عملکردی کلیوی) تا روز آزمایش نگه داری می شوند و بعد از خون گیری بلافاصله بافت کلیوی آن ها جهت بررسی های بافتی و مولکولی و پروتئینی برداشته می شود. برای آنالیز نتایج بدست آمده از نرم افزار SPSS و برای بررسی تفاوت بین میانگین داده ها در گروه ها از آزمون آماری one way ANOVA استفاده خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 61298 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثر بتا-لاپاکون بر نفروتوکسیسیتی ناشی از داروی دوکسوروبیسین در موش های نر C57BL/6از طریق مسیرهای سیگنالینگ NAD+-AMPK-NFkB/ iNOS-ERK1 |
| عنوان لاتین طرح | Assessment of the effect of β-lapachonea gainst doxorubicin-induced nephrotoxicity in male C57BL/6 mice through NAD+-AMPK-NFkB/ iNOS-ERK1 signaling pathways |
| نوع طرح | گرنت پژوهشی |
| اولویت طرح | اپیدمیولوژی، پیشگیری، تشخیص زودهنگام، درمان و بازتوانی در سرطانهای شایع |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 6 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | داروی دوکسوروبیسین که در درمان سرطان های مختلف تجویز می شود دارای عوارض جانبی از جمله نفروتوکسیسیتی می باشد و از طریق القای التهاب و آپوپتوز باعث ایجاد توکسیسیتی می شود. به طور کلی یکی از رویکردهای مقابله با اثرات توکسیسیتی این دارو، استفاده از ترکیبات ضدالتهابی مختلف است. که در این تحقیق ما از یک ترکیب کینین به نام β-lapachone استفاده خواهیم کرد، چرا که AMPK به عنوان سنسور مهم انرژی سلول است که با افزایش نسبت NAD+/NADH فعال می شود و می تواند از طریق کاهش مسیر سیگنالینگ NFκB و iNOS/ERK1/2 منجر به کاهش التهاب و آپوپتوز شود. با توجه به اثبات اثر β-lapachone به واسطه ی افزایش نسبت NAD+/NADH روی AMPK، تصور می شود که بتوانیم با این ترکیب، نفروتوکسیسیتی دوکسوروبیسین را تقلیل دهیم، بنابراین هدف از این مطالعه کاهش نفروتوکسیسیتی ناشی از دوکسوروبیسین توسط β-lapachone و پی بردن به مسیر سیگنالینگ این ترکیب است. |
| اهداف اختصاصی | تعیین اثر بتا-لاپاکون در برابر نفروتوکسیسیتی ناشی از داروی دوکسوروبیسین بر مسیر پیام رسانی NFkB(شامل بیان ژن های IL-6, IL-1beta, TNF-alpha) در موش های نر نژاد C57BL/6 -تعیین اثر –lapachoneβ در برابر نفروتوکسیسیتی ناشی از داروی دوکسوروبیسین بر مسیر پیام رسانی Caspase-3/iNOS/ERK1-2 در موش های نر نژاد C57BL/6 -تعیین اثر بتا-لاپاکون در برابر نفروتوکسیسیتی ناشی از داروی دوکسوروبیسین بر آسیب میکروسکوپی، تست های عملکردی بافت کلیوی و نسبتNAD+/NADH سلولی در موش های نر نژاد C57BL/6 |
| چکیده انگلیسی طرح | 42 male C57BL/6 mice, aged two to four months and weighing 18-22 g, were kept under the same conditions of temperature (20-22), humidity (50 ± 5%), pathogen-free environment and 12/12 h day/night cycle and were divided into 6 groups of 7: 1-Sham group 2-Doxorubicin group mg/kg20 3-β-lapachone group (mg/kg5) 4-Doxorubicin group (mg/kg20) + low dose β-lapachone (mg/kg1.25) 5-Doxorubicin group (mg/kg20) + medium dose β-lapachone (mg/kg2.5) 6-Doxorubicin group (mg/kg20) + high dose β-lapachone (mg/kg5). |
| کلمات کلیدی | دوکسوروبیسین: دوکسوروبیسین (DOX) یک آنتراسایکلین ضد سرطان است و اولین بار در سال 1960 از باکتری Streptomyces Peucetius جدا شد. دوکسوروبیسین یکی از داروهای سایتوتوکسیکی است که به طور گسترده بر علیه تومورهای جامد (تخمدان، پستان و سیستم گوارشی) و بدخیمی های هماتولوژیک (لنفوما و لوسمی کودکان) تجویز می شود. (SIRT-1: SIRT-1 (Sirtuin-1 هیدرولیز NAD+ را با داستیلاسیون پروتئین همراه می کند و یک عضو از خانواده ی هیستون داستیلاز است که ترمیم DNA و رونویسی ژن را تنظیم می کند و یک داستیلاز وابسته به NAD+ است که گروه های استیل را از اسیدآمینه های لیزین تغییر یافته در هیستون ها و فاکتورهای رونویسی برمی دارد. مسیر سیگنالینگ NF-κB: یکی از مسیر های سیگنالینگ داخل سلولی می باشد که در صورت فعال شدن سلول را به سمت آپوپتوزیس پیش می برد. بنابراین در درمان سلول های سرطانی ما تمایل به فعال کردن این مسیر سیگنالینگ داشته و برای جلوگیری از اثرات جانبی این دارو بر روی سلول های سالم ما تمایل به کاهش فعالیت این مسیر و متعاقبا کاهش آپوپتوزیس داریم. در این مسیر دو ساب یونیت P65 و P50 وجود دارند که P65 در سیتوپلاسم به پروتئین مهاری خود (IκB) متصل می شود و مانع انتقال آن به داخل هسته می شود. ولی در صورت جدا شدن از مهار کننده خود, P65 وارد هسته می شود و بیان ژن های آپوپتوزی و التهابی را افزایش می دهد. LKB1: نوعی AMPKK (AMP-activated protein kinase kinase) بوده که با داستیلاسیون توسط SIRT-1 فعال شده و منجر به فسفریلاسیون AMPK و فعال شدن مسیر سیگنالینگ AMPK می شود. (AMPK: AMPK (AMP-activated protein kinase یک سنسور مهم انرژی از متابولیسم سلولی در پاسخ به استرس متابولیک مانند کمبود گلوکز، استرس اکسیداتیو و التهاب است و AMPK شامل 3 زیرواحد هتروژن است (α، β و Ү). که یک تنظیم کننده ی اصلی از متابولیسم انرژی است و بر اثر فسفریلاسیون زیرواحد α در محل اسیدآمینه ی ترئونین 172 (Thr 172) فعال می شود. lapachone-β: یک ترکیب کینین طبیعی است که از پوست درخت های lapacho آمریکای جنوبی جدا می شود و عصاره ی آن برای قرن هاست که استفاده ی پزشکی دارد. ترکیب β-LAP تعدادی از عملکرد های فارماکولوژیکال از جمله فعالیت های ضد التهابی را اعمال می کند. |
| ذینفعان نتایج طرح | چنانچه β-lapachone از نظر خاصیت آنتی اکسیدانتی، ضد التهابی و مهار تولید اکسیدانت ها موثر باشد، می توان با تحقیقات بیشتر از این ترکیب به عنوان یک داروی ضد التهابی و آنتی اکسیدانتی موثر در برابر نفروتوکسیسیتی ناشی از دوکسوروبیسین استفاده کرد. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| مهران مسگری عباسی | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
| لیلا روشنگر | همکار اصلی |
| سعید نظری سلطان احمد | همکار اصلی |
| اشکان کلانتری چروده | همکار اصلی |
| داود ثناجو | همکار اصلی |
| فاطمه اسکندری | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر ماده بتا-لاپاکون می تواند موجب حفاظت نسبی کلیه در مقابل سمیت حاصل از داروی دوکسوروبیسین گردد.متن خبر ماده بتا-لاپاکون که یک ترکیب کینین طبیعی است، از پوست درخت لاپاکو در آمریکای جنوبی جدا می شود و عصاره ی آن برای قرن هاست که استفاده ی پزشکی دارد. این ماده می تواند از طریق حفاظت از ساختار کلیه و تاثیر بر روی برخی مواد سلولی موجب حفاظت نسبی از کلیه در مقابل سمیت داروی دوکسوروبیسین گردد. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر ماده بتا-لاپاکون می تواند از طریق تاثیر بر NAD /AMPK/NF-kB موجب حفاظت نسبی کلیه در مقابل سمیت حاصل از داروی دوکسوروبیسین گردد.متن خبر ماده بتا-لاپاکون می تواند از طریق افزایش نسبت NAD /NADH ، فعال سازی مسیر سیگنالینگ AMPK و کاهش تنظیم کننده های التهاب و آپوپتوز (NF-κB و c-caspase-3) موجب حفاظت نسبی کلیه در مقابل سمیت حاصل از داروی دوکسوروبیسین گردد. ماده مذکور موجب کاهش نسبی پارامترهای بیوشیمیایی مرتبط با کلیه مانند اوره، کراتی نین و سیستئین A و حفظ ساختار بافتی کلیه در مقابل سمیت حاصل از داروی دوکسوروبیسین می شود. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
