بررسی اثرترکیبی جایگزینی miR-200c و داروی cisplatin در القای آپوپتوز و مهار مهاجرت سلول های سرطان معده
The combined effect of miR-200c replacemet , cisplatin on apoptosis induction and inhibition gastric cancer cell line migration
مجریان: بهزاد برادران
خلاصه روش اجرا: سرطان معده یکی از شایع ترین و مهمترین سرطان های جهان می باشد که منجر به مرگ می گردد. از عوامل موثر در ایجاد این نوع سرطان، عوامل ژنتیکی، اپی ژنتیکی، میکرو RNA و عوامل محیطی از جمله افزایش سن، سبک زندگی و ... می باشد. میکرو RNAها، گروه کوچکی از RNAهای غیرکدکننده و تک رشته ای هستند که 18 تا24 نوکلئوتید طول دارند و در تنظیم بیان ژن پس از رونویسی نقش مهمی را ایفا می کنند. میکروRNAها به دو دسته ی مهارکننده تومور و انکوژن تقسیم بندی می شوند. از جمله میکروRNAها که در سرطان معده نقش دارد، miRNA-200c می باشد که دچار کاهش بیان می گردد. miRNA-200c که در مهاجرت و تکثیر سلول های سرطانی نقش دارد، روی ژن های MMP9,VEGF FAP-1 و RhoE تاثیر می گذارد و در نتیجه ی کاهش بیان این miRNA، این ژن(FAP-1 , RhoE MMP9,VEGF ( دچار اختلال می گردد. امروزه از میان روش های درمانی مختلفی که برای سرطان بکار گرفته می شود، استفاده ازmiRNA Replacement Therapy است که با این روش، میزان بیان این miRNA را به سطح نرمال برگردانیم. برای این منظور، ابتدا سلولهای سرطانی معده در محیط کشت RPMI حاوی FCS 10% در دمای 37ₒc و CO2 5% کشت داده میشود. سپس ژن miR-200c به محیط کشت اضافه میگرددو انکوباسیون انجام میگیرد. بعد از گذشت زمان لازم، میزان بیان miR-200c و ژنهای هدف آن به وسیله qRT-PCR اندازهگیری میشود. مهاجرت و میزان تکثیر سلولهای سرطانی توسط تکنیک Wound healing assay وMTT مورد بررسی قرار میگیرد. بعد از انتقال miR-200c و گذشت مدت زمان لازم، محیط کشت با محیط کشت حاوی MTT تعویض میشود و بعد از 4 ساعت انکوباسیون، توسط دستگاه ELISA Plate Reader جذب نوری در طول موج 570nm قرائت میشود. بعد از انتقال miR-200c، مهاجرت سلول های سرطانی به وسیله آزمایش invitro scratch Assay بررسی میگردد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا در دانشکده/مرکز |
| کد طرح | 61058 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثرترکیبی جایگزینی miR-200c و داروی cisplatin در القای آپوپتوز و مهار مهاجرت سلول های سرطان معده |
| عنوان لاتین طرح | The combined effect of miR-200c replacemet , cisplatin on apoptosis induction and inhibition gastric cancer cell line migration |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | --- غیر اولویت دار (جزو اولویت های دانشگاه نمی باشد) |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | کارشناسی ارشد |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | به علت عدم وجود علائم بالینی اختصاصی در مراحل اولیه سرطان معده، در اغلب مواقع تشخیص به موقع آن میسر نمی باشد، احتمال بقای پنج ساله افراد مبتلا در مراحل اولیه سرطان 32 % می باشد. بیماری هنگامی تشخیص داده می شود که وارد مراحل پیشرفته و غیر قابل درمان شده است وحتی بعد از عمل جراحی نیز در اثر عود مجدد بیماری، میانگین بقاء بیماران 2 - 3 ماه می باشد. در سال های اخیر، در تشخیص و درمان سرطان معده پیشرفت های چشمگیری صورت گرفته است. از روش هایی که برای درمان این سرطان بکار می رود می توان به شیمی درمانی، جراحی، رادیوتراپی و ایمونوتراپی اشاره کرد اما این روش ها معایبی داشته و صد در صد موفقیت آمیز نمی باشند. از معایب این درمان ها عود مجدد بیماری، سایتوتوکسیک بودن روی سلول های غیر سرطانی، هزینه بالای درمان و عوارض جانبی آنهاست، به همین دلیل اخیرا محققین روش های مختلفی را برای درمان سرطان معده پیشنهاد نموده اند که یکی از این روش ها استفاده ازmicroRNA هاست.لذا در صورت موفقیت آمیز بودن این تکنیک، می توان miR-200c را به عنوان یک هدف درمانی مهم جهت درمان سرطان معده با ساخت drug Target miRNA ، به عنوان تکنولوژی امیدوارکننده برای تولیدات دارویی حال و آینده پیشنهاد کرد، و حتی استفاده ترکیبی از miR-200c به همراه سایر داروهای درمانی از جمله داروهای شیمی درمانی می تواند باعث افزایش حساسیت سلول های سرطانی و کاهش مقاومت دارویی و در نتیجه کاهش دوزهای مصرفی دارو، کاهش هزینه و عوارض جانبی شود . . |
| اهداف اختصاصی | بررسی میزان بیان miR-200c و ژن‏های FAP-1 , RhoE, MMP9,VEGF پس از جایگزینی miR-200c در یکی از رده های سلولی MKN-45), AGS, ( KATOIII به روش Quantitative Real-Time PCR -بررسی میزان تکثیر سلول‏های سرطانی پس از جایگزینی miR-200c در سلول‏های سرطانی معده به روش MTT -بررسی میزان تها‏جم سلول‏های سرطانی پس از جایگزینی miR-200c به روش invitro scratch Assay -بررسی میزان القای آپوپتوز بعد از جایگزینی miR-200c در سلولهای سرطانی معده به روش Annexin V staining |
| چکیده انگلیسی طرح | سرطان معده یکی از شایع ترین و مهمترین سرطان های جهان می باشد که منجر به مرگ می گردد. از عوامل موثر در ایجاد این نوع سرطان، عوامل ژنتیکی، اپی ژنتیکی، میکرو RNA و عوامل محیطی از جمله افزایش سن، سبک زندگی و ... می باشد. میکرو RNAها، گروه کوچکی از RNAهای غیرکدکننده و تک رشته ای هستند که 18 تا24 نوکلئوتید طول دارند و در تنظیم بیان ژن پس از رونویسی نقش مهمی را ایفا می کنند. میکروRNAها به دو دسته ی مهارکننده تومور و انکوژن تقسیم بندی می شوند. از جمله میکروRNAها که در سرطان معده نقش دارد، miRNA-200c می باشد که دچار کاهش بیان می گردد. miRNA-200c که در مهاجرت و تکثیر سلول های سرطانی نقش دارد، روی ژن های MMP9,VEGF FAP-1 و RhoE تاثیر می گذارد و در نتیجه ی کاهش بیان این miRNA، این ژن(FAP-1 , RhoE MMP9,VEGF ( دچار اختلال می گردد. امروزه از میان روش های درمانی مختلفی که برای سرطان بکار گرفته می شود، استفاده ازmiRNA Replacement Therapy است که با این روش، میزان بیان این miRNA را به سطح نرمال برگردانیم. برای این منظور، ابتدا سلولهای سرطانی معده در محیط کشت RPMI حاوی FCS 10% در دمای 37ₒc و CO2 5% کشت داده میشود. سپس ژن miR-200c به محیط کشت اضافه میگرددو انکوباسیون انجام میگیرد. بعد از گذشت زمان لازم، میزان بیان miR-200c و ژنهای هدف آن به وسیله qRT-PCR اندازهگیری میشود. مهاجرت و میزان تکثیر سلولهای سرطانی توسط تکنیک Wound healing assay وMTT مورد بررسی قرار میگیرد. بعد از انتقال miR-200c و گذشت مدت زمان لازم، محیط کشت با محیط کشت حاوی MTT تعویض میشود و بعد از 4 ساعت انکوباسیون، توسط دستگاه ELISA Plate Reader جذب نوری در طول موج 570nm قرائت میشود. بعد از انتقال miR-200c، مهاجرت سلول های سرطانی به وسیله آزمایش invitro scratch Assay بررسی میگردد. |
| کلمات کلیدی | microRNA : RNA های کوچک غیرکدکننده به طول 24-21 نوکلئوتید. مهاجرت : فرایندی پیچیده و چند مرحلهای است که منجر به گسترش سرطان در مکانهای دورتر از جایگاه اولیه سرطان می شود. سرطان معده: عبارت است از رشد بدون کنترل سلول های بدخیم در معده . microRNA Replacement Therapy: تکنیکی است که در آن ژن microRNA تومور ساپرسور را توسط یک وکتور یا مقلد(mimc) وارد سلول سرطانی میکنند. |
| ذینفعان نتایج طرح | بیمار |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| بهزاد برادران | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| مهری قصبی بناب | دانشجوی مالک پایان نامه |
| بهزاد منصوری | همکار اصلی |
| علی محمدی | همکار اصلی |
| نوید شمالی | دانشجوی مالک پایان نامه |
| نغمه شیرافکن | دانشجوی مالک پایان نامه |
| الهام باغبانی | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر ترکیب جایگزینی miR-200c و داروی cisplatin باعث القای آپوپتوز و مهار مهاجرت سلول های سرطان معده گردید.متن خبر بازگردانی بیان miRNA های تومورساپرسور در سلول های سرطانی می تواند یک گزینه ی درمانی مناسب برای درمان سرطان باشد. سرطان معده یکی از شایع ترین و مهمترین سرطان های جهان می باشد که منجر به مرگ می گردد. از جمله میکرو RNA ها که در سرطان معده نقش دارد، miRNA- 200c می باشد که دچار کاهش بیان می گردد. هدف ما در این مطالعه بررسی اثر ترکیبی miRNA-200c و داروی سیس پلاتین بر روند رشد و مهاجرت سلول های متاستیک سرطان معده می باشد.
نتایج نشان داد که استفاده ی ترکیبی از داروی cisplatin وmiRNA-200c مهاجرت سلول های سرطانی معده، را در مقایسه با گروه کنترل مهار نمود. نتایج آزمایش سایتوتوکسیسیتی و فلوسایتومتری نشان داد که miRNA-200c و داروی Cisplatin اثر معنی داری بر روی زنده ماندن سلول ها و القای آپوپتوز دارد. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر ترکیب جایگزینی miR-200c و داروی cisplatin باعث القای آپوپتوز و مهار مهاجرت سلول های سرطان معده گردید.متن خبر بازگردانی بیان miRNA های تومورساپرسور در سلول های سرطانی می تواند یک گزینه ی درمانی مناسب برای درمان سرطان باشد. سرطان معده یکی از شایع ترین و مهمترین سرطان های جهان می باشد که منجر به مرگ می گردد. از جمله میکرو RNA ها که در سرطان معده نقش دارد، miRNA- 200c می باشد که دچار کاهش بیان می گردد. هدف ما در این مطالعه بررسی اثر ترکیبی miRNA-200c و داروی سیس پلاتین بر روند رشد و مهاجرت سلول های متاستیک سرطان معده می باشد.
نتایج نشان داد که استفاده ی ترکیبی از داروی cisplatin وmiRNA-200c مهاجرت سلول های سرطانی معده، را در مقایسه با گروه کنترل مهار نمود. نتایج آزمایش سایتوتوکسیسیتی و فلوسایتومتری نشان داد که miRNA-200c و داروی Cisplatin اثر معنی داری بر روی زنده ماندن سلول ها و القای آپوپتوز دارد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
