تشخیص همزمان کلاسهای مختلف بتالاکتاماز در انتروباکتریاسه های جدا شده از بیماران به روش Multiplex PCR
Simultaneous detection of all beta-lactamase classes in clinical isolates of Enterobacteriaceae by Multiplex PCR Method
مجریان: رضا قوطاسلو
خلاصه روش اجرا: باکتری های خانواده انتروباکتریاسه بخش مهمی از عفونتهای بالینی را بخود اختصاص می دهند. مشکل عمده در درمان عفونت های ناشی از سویه های مقاوم به داروهای بتالاکتام می باشد که نقش مهمی در درمان عفونتهای ناشی از این باکتری ها بعهده دارند. مهمترین مکانیسم مقاومت به داروهای بتالاکتام در اعضای انتروباکتریاسه تولید آنزیمهای بتالاکتاماز می باشد که سبب تخریب و غیر فعال شدن دارو می شوند. این آنزیمها انواع مختلفی داشته و سطوح مقاومت بالایی به دارو ایجاد می کنند . با شناسایی انواع این آنزیمها و بررسی شیوع آنها در ایزوله های بومی یک منطقه کمک موثری به درمان عفونتهای مقاوم به دارو خواهد شد. طوری که نتایج حاصل از این مطالعات را می توان بصورت کاربردی در پروسه درمان به کار بست. در این مطالعه ایزوله های گرم منفی متعلق به خانواده انتروباکتریاسه پس از تعیین هویت دقیق با تست های بیوشیمیایی با روش دیسک دیفیوژن از نظر مقاومت به سفالوسپورینها و کارباپنمها مورد غربالگری قرار می گیرند. سویه های مقاوم سپس با روش های فنوتیپیک تاییدی، مورد شناسایی قرار گرفته و نوع بتالاکتاماز تولید شده در این مرحله مشخص می شود. در نهایت تیپ دقیق آنزیم بتالاکتاماز با روش های ژنوتیپی شامل Multiplex PCR و Sequencing مورد تایید قرار می گیرد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا در دانشکده/مرکز |
| کد طرح | 60595 |
| عنوان فارسی طرح | تشخیص همزمان کلاسهای مختلف بتالاکتاماز در انتروباکتریاسه های جدا شده از بیماران به روش Multiplex PCR |
| عنوان لاتین طرح | Simultaneous detection of all beta-lactamase classes in clinical isolates of Enterobacteriaceae by Multiplex PCR Method |
| نوع طرح | طرح تحقیقاتی |
| اولویت طرح | آنتی بادی های مونوکلونال و پروتئین های نوترکیب (از نظر: الف- جنبه های تولیدی و 2- پروتکل های درمانی) |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | دکتری تخصصی PhD |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | تعیین الگوی مقاومت دارویی انتروباکتریاسه به داروهای بتالاکتام و کمک به درمان این عفونتها در منطقه |
| اهداف اختصاصی | تعیین هویت انتروباکتریاسه های جدا شده از بیماران -غربالگری انواع بتالاکتامازها در باکتری های مورد مطالعه به روش فنوتیپی -شناسایی انواع بتالاکتاماز ها در انتروباکتریاسه های جدا شده به روشهایMultiplex PCR و تعیین توالی مستقیم |
| چکیده انگلیسی طرح | Very little is known about the occurrence and various types of extended-spectrum b-lactamase (ESBL), AmpC and carbapenemase in Iran. The aims of this study were to determine the prevalence of ESBLs, AmpCs and carbapenemase genes among Enterobacteriaceae in Azerbaijan and to characterize the genetic composition of the detected genes. A total of 307 Enterobacteriaceae isolates, recovered from five medical centres, were screened for ESBL, AmpC and carbapenemase activities by the disc diffusion method and phenotypic confirmatory tests. The 162 selected strains (third-generation cephalosporins, cefoxitin- or carbapenemresistant strains with positive or negative phenotypic confirmatory tests) were selected for multiplex PCR screening for b-lactamase genes, and detected genes were confirmed by sequencing. Of 162 isolates, 156 harboured 1 to 6 b-lactamase genes of 41 types. The most prevalent genes were blaTEM-1 (29.9 %), followed by blaCTX-M-15 (25.7 %). Plasmid-mediated AmpC was detected in 66 strains (21.5 %) alone or in combination with other genes. Carbapenemase-encoding genes were detected in 18 strains (5.8 %) of 27 carbapenem-nonsusceptible isolates including 11, 7, 3 and 1 cases of blaOXA-48, blaNDM-1, blaKPC-2 and blaKPC-3 genes, respectively. Interestingly, 148 (94.8 %) of 156 strains with any b-lactamase gene were found to have a multidrug-resistant pattern. The rate of resistance to b-lactams and multidrugresistant Enterobacteriaceae is high in Azerbaijan. All positive strains for carbapenemase genes were resistant to all b-lactams. The present study reveals the high occurrence of CTX-M-type ESBLs followed by TEM and SHV variants among Enterobacteriaceae isolates. East Azerbaijan seems to be an alarming focus for OXA-48, NDM-1 and KPC dissemination. |
| کلمات کلیدی | انتروباکتریاسه: با کتری های گرم منفی اکسیداز منفی بی هوازی اختیاری عامل عفونت های فرصت طلب و عفونتهای بدون عوارض تا عفونتهای شدید بیمارستانی. بتالاکتاماز: آنزیمهای هیدرولیز کننده داروهای بتالاکتام که بطور شایع در اعضای انتروباکتریاسه و باکتری های غیر فرمانتاتیو وجود دارند. Multiplex PCR : روشی برای تشخیص همزمان ژنها با استفاده از شرایط AMPLIFICATION مشابه که می تواند چندین ژن را بطور همزمان با استفاده از پرایمر های اختصاصی تشخیص دهد. |
| ذینفعان نتایج طرح |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| رضا قوطاسلو | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر میزان مقاومت به آنتی بیوتیک های خانواده بتالاکتام در آذربایجان بسیار بالا است.متن خبر مقاومت به آنتی بیوتیک ها اهمیت زیادی دارد. در این مطالعه میزان مقاومت به داروهای بتالاکتام و مقاومت چندگانه به آنها بالا بود. به نظر می رسد آذربایجان شرقی کانون مهمی برای انتشار ژن های مقاومت به داروهای کارباپنم در ایران باشد. متاسفانه تمامی باکتری های مقاوم به کارباپنم مقاوم همزمان به سایر داروهای بتالاکتام هم بودند.
بهتر است در مصرف بی ریویه داروهای آنتی بیوتیک دقت زیادی بگردد. پزشکان و مردم از مصرف غیر علمی و خودسرانه ی آنتی بیوتیک ها جدا خودداری گردد. بهتر است در آینده بررسی جامعی در منطقه و کشور صورت گیرد تا از انتشار مقاومت جلوگیری شود. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر میزان مقاومت به آنتی بیوتیک های خانواده بتالاکتام در آذربایجان بسیار بالا است.متن خبر مقاومت به آنتی بیوتیک ها اهمیت زیادی دارد. در این مطالعه میزان مقاومت به داروهای بتالاکتام و مقاومت چندگانه به آنها بالا بود. به نظر می رسد آذربایجان شرقی کانون مهمی برای انتشار ژن های مقاومت به داروهای کارباپنم در ایران باشد. متاسفانه تمامی باکتری های مقاوم به کارباپنم مقاوم همزمان به سایر داروهای بتالاکتام هم بودند.
162 از 307 ایزوله مشکوک به حضور ژن بتالاکتاماز بودند و به ترتیب 116 و 28 و 15 و 15 سویه ESBL و ESBL AmpCو کارباپنماز بودند. ژن های کارباپنماز در 18 سویه (8/5 درصد) مورد شناسائی قرار گرفت. میزان مقاومت به داروهای بتالاکتام و مقاومت چندگانه (98.1%) در بین انتروباکتریاسه های جدا شده از بیماران بالا بود. بیشترین ESBL از نوع CTX و TEM و SHV بودند. به نظر می رسد آذربایجان شرقی کانون مهمی برای انتشار ژن های مقاومت (OXA-48, NDM-1 KPC )به داروهای کارباپنم باشد.
بهتر است در مصرف بی ریویه داروهای آنتی بیوتیک دقت زیادی بگردد. پزشکان و مردم از مصرف غیر علمی و خودسرانه ی آنتی بیوتیک ها جدا خودداری گردد.
در آینده بررسی جامعی در منطقه و کشور صورت گیرد تا از انتشار مقاومت جلوگیری شود. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر میزان مقاومت به آنتی بیوتیک های خانواده بتالاکتام در آذربایجان بسیار بالا است.متن خبر 162 از 307 ایزوله مشکوک به حضور ژن بتالاکتاماز بودند و به ترتیب 116 و 28 و 15 و 15 سویه ESBL و ESBL AmpCو کارباپنماز بودند. ژن های کارباپنماز در 18 سویه (8/5 درصد) مورد شناسائی قرار گرفت. میزان مقاومت به داروهای بتالاکتام و مقاومت چندگانه (98.1%) در بین انتروباکتریاسه های جدا شده از بیماران بالا بود. بیشترین ESBL از نوع CTX و TEM و SHV بودند. به نظر می رسد آذربایجان شرقی کانون مهمی برای انتشار ژن های مقاومت (OXA-48, NDM-1 KPC )به داروهای کارباپنم باشد.
بهتر است در مصرف بی ریویه داروهای آنتی بیوتیک دقت زیادی بگردد. پزشکان و مردم از مصرف غیر علمی و خودسرانه ی آنتی بیوتیک ها جدا خودداری گردد. در آینده بررسی جامعی در منطقه و کشور صورت گیرد تا از انتشار مقاومت جلوگیری شود. |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
