شناسایی حاملهای پپتیدی جهت انتقال ترکیبات داروئی از غشای سلولهای دیواره دستگاه گوارش با استفاده از تکنیک نمایش فاژی
Investigation of peptide-based GI drug delivery vehicles using phage display technology
مجریان: مریم حمزه میوه رود , سیاوش دستمالچی
خلاصه روش اجرا: روده ی باریک به عنوان یکی از ارگانهای اصلی درگیر جذب بسیاری از ترکیبات اعم از غذایی،درمانی و یا توکسیک نقش مهمی به عنوان سد بیولوژیک در برابر عوامل و ترکیبات پاتوژن ایفا می کند.سد روده ای متشکل از لایه موکوس و لایه اپیتلیالی می باشد.در روده ی باریک اشکال مختلفی از انتقال مواد وجود دارد:انتقال پارا سلولار(بین سلولی) و انتقال ترانس سلولار (عرض سلولی). یکی از فاکتورهای مهم در فراهمی زیستی داروهای خوراکی عبور از سلول های اپیتلیال دستگاه گوارش و جذب آن ها می باشد. شناسایی ترکیباتی که به صورت اختصاصی از سد روده ای عبور می کنند نقش مهمی در توسعه حامل های اختصاصی برای داروهای با جذب کمتر ایفا می کند.یکی از تکنیک های ارزشمندی که امکان شناسایی پپتیدهای اختصاصی را فراهم می آورد تکنیک نمایش فاژی(Phage display) می باشد. این تکنیک که درسال 1985 توسط اسمیت و همکاران معرفی گردید روشی کارآمد برای انتخاب یک پپتیدیا پروتئین می باشد که DNA کدکننده آن در کنار ژن پروتئین پوششی باکتریوفاژ قرار دارد. درنتیجه پپتید موردنظر درسطح باکتریوفاژ به صورت متصل شده به پروتئین پوششی بیان می گردد. در این مطالعه با استفاده از روش نمایش فاژی بصورت in vivo کتابخانه فاژی به موش گاواژ شده و تحت فرایند Biopanning پپتیدهای اختصاصی عبور داده شده از سد روده ای شناسایی خواهد شد. مرحله ی دوم و سوم Biopanning همانند مرحله اول تکرار می شود با این تفاوت که در این مراحل از فاژ جدا شده از خون استفاده می گردد. نمونه های خونی رقت های سریالی تهیه شده و سپس تیتر فاژها تعیین می گردد. DNA حاصل از پلاک های منفرد استخراج گردیده و تعیین توالی خواهند شد.توالی های بدست آمده جهت پیدا کردن توالی مشترک با استفاده از همردیفی مورد آنالیز قرار می گیرند.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 60520 |
| عنوان فارسی طرح | شناسایی حاملهای پپتیدی جهت انتقال ترکیبات داروئی از غشای سلولهای دیواره دستگاه گوارش با استفاده از تکنیک نمایش فاژی |
| عنوان لاتین طرح | Investigation of peptide-based GI drug delivery vehicles using phage display technology |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | سیستم های نوین دارورسانی |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دکتری عمومی |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | پپتید های شناسایی شده می توانند درانتقال مولکول های دارویی که جذب آن ها دچار مشکل می باشد موثر واقع شوند. |
| اهداف اختصاصی | انجام Biopanning به صورتin vivo جهت شناسایی پپتیدهای اختصاصی از سد روده ای -آنالیز توالی های پپتیدی |
| چکیده انگلیسی طرح | As one of the main organs involved in the absorption of many food, therapeutic or toxic compounds, the small intestine plays an important role as a biological barrier against pathogenic agents and compounds. The intestinal barrier consists of a mucus layer and an epithelial layer. In the small intestine, there are different forms of material transfer: paracellular (intercellular) transfer and transcellular (cell width) transfer. One of the important factors in the bioavailability of oral drugs is the passage through the epithelial cells of the digestive system and their absorption. Identification of compounds that specifically cross the intestinal barrier plays an important role in the development of specific carriers for drugs with less absorption. One of the valuable techniques that allows the identification of specific peptides is the phage display technique. This technique, which was introduced in 1985 by Smith et al., is an efficient method for selecting a protein peptide whose coding DNA is located next to the bacteriophage coat protein gene. As a result, the desired peptide is expressed on the surface of the bacteriophage attached to the coat protein. In this study, using phage display method in vivo, the phage library will be gavage to mice and specific peptides passed through the intestinal barrier will be identified under the Biopanning process. The second and third stage of Biopanning is repeated like the first stage, with the difference that phage isolated from blood is used in these stages. Serial dilutions of blood samples are prepared and then phage titers are determined. The DNA obtained from individual plaques will be extracted and sequenced. The obtained sequences will be analyzed using co-alignment to find the common sequence. |
| کلمات کلیدی | Phage display :در تکنیک نمایش فاژی انواع مختلف پپتید یا پروتئین برروی ذرات باکتریوفاژ بیان می شود. سد روده ای (Intestinal barrier): عوامل فیزیولوژیک که مکانیسم های دفاعی ،جذب وانتقال از دستگاه گوارش در روده باریک را تشکیل می دهد. |
| ذینفعان نتایج طرح |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| مریم حمزه میوه رود | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| سیاوش دستمالچی | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| یدالله آذرمی | مشاور |
| حکیمه کنعانی | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر فاژهای حامل پپتیدهای 12 آمینواسیدی از غشای سلولهای دیواره دستگاه گوارش بصورت غیراختصاصی عبور کردند.متن خبر تجویز خوراکی داروها یکی از مطلوبترین روش های تجویز دارو می باشد، با این حال بعضی از داروها به دلیل عواملی مثل تجزیه شدن در روده به صورت غیرخوراکی مصرف میشود که مورد پسند بیمار نیست. بنابراین توسعه ی سیستم های دارورسانی برای انتقال داروها در سراسر روده می تواند کمک قابل توجهی به افزایش جذب خوراکی داروهای با جذب پایین بنماید. در این راستا، تکنیک نمایش فاژی می تواند جهت شناسایی پپتید هایی که به طور اختصاصی از دیواره روده عبور می کنند و به عنوان حامل های اختصاصی مطرح باشند میتواند مورد استفاده قرار بگیرد. در این مطالعه از کتابخانه فاژی پپتیدهای 12 تائی استفاده شد که طی سه مرحله ی غربالگری به موشها ازطریق دهان داده شد. پس از یک ساعت نمونه خونی از آنها تهیه شد. از فاژ های حاصل از عبور در هر مرحله نمونه برداری شد و DNA آنها طی مرحله ی PCR تکثیر گردید و پس از تعیین توالی پپتیدها، توالی های به دست آمده با استفاده از نرم افزارهای بیوانفورماتیک آنالیز شدند. باتوجه به نتایج به دست آمده، احتمالا عبور فاژ حامل پپتیدهای 12 اسیدآمینه ای، از سد مخاطی روده به صورت غیر اختصاصی بوده و دارای مسیرها و ترانسپورترهای انتقالی اختصاصی جهت عبور از سد مخاطی روده نمی باشند. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
