بررسی نقش مهارکننده ی دیوبیکوئیتیناز در مرگ سلولی و آپوپتوز رده های سلولی سرطانی غیر کوچک ریه
Role of deubiquitinase inhibitor in cell death and apoptosis in non-small lung cancer cell lines
مجریان: امیر قربانی حق جو
خلاصه روش اجرا: دو رده ی سلولی سرطان ریه از نوع غیر کوچک (Non-small cell lung cancer cell line) شامل A549 و Calu-6 و رده سلولی MRC-5 به عنوان رده سلولی نرمال ریه در محیط کشت RPMI 1640 غنی شده با 10% سرم جنین گاوی (FBS) ، ویتامین ها، اسید آمینه های غیرضروری (NEAAs)، پنی سیلین، استرپتومایسین ، L-گلوتامین کشت داده می شوند. دوز مورد استفاده از ترکیب VLX1570 و بررسی سمیت آن بر روی سلولها با استفاده از تکنیک MTT assay با زمان انکوباسیون 24، 48 و 72 ساعت به صورت triplicate انجام گرفته و از غلظت کمتر از IC50 برای تیمار(treat) سلولها با ترکیب VLX1570 استفاده می شود. برای بررسی آپوپتوز از بیان ژنهای Bax/Bcl2 توسط qRT-PCR استفاده خواهد شد و همچنین جهت سنجش آپوپتوز در سطح سلولی از فلوسایتومتری استفاده خواهد شد. برای بررسی مارکرهای پروتئینی استرس شبکه ی آندوپلاسمی (1-PERK, IRE و ATF-6) از وسترن بلات استفاده می شود و برای آنالیز نتایج بدست آمده از نرم افزار SPSS و برای بررسی تفاوت بین میانگین داده ها در دو گروه مستقل از آزمون آماری independent sample t-test استفاده خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 60424 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی نقش مهارکننده ی دیوبیکوئیتیناز در مرگ سلولی و آپوپتوز رده های سلولی سرطانی غیر کوچک ریه |
| عنوان لاتین طرح | Role of deubiquitinase inhibitor in cell death and apoptosis in non-small lung cancer cell lines |
| نوع طرح | طرح تحقیقاتی |
| اولویت طرح | پیشگیری و اپیدمیولوژی سرطان های شایع |
| نوع مطالعه | |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 6 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | با توجه به اهمیت سرطان ریه به واسطه ی میزان مرگ و میر بالای این سرطان و لزوم توسعه ی استراتژی های درمانی جدید برای این بیماری و اینکه مهارکننده های جدید برای آنزیم های دیوبیکوئیتیناز (DUBs) به عنوان داروهای ضد سرطان جدید ایجاد شده اند و با توجه به اینکه ترکیب جدید و اختصاصی VLX1570 به عنوان تنها مهارکننده ی DUB می باشد که وارد فاز clinical trial شده است و اثر آن روی تومورهای جامد مثل رده های سلولی سرطان ریه بررسی نشده است لذا هدف از این مطالعه استفاده از ترکیب VLX1570 به عنوان مهارکننده ی آنزیم DUB و بررسی اثرات آن روی سولهای سرطانی ریه می باشد. |
| اهداف اختصاصی | تعیین اثر مهارکننده ی دیوبیکوئیتیناز در مرگ سلولی و آپوپتوز رده های سلولی A549 و Calu-6 و MRC-5 -تعیین اثر مهارکننده ی دیوبیکوئیتیناز بر استرس ER در رده های سلولی A549 و Calu-6 و MRC-5 |
| چکیده انگلیسی طرح | |
| کلمات کلیدی | مهارکننده DUBs: مرحله یوبیکوئیتیناسیون به عنوان یک تغییر پس از ترجمه، اتصال یوبی کوئیتین به سوبستراها است که اساسا تخریب پروتئین داخل سلولی را تنظیم می کند. کونژوگاسیون یوبی کوئیتین به سوبستراها یک فرآیند برگشت پذیر است، مرحله دیوبیکوئیتیناسیون به وسیله ی آنزیم های DUBs که قادر به برداشتن یوبی کوئیتین از پروتئین هستند کاتالیز می شود به دلیل مشارکت و عملکرد های آنزیم های دیوبیکوئیتیناز (DUBs) در تنظیم مسیرهای سیگنالینگ مهم در سلولهای توموری، آنزیم های DUBs به عنوان هدف های ضد سرطان جذاب پدیدار شدند که محققان را به سمت استفاده از مهارکننده های آنزیم های دیوبیکوئیتیناز (DUBs) سوق دادند. استرس ER: شبکه ی آندوپلاسمی (ER) در تاخوردگی (folding) صحیح و تغییرات پس از ترجمه (مثل یوبیکوئیتیناسیون) پروتئین ها نقش دارد که اختلال در عملکرد folding شبکه آندوپلاسمی باعث تحریک یک شرایط استرس سلولی می شود که تحت عنوان استرس ER شناخته می شود و مهارکننده های دیوبیکوئیتیناز به عنوان داروهای ضد سرطان از طریق افزایش استرس ER به آپوپتوز سلولهای سرطانی کمک می کنند. ترکیب VLX1570: ترکیب VLX1570 به عنوان یک مهارکننده ی رقابتی از DUB های پروتئازومال است و دارای فعالیت بیولوژیک افزایش یافته و مهار اختصاصی می باشد و تنها مهارکننده ی DUB می باشد که به طور موفقیت آمیزی وارد مرحله ی clinical trial شده است. |
| ذینفعان نتایج طرح | در صورت کسب نتیجه ی مطلوب از این مطالعه می توان با مطالعات بیشتر و استراتژی های جدید از ترکیب VLX1570 برای درمان بیماران مبتلا به سرطان ریه و کاهش viability و افزایش آپوپتوز سلولهای سرطانی ریه استفاده کرد. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| علی اصغر مقدمی | مجری دانشجویی(کمیته تحقیقات دانشجویی) |
| سعید نظری سلطان احمد | همکار اصلی |
| اشکان کلانتری چروده | همکار اصلی |
| داود ثناجو | همکار اصلی |
| سید وحید حسینی | همکار اصلی |
| امیر قربانی حق جو | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر مهار آنزیم دیوبیکوئیتینه کننده از طریق افزایش اتوفاژی می تواند در درمان سرطان ریه مورد استفاده قرار گیرد.متن خبر سرطان ریه یکی از کشنده ترین سرطان ها با شیوع بالا بوده و بیش از 80 درصد این سرطان از نوع سلول غیر کوچک است. آنزیم های دیوبیکوئیتینه کننده در این سرطان ها افزایش بیان پیدا می کنند که هدف قرار دادن این آنزیم در این مطالعه بررسی شده است.
مهار آنزیم دیوبیکوئیتیناز منجر به کاهش تکثیر سلولی و زنده مانی سلول ها، توقف چرخه سلولی، افزایش پروتئین های یوبیکوئیتینه و استرس شبکه آندوپلاسمی و اتوفاژی بدون افزایش چشمگیر در آپوپتوز شد. در این مطالعه به مکانیسم افزایش اتوفاژی از طریق یک مسیر سیگنالینگ نیز پی برده شده است.
این مطالعه هدف قرار دادن آنزیم های دیوبیکوئیتیناز را به عنوان یک رویکرد درمانی جدید در سرطان ریه از نوع غیر کوچک به منظور بررسی های بیشتر پیشنهاد می کند. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
