بررسی اثرات درمانی لیپاز باکتریایی بر میزان سمیت لیپو پلی ساکارید باکتریایی در مدل جنین جوجه
Studying the theraputic effect of bacterial lipase on bacterial lipopolysaccharide toxicity level in the chick embryo model
مجریان: حمیدرضا وزیری
خلاصه روش اجرا: در این تحقیق از مدل جنین جوجه استفاده جهت برسی میزان سمیت لیپوپلی ساکارید باکتریایی و اثرات درمانی لیپاز باکتریایی استفاده خواهد شد. در آغاز تهیه تخم مرغ های نطفه دار تهیه و در قالب گروههای آزمایشی در دستگاه هچر انکوباتور کشت داده خواهند شد. در انتهای هفته اول (روز 7 جنینی) تزریقات طبق گروه بندی و در زمان یکسان برای گروه های آزمایشی و کنترل انجام خواهد شد و در انتهای هفته سوم (روز 19) و قبل از هچینگ، نمونه برداری از گروههای مختلف انجام خواهد گرفت. بصورت کلی مطالعات در دو مسیر انجام خواهد شد. در گام نخست و بر پایه هدف اول مطالعه، تفاوتهای مورفولوژیکی حاصله در مقایسه گروههای آزمایشی با گروههای کنترل تعیین شده، مشخص خواهد شد. برای تحقق این هدف در آغاز نمونه ها توسط پارا فرمالدهید فیکس شده و پس از تهیه مقاطع میکروسکوپی به دنبال پارافینه کردن بافتها، با استفاده از رنگ آمیزی هماتوکسیلین و ائوزین، اختلافات در گروههای مختلف بررسی خواهند شد. در بخش بعدی، تفاوت گروههای مختلف از نظر بیان ژنهای موثر در فرایند تشکیل سیستم قلبی-عروقی مورد ارزیابی قرار خواهد گرفت. برای این منظور، RNA از نمونه های گروههای مختلف و تکرارهای معین شده استخراج و cDNA مربوطه سنتز خواهد شد. در نهایت بیان ژنهای مورد نظر توسط تکنیک qRT-PCR مورد ارزیابی قرار خواهد گرفت و نتایج توسط آزمونهای آماری بررسی خواهند شد. برای انجام این آزمایش تعداد 5 گروه و 9 تکرار برای هر یک از گروهها در نظر گرفته شده است. گروه های آزمایشی شامل لیپوپلی ساکارید، لیپاز و لیپوپلی ساکارید + لیپاز بوده و گروه های کنترل سالین (حلال لیپاز و لیپوپلی ساکارید) و گروه شم خواهند بود. باتوجه به اینکه بدن میزبان در مواجهه با عفونتهای لیپوپلی ساکاریدی، دچار شوک می گردد و عملکرد آن توسط لیپاز باکتریایی قابل مهار است، شناخت صحیح از اثرات نامطلوب لیپوپلی ساکارید و اثرات درمانی لیپاز باکتریایی در دوران بارداری و مراحل اولیه تشکیل جنین امری ضروری به نظر می رسد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 60283 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثرات درمانی لیپاز باکتریایی بر میزان سمیت لیپو پلی ساکارید باکتریایی در مدل جنین جوجه |
| عنوان لاتین طرح | Studying the theraputic effect of bacterial lipase on bacterial lipopolysaccharide toxicity level in the chick embryo model |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | کاهش ناتوانی و عوارض اختلالات باروری و درمان ناباروری |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | کارشناسی ارشد |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | جنین جوجه در این تحقیق به عنوان مدل آزمایشگاهی-حیوانی انتخاب شده است. از آنجایی که مراحل تکامل جنین جوجه بیست و یک روز به طول می انجامد و به راحتی قابل دستکاری است، مطالعه تکامل آن به طور گسترده مورد استفاده قرار می گیرد. در این طرح برای اولین بار اثرات مهاری لیپاز باکتریایی بر روی لیپوپلی ساکارید باکتریایی در مدل جنین جوجه مورد بررسی قرار خواهد گرفت. با توجه به شیوع روز افزون عفونتهای باکتریایی و اهمیت آلودگیهای ایجاد شده توسط باکتری های گرم منفی همچنین لزوم بررسی های دقیق از اثرات نامطلوب آن در دوران بارداری و تشکیل جنین و مطالعه تاثیر فعالیت لیپاز باکتریایی در این زمینه، بر آن شدیم تا اثرات درمانی لیپاز باکتری را بر روی عفونت های باکتریایی ناشی از لیپوپلی ساکارید در جنین جوجه بعنوان مدل حیوانی، مورد تحقیق قرار دهیم. نتایج حاصله دانش فعلی را در زمینه تاثیرات مخرب لیپو پلی ساکارید و خواص درمانی لیپاز باکتریایی در جنین در حال رشد را ارتقا خواهد بخشید. بدن میزبان در مواجهه با LPS، دچار شوک سپتیک شده و این امر منجر به فعال شدن آبشار سیگنالینگ های دخیل می گردد. LPS در تقابل با لیپاز باکتریایی از طریق اتصال آن به بخش لیپید A، مهار گردیده و از فعالسازی سیگنالینگهای مربوط به تاثیرات مخرب جلوگیری می نماید. شناخت صحیح از اثرات نامطلوب LPS و اثرات درمانی لیپاز باکتریایی در دوران بارداری و مراحل اولیه تشکیل جنین امری ضروری به نظر می رسد. |
| اهداف اختصاصی | بررسی اثرات لیپاز و LPS باکتریایی بر روی رشد و تکامل (مورفولوژی) قلب جنین جوجه -بررسی اثرات لیپاز و LPS باکتریایی بر بیان ژن های موثر در تشکیل سیستم قلبی عروقی جنین جوجه |
| چکیده انگلیسی طرح | |
| کلمات کلیدی | اسیل اوکسی اسیل هیدرولاز(AOAH):یک لیپاز محافظت شده است که زنجیره های Acyl چربی ثانویه را از لیپو پلی ساکارید های باکتریایی (LPS) حذف می کند. دی اسیلاسیون توسط AOAH تا حد زیادی توانایی LPS را برای تحریک سلول ها از طریق گیرنده CD14-MD-2-Toll-like کاهش می دهد16. اتدوتوکسین:اندوتوکسین ها بخشی از غشای خارجی دیواره سلولی باکتری های گرم منفی هستند. اندوتوکسین بطور پیوسته با باکتری های گرم منفی همراه است. فعالیت بیولوژیکی اندوتوکسین با لیپوپلی ساکارید (LPS) همراه بوده و سمیت آن با ترکیبات چربی (لیپید A) و ایمنی زایی آن با ترکیبات پلی ساکارید همراه است. لیپید A:جزء چربی یک اندوتوکسین است که به واسطه آن مسمومیت باکتری های گرم منفی ایجاد می گردد. لیپو پلی ساکارید(LPS):در غشای خارجی باکتری های گرم منفی یافت می شود و متشکل از دو بخش لیپید و قند است. لیپو پروتئین لیپاز(LPL):توسط ماکروفاژها ترشح می شود وعملکرد آن هیدرولیز تری گلیسرید لیپوپروتئین ها به اسیدهای چرب و منو اسیل گلیسرول است. فاکتور تمایز میلوئید(Myeloid Differentiation factor- 2 ،MD-2 ):یک پروتئین متصل به لیپوپلی ساکارید است که برای فعال سازی مسیرهای ضد التهابی در بیماری های التهابی حاد ناشی از اندوتوکسین ضروری است. TLR-4:پروتئین کدگذاری شده توسط این ژن متعلق به خانواده گیرنده TLR) Toll Like) است که نقش اساسی در تشخیص پاتوژن و فعال سازی ایمنی ذاتی دارد، همچنین تولید سیتوکین های لازم برای توسعه ایمنی مؤثر را میانجی گری می کند. این گیرنده در انتقال سیگنال ناشی از لیپوپلی ساکارید (LPS) در بیشتر باکتری های گرم منفی دخالت دارد. |
| ذینفعان نتایج طرح | افراد باردار مبتلا به بیماری های باکتریایی گرم منفی و یا در معرض آنها |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| مهدی مهدی پور | همکار اصلی |
| حمیدرضا وزیری | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| رضا رهبرقاضی | مشاور |
| بهنام هاشمی | همکار اصلی |
| افسانه باقرزاده | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر لیپاز باکتریایی، اثرات نامطلوب و سمی لیپوپلی ساکارید در دوران جنینی در مدل جوجه را خنثی نمود.متن خبر با توجه به شیوع گسترده عفونتهای باکتریایی، بررسی و شناخت دقیق اثرات نامطلوب آن در دوران بارداری و تشکیل جنین همچنین تاثیرات درمانی لیپاز باکتریایی در دوران بارداری و مراحل اولیه تشکیل جنین ضروری است. در این مطالعه به بررسی اثرات مخرب لیپوپلی ساکارید باکتریایی و اثرات درمانی لیپاز باکتریایی در سیستم قلبی عروقی و التهاب در دوران بارداری در جنین جوجه پرداختیم. دستاوردهای این مطالعه حاکی از آن بود قرار گرفتن در معرض باکتریهای گرم منفی در مراحل اولیه رشد جنین و بارداری، به رشد جنین آسیب رسانده و نقص سلامتی ایجاد می کند و همچنین باکتری های گرم منفی در شکل گیری قلب جنین اختلال ایجاد می کنند و باعث ایجاد اثرات مضر بر عملکرد و ساختار قلب می شوند. این درحالی است که لیپاز باکتریایی اثرات مضر باکتریهای گرم منفی را مهار کرده و اثرات نامطلوب لیپوپلی ساکارید را در دوران بارداری و مراحل اولیه رشد جنین کاهش می دهد. دانش بدست آمده می تواند در بکارگیری داروهای موثرتر در درمان مسمومیت های باکتریایی مورد استفاده قرار گیرد. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
