بررسی اثرات ترانس چالکون بر مسیر سیگنالینگ مایکروریبونوکلئیک اسیدهای 34a، 122 و تغییرات هیستوپاتولوژیک در کبد رتهای مبتلا به استئاتوهپاتیتیس غیر الکلی
The effect of trans-chalcone on miR-34a ،miR-122 signaling pathway and histological changes in the liver of non-alcoholic steatohepatitis rats
مجریان: محمدرضا علیپور
خلاصه روش اجرا: در این مطالعه، 56 رت نر با نژاد ویستار در محدوده وزنی 250-200 گرم به طور تصادفی به 8 گروه زیر (7 رت در هر گروه) تقسیم خواهند شد: 1-گروه سالم با رژیم غذایی استاندارد و گاواژ روزانه یکمرتبه تویین 80 (10٪) به حجم 2 میلی لیتر به مدت 6 هفته 2- گروه سالم با رژیم غذایی استاندارد و گاواژ روزانه یکمرتبه تویین 80 (10٪) به حجم 2 میلی لیتر در 2 هفته آخر (هفته 5 و 6) 3- گروه سالم با رژیم غذایی استاندارد و گاواژ روزانه یکمرتبه ترانس چالکون به میزانmg/kg 20 و به مدت 6 هفته 4- گروه سالم با رژیم غذایی استاندارد و گاواژ روزانه یکمرتبه ترانس چالکون به میزانmg/kg 20 در 2 هفته آخر ( در هفته5و 6) 5- گروه دریافت کننده رژیم غذایی پرچرب با گاواژ روزانه یکمرتبه تویین 80 (10٪) به حجم 2 میلی لیتر به مدت 6 هفته 6- گروه دریافت کننده رژیم غذایی پرچرب با گاواژ روزانه یکمرتبه تویین80 (10٪) به حجم2 میلی لیتر در 2 هفته آخر(هفته5و 6) 7- گروه دریافت کننده رژیم غذایی پرچرب با گاواژ روزانه یکمرتبه ترانس چالکون به میزانmg/kg 20 و به مدت 6 هفته 8- گروه دریافت کننده رژیم غذایی پرچرب با گاواژ روزانه یکمرتبه ترانس چالکون به میزانmg/kg 20 در 2 هفته آخر ( در هفته 5 و 6) نحوه نگهداری حیوانات برای تمامی گروه¬ها یکسان می باشد. حیوانات تمامی گروه¬ها به منظور سازگاری با محیط یک هفته قبل از آزمایشات در محیط آزمایشگاه فیزیولوژی دانشکده پزشکی تبریز نگهداری خواهند شد. درجه حرارت محل نگهداری حیوانات حدود 2±22 درجه سانتی گراد تنظیم شده و ساعات روشنائی و تاریکی بصورت 12 ساعت روشنایی و 12 ساعت تاریکی تنظیم خواهد گردید. طول مدت تحقیق 6 هفته بعد از سازگاری است. نحوه القاء کبد چرب و تیمار با ترانس چالکون برای القا کبد چرب به مدت 6 هفته و روزانه یکمرتبه امولسیون پرچرب با دوزml/kg 10 به حیوانات گروه¬های مدل کبد چرب گاواژ خواهد شد [1]. تیمار خوراکی با ترنس چاکون نیز با حلال تویین 80 (10٪) و با دوزmg/kg 20 روزانه یکمرتبه انجام خواهد شد. بعد از اتمام مدت زمان تیمار حیوانات تمام گروه¬ها هشت ساعت قبل از نمونه برداری به صورت ناشتا نگه¬داری خواهند شد. در صبح نمونه برداری ابتدا حیوانات تمام گروه ها وزن شده و سپس توسط تزریق داخل صفاقی کتامین (mg/kg60) و زایلازین (mg/kg4) بیهوش و از آنها نمونه خون و کبد تهیه خواهد شد. در اتمام نمونه برداری قفسه سینه حیوانات باز و به این ترتیب حیوانات در حالت بی هوشی کشته خواهند شد. کبد حیوانات ابتدا وزن شده و سپس برای سنجش¬های پروتئینی و بیان ژن فریز خواهد گشت و یا برای مطالعات بافت شناسی در محلول فرمالین 10٪ فیکس خواهد شد. در ادامه ایندکس کبدی با استفاده از فرمول Liver index=liver weight/body weight×100% محاسبه خواهد گردید [2]. غلظت سرمی آسپارت آمینوترانسفراز، آلانین آمینوترانسفراز، کلسترول تام، تری گلیسرید، گلوکز، کلسترول LDL (LDL-C) ، کلسترول HDL (HDL-C) به روش آنزیماتیک با کیت¬های تجاری سنجش خواهد شد و غلظت انسولین سرم به روش الایزا سنجش خواهد شد. HOMA-IR یا ایندکس شاخص مقاومت به انسولین از فرمول زیر محاسبه خواهد گردید: HOMA-IR=گلوکز پلاسما در حالت ناشتا (mmol/L)× انسولین سرم در حالت ناشتا(μU/mL)/22.5 [3] از نمونه کبدی هموژن تهیه خواهد شد. سپس، هموژن حاصل سانتریفیوژ شده و محلول رویی جهت سنجش مقادیر بیان ژن miR-34a، miR-122، SIRT1وFas به روش Real-time PCR ارزیابی خواهد شد. به علاوه، غلظت کبدی پروتئین Fas به روش الایزا سنجش خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 60202 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثرات ترانس چالکون بر مسیر سیگنالینگ مایکروریبونوکلئیک اسیدهای 34a، 122 و تغییرات هیستوپاتولوژیک در کبد رتهای مبتلا به استئاتوهپاتیتیس غیر الکلی |
| عنوان لاتین طرح | The effect of trans-chalcone on miR-34a ،miR-122 signaling pathway and histological changes in the liver of non-alcoholic steatohepatitis rats |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | هپاتیت و سیروز کبدی |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دکتری تخصصی PhD |
| مدت اجرا - ماه | 14 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | اخیرا مطالعات به جای کبد چرب ساده در جهت بهبود NASHهدف¬گذاری می¬گردند، زیرا مبتلایان NASH با ریسک بیشتری برای ابتلا به سیروز و سرطان کبدی (هپاتوسلولار کارسینوما) مواجه هستند. با این وجود، علیرغم شیوع بالا و وخامت NASH، گزینه¬های درمانی برای آن محدود هستند و تاکنون درمان دارویی قطعی مورد تایید FDA معرفی نشده است. با توجه به نقش مهم مقاومت به انسولین، هایپرگلیسمی، هایپرلیپیدمی و استرس اکسیداتیو در بروز و پیشرفت بیماری کبد چرب و با توجه به نقش ضد دیابتی، ضد چاقی، ضد التهابی، آنتی اکسیدانی، هایپولیپیدمیک و هایپوگلایسمیک چالکون به نظر می¬رسد ترانس چالکون بتواند از بروز کبد چرب در مدل های حیوانی کبد چرب القا شده با رژیم غذایی پرچرب پیشگیری کند. به علاوه با توجه به نقش miRNA ها در پاتوژنز کبد چرب و تاثیر ترکیبات گیاهی از جمله فلاونوئیدها در نرمالسازی بیان آن¬ها، به نظر می¬رسد ترانس چالکون نیز از طریق تاثیر بر بیان miR-34a و miR-122 و ژن¬های هدف آن¬ها از جمله SIRT1 و Fas باعث بهبود وضعیت کبدی رت¬های مدل کبد چرب شود. با این حال، تا کنون تاثیر تیمار با ترانس چالکون بر بیان miRNA های 34a، 122 و ژن¬های هدف در حیوانات سالم و مبتلا به کبد چرب بررسی نشده است. در این مطالعه با توجه به شیوع بالای کبد چرب و عوارض کبدی وخیم ناشی از پیشرفت این بیماری و نبود درمان قطعی و مناسب سعی بر آنست که با مطالعه اثر مصرف توام ترانس چالکون و تیمار با رژیم غذایی پرچرب، ترانس چالکون را به عنوان ترکیب مفید در راستای کاهش بروز این بیماری معرفی نمود و برای اولین بار، miRNAهای 34a و 122 را به عنوان هدف درمانی این ترکیب بررسی کرد. |
| اهداف اختصاصی | تعیین اثر رژیم پرچرب و ترانس چالکون به تنهایی و توام بر پروفایل چربی و ایندکس کبدی در رت­های نر -تعیین اثر رژیم پرچرب و ترانس چالکون به تنهایی و توام بر تغییرات هیستوپاتولوژیک کبد رت­های نر -تعیین اثر رژیم پرچرب و ترانس چالکون به تنهایی و توام بر مقدار پروتئین­ Fas در کبد رت­های نر -تعیین اثر رژیم پرچرب و ترانس چالکون به تنهایی و توام بر میزان بیان ژن miR-34a، miR-122، Fas و SIRT1 در کبد رت­های نر |
| چکیده انگلیسی طرح | The effect of trans-chalcone on miR-34a ،miR-122 signaling pathway and histological changes in the liver of non-alcoholic steatohepatitis rats The effect of trans-chalcone on miR-34a ،miR-122 signaling pathway and histological changes in the liver of non-alcoholic steatohepatitis rats |
| کلمات کلیدی | (Nonalcoholic fatty liver disease) NAFLD: کبد چرب غیر الکلی به طیفی از مشکلات کبدی شامل استئاتوز ساده تا استئاتوهپاتیتیس، فیبروز و سیروز کبدی گفته می¬شود. NASH (Nonalcoholic steatohepatitis): استئاتوهپاتیتیس غیرالکی که فرم التهابی بیماری کبد چرب است. NF-КB(Nuclear Factor КB): یک فاکتور رونویسی Ubiquitous درگیر در واکنش التهابی می¬باشد. TNF-α(Tumor Necrosis Factor α): فاکتور نکروز دهندۀ تومور و یک سایتوکاین التهابی است. IL-6 (Interlukin-6): سایتوکین ساخته شده توسط گلبول سفید می¬باشد. SIRT1(Silent information regulator T1): مولکول حسگر انرژی که در پاسخ به کاهش انرژی سلول و در شرایط محدودیت کالری و ورزش فعال می¬شوند و باعث برقراری مجدد تعادل انرژی در سلول می¬گردند. :(AMP-activated protein kinase) AMPK مولکول حسگر انرژی که در پاسخ به کاهش انرژی سلول و در شرایط محدودیت کالری و ورزش فعال می¬شوند و باعث برقراری مجدد تعادل انرژی در سلول می¬گردند. PPARα (Peroxisome proliferator-activated receptor α) : یک رسپتور هسته¬ای است که به عنوان یک فاکتور نسخه برداری باعث کنترل بیان چندین ژن درگیر در مسیرهای متابولیسم لیپییدی از جمله ژن¬های دخیل در برداشت و انتقال اسیدهای چرب در سلول¬ها و بتا اکسیداسیون آنها می¬گردد. HOMA-IR: شاخص مقاومت به انسولین است. |
| ذینفعان نتایج طرح |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| الهام کریمی ثالث | دانشجوی مالک پایان نامه |
| محمدرضا علیپور | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| سجاد جدی | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر ترانس چالکون از طریق اثر بر مسیرهای سیگنالینگ miR-34a/SIRT1 و miR-122/FAS باعث حفاظت کبد در مقابل استئاتوهپاتیت غیر الکلی می گرددمتن خبر استئاتوهپاتیت غیر الکلی (NASH) فرم التهابی و پیشرونده کبد چرب بوده و به نقش miR-34a و miR-122 در پاتوژنز آن در مطالعات اشاره شده است. نتایج حاصل از این مطالعه بیانگر نقش حفاظت کنندگی ترانس چالکون در NASH بوده که بخشی از این اثرگذاری از طریق مسیرهای سیگنالینگ miR-34a/SIRT1 و miR-122/FAS انجام می گیرد. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر ترانس چالکون از طریق اثر بر مسیرهای سیگنالینگ miR-34a/SIRT1 و miR-122/FAS باعث حفاظت کبد در مقابل استئاتوهپاتیت غیر الکلی می گرددمتن خبر استئاتوهپاتیت غیر الکلی (NASH) فرم التهابی و پیشرونده کبد چرب بوده و به نقش miR-34a و miR-122 در پاتوژنز آن در مطالعات اشاره شده است. نتایج حاصل از این مطالعه بیانگر نقش حفاظت کنندگی ترانس چالکون در NASH بوده که بخشی از این اثرگذاری از طریق مسیرهای سیگنالینگ miR-34a/SIRT1 و miR-122/FAS انجام می گیرد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر ترانس چالکون از طریق اثر بر مسیرهای سیگنالینگ miR-34a/SIRT1 و miR-122/FAS باعث حفاظت کبد در مقابل استئاتوهپاتیت غیر الکلی می گرددمتن خبر استئاتوهپاتیت غیر الکلی (NASH) فرم التهابی و پیشرونده کبد چرب بوده و به نقش miR-34a و miR-122 در پاتوژنز آن در مطالعات اشاره شده است. نتایج حاصل از این مطالعه بیانگر نقش حفاظت کنندگی ترانس چالکون در NASH بوده که بخشی از این اثرگذاری از طریق مسیرهای سیگنالینگ miR-34a/SIRT1 و miR-122/FAS انجام می گیرد. |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر ترانس چالکون از طریق اثر بر مسیرهای سیگنالینگ miR-34a/SIRT1 و miR-122/FAS باعث حفاظت کبد در مقابل استئاتوهپاتیت غیر الکلی می گرددمتن خبر استئاتوهپاتیت غیر الکلی (NASH) فرم التهابی و پیشرونده کبد چرب بوده و به نقش miR-34a و miR-122 در پاتوژنز آن در مطالعات اشاره شده است. نتایج حاصل از این مطالعه بیانگر نقش حفاظت کنندگی ترانس چالکون در NASH بوده که بخشی از این اثرگذاری از طریق مسیرهای سیگنالینگ miR-34a/SIRT1 و miR-122/FAS انجام می گیرد. |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
