تاثیر جایگزینی miR-143 در مهار رشد و مهاجرت رده سلولی سرطان ریه (A549)
miR-143 Replacement effect on growth and migration inhibition in Lung cancer cell line (A549)
مجریان: بهزاد برادران , ابراهیم سخی نیا
خلاصه روش اجرا: ابتدا سلولهای سرطانی ریه در محیط کشت RPMI حاوی FCS 10% در دمای 37ₒc و CO2 5% کشت داده میشود، سپس ژن miR-143 همراه وکتور و معرف ترانسفکت کننده Lipofectamin2000 به محیط کشت اضافه میگردد، انکوباسیون انجام میگیرد، بعد از گذشت زمان لازم میزان بیان miR-143 وژنهای ¬ MMP-9, MMP-13 بوسیله qRT-PCR اندازهگیری میشود.میزان رشد و پرولیفراسیون سلولهای سرطانی توسط تکنیک MTT مورد بررسی قرار میگیرد. بعد از ترانسفکت miR-143 وگذشت مدت زمان لازم محیط کشت با محیط کشت حاوی MTT تعویض میشود وبعد از 4 ساعت انکوباسیون توسط دستگاه ELISA Plate reader جذب نوری در طول موج 570nm قرائت میشود.میزان مهاجرت و متاستاز سلولهای سرطانی بعد از ترانسفکت miR-143 بوسیله آزمایش Wound healing assay بررسی میگردد. 5x105 سلول ترانسفکت شده با miR-143 در محیط کشت انکوبه شده شیاری در محیط ایجاد میشود، بعد از شستشوی محیط با PBS انکوباسیون انجام میگیرد وسپس از محل شیار توسط میکروسکوپ عکسبرداری میشود ومهاجرت سلولها از لبه شکاف به داخل آن بررسی میگردد
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا در دانشکده/مرکز |
| کد طرح | 60131 |
| عنوان فارسی طرح | تاثیر جایگزینی miR-143 در مهار رشد و مهاجرت رده سلولی سرطان ریه (A549) |
| عنوان لاتین طرح | miR-143 Replacement effect on growth and migration inhibition in Lung cancer cell line (A549) |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | پیشگیری و اپیدمیولوژی سرطان های شایع |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | کارشناسی ارشد |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | سرطان ریه یکی از شایعترین سرطان ها در سرتاسر دنیا و دارای بالاترین میزان نرخ مرگ و میر در بین سایر سرطان ها میباشد.سرطان ریه شامل 2 رده ای اصلی سلول های سرطانی کوچک ریه (SCLC)و سلول های غیر کوچک سرطانی ریه (NSCLC)میباشد که این دو شامل 85% موارد مرگ و میر در اثر سرطان ریه میباشد.تحقیقات جدید ارتباط مولکولی بین سرطان ریه و miRNA را اشکار ساخته است.تحقیقات عظیم برای درمان این سرطان در سرتاسر دنیا در حال اجراست.miRNA¬ها مولکول-های کوچک 24-21 نوکلئوتیدی هستند که در تنظیم بیان ژن و کنترل مسیرهای متابولیسمی و سلولی مانند تغییرات اپی¬ژنتیکی¬، رشد و تکثیر سلولی¬، متاستاز و آپوپتوز نقش مهمی دارند. و مطالعات ژنتیکی در بیماران مبتلا به این سرطان هر¬ روز ارتباط بین سرطان ریه و miR¬-143 را پررنگ¬تر می¬کند.miR-143 بعنوان یک miRNA تومورساپرسور می¬باشد که باعث تنظیم بیان ژن¬های مختلفی می¬شود¬، در سلول¬های سرطانی ریه میزان بیان miR¬-143 بشدت کاهش می¬یابد و تنظیم بیان ژن¬های هدف دچار اختلال می¬گردد¬، بنابراین miR¬-143 می¬تواند بعنوان یک هدف درمانی مطرح گردد و می¬توان با بکارگیری تکنیک miRNA Replacement Therapy میزان بیان miR¬-143 را افزایش داد¬ و بدین ترتیب با فعالیت مجدد این miRNA و تنظیم بیان ژن-های هدف MMP-9 ,¬ MMP-13 باعث کاهش رشد و متاستاز سلول¬های سرطانی ریه شد |
| اهداف اختصاصی | اندازه گیری میزان بیان miR-143 و ژن‏هایMMP-9, MMP-13 ­،پس از جایگزینی miR-143 در رده سلولی سرطان ریه(A549) با تکنیک Quantitative Real-time PCR -تعیین میزان مهار رشد رده سلولی سرطان ریه (A549) پس از جایگزینی miR-143 با روش MTT . -تعیین مهار مهاجرت رده سلولی سرطان ریه (A549) پس از جایگزینی miR-143 با روش Wound healing assay |
| چکیده انگلیسی طرح | ابتدا سلولهای سرطانی ریه در محیط کشت RPMI حاوی FCS 10% در دمای 37ₒc و CO2 5% کشت داده میشود، سپس ژن miR-143 همراه وکتور و معرف ترانسفکت کننده Lipofectamin2000 به محیط کشت اضافه میگردد، انکوباسیون انجام میگیرد، بعد از گذشت زمان لازم میزان بیان miR-143 وژنهای ¬ MMP-9, MMP-13 بوسیله qRT-PCR اندازهگیری میشود.میزان رشد و پرولیفراسیون سلولهای سرطانی توسط تکنیک MTT مورد بررسی قرار میگیرد. بعد از ترانسفکت miR-143 وگذشت مدت زمان لازم محیط کشت با محیط کشت حاوی MTT تعویض میشود وبعد از 4 ساعت انکوباسیون توسط دستگاه ELISA Plate reader جذب نوری در طول موج 570nm قرائت میشود.میزان مهاجرت و متاستاز سلولهای سرطانی بعد از ترانسفکت miR-143 بوسیله آزمایش Wound healing assay بررسی میگردد. 5x105 سلول ترانسفکت شده با miR-143 در محیط کشت انکوبه شده شیاری در محیط ایجاد میشود، بعد از شستشوی محیط با PBS انکوباسیون انجام میگیرد وسپس از محل شیار توسط میکروسکوپ عکسبرداری میشود ومهاجرت سلولها از لبه شکاف به داخل آن بررسی میگردد |
| کلمات کلیدی | سرطان ریه: نوعی از سرطان که بعلت رشد بدون کنترل سلولهای بدخیم در معده ایجاد می¬شود. microRNA: RNA های کوچک غیرکدکننده به طول 24-21 نوکلئوتید که در تنظیم بیان ژن دخالت دارند¬. microRNA replacement therapy : تکنیکی است که در آن ژن microRNA تومور ساپرسور را توسط یک وکتور وارد سلول سرطانی میکنند. MMP-9: ژن Matrix metalloproteinase در متاستاز و آنژیوژنز سلولهای سرطانی نقش دارد. MMP-13: ژن Matrix metalloproteinase در متاستاز و آنژیوژنز سلولهای سرطانی نقش دارد. apoptosis: آپوپتوز یا مرگ برنامهریزی شده سلول بعنوان روش حفاظت شده، تحت کنترل ژنهاست که به منظور حذف سلولهای ناخواسته و غیر ضروری موجودات زنده بکار میرود. Metastasis¬: فرایندی پیچیده و چند مرحله¬ای است که منجر به گسترش سرطان در مکان¬های دورتر از جایگاه اولیه تومور می¬شود. |
| ذینفعان نتایج طرح |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| بهزاد برادران | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| وحید اصغری آذر | دانشجوی مالک پایان نامه |
| داریوش شانه بندی | همکار اصلی |
| بهزاد منصوری | همکار اصلی |
| الهام باغبانی | همکار اصلی |
| علی محمدی | همکار اصلی |
| ابراهیم سخی نیا | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر جایگزینی miR-143 باعث مهار مهاجرت و کاهش بیان ژن های دخیل در متاستاز رده سلولی سرطان ریه می گردد.متن خبر سرطان ریه دومین سرطان شایع و علت اصلی مرگ و میر ناشی از سرطان در بین زنان و مردان در سرتاسر دنیا میباشد. مطالعات نشان میدهد بیان 143-miR در انواع رده سلولی سرطان ریه کاهش میابد. هدف از انجام این مطالعه بررسی تغییر بیان 143-miR پس از جایگزینی در رده سلولی سرطان ریه (549A) و تاثیر آن بر مهار رشد و مهاجرت این سلول ها می باشد.
نتایج آزمونها نشان دادند که افزایش 143-miR باعث کاهش بیان ژن های دخیل در متاستاز وهمچنین کاهش مهاجرت سلول های سرطانی رده سلولی A549 ریه می شود. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر جایگزینی miR-143 باعث مهار مهاجرت و کاهش بیان ژن های دخیل در متاستاز رده سلولی سرطان ریه می گردد.متن خبر سرطان ریه دومین سرطان شایع و علت اصلی مرگ و میر ناشی از سرطان در بین زنان و مردان در سرتاسر دنیا میباشد. مطالعات نشان میدهد بیان 143-miR در انواع رده سلولی سرطان ریه کاهش میابد. هدف از انجام این مطالعه بررسی تغییر بیان 143-miR پس از جایگزینی در رده سلولی سرطان ریه (549A) و تاثیر آن بر مهار رشد و مهاجرت این سلول ها می باشد.
نتایج آزمونها نشان دادند که افزایش 143-miR باعث کاهش بیان ژن های دخیل در متاستاز وهمچنین کاهش مهاجرت سلول های سرطانی رده سلولی A549 ریه می شود. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
