اثر محافظتی بتا لاپاکون بر عملکرد شناختی، التهاب نورونی و اتوفاژی در موشهای مدل آلزایمری القا شده توسط آمیلوئید بتا
Protective effects of β-Lapachone on cognitive function, neuronal inflammation and autophagy in Alzheimer's model mice induced by β amyloid
مجریان: نادره رشتچی زاده , پوران کریمی
خلاصه روش اجرا: 40 موش نر 8 هفتهای (gr30-25) که در شرایط یکسانی از دما (20-22)، رطوبت (% 5 ± 50)، محیط عاری از پاتوژن و سیکل h 12/12 روز/شب نگهداری میشوند را به صورت تصادفی (پرتاب سکه) به 4 گروه 10تایی تقسیم می کنیم: 1-گروه sham 2-گروه بتا آمیلوئید 3-گروه بتا آمیلوئید + بتا لاپاکون 4-گروه بتا لاپاکون. بتا لاپاکون (mg/kg10) (گروه 3و 4) و سالین استریل (گروه 1و2) به صورت درون صفاقی به مدت 4 روز به موشها داده میشود(33). سپس موشها یک تزریق درون بطنی (i.c.v) سالین استریل استریل (گروه 1) و بتا آمیلوئید (گروه 2و 3) دریافت میکنند. برای تزریق درون بطنی آمیلوئید بتا به طور خلاصه ابتدا Aβ1-42 در PBS (PBS, pH 7.5, 0.1M) حل شده و محلول استوک آن با غلظت µg/µl200 تهیه میشود. سپس برای تجمع یافتن (aggregation) به مدت 7 روز در °C37 انکوبه میشود. در روز آزمایش، محلول استوک با PBS برای رساندن به غلظت نهایی µg/µl1 رقیق میشود. مایسها با ایزوفلوران (%5/2-2) بیهوش و در یک دستگاه استروتاکسیک قرار داده میشوند و µl2 از آمیلوئید بتا متراکم شده به تدریج (0.5µl/min) تزریق خواهد شد. در روز چهاردهم بعد از جراحی، موشها در معرض تستهای رفتاری (تست تشخیص شیء جدید Novel object recognition test (NOR) و تست بارنز Barnes maze) قرار میگیرند. 60 دقیقه بعد از تستهای رفتاری، مایسها با هیدرات کلر 10 درصد بیهوش و با نرمال سالین استریل همراه پارافرمالدئید 4% از طریق قلب پرفیوز میشوند. سپس مایسها سر بریده میشوند، مغزها برداشته شده و بافتهای هیپوکامپ نیمکره راست فورا جدا و در نیتروژن مایع برای آنالیزهای وسترن بلات و در تریزول برای Real-time PCR فریز میشوند و در دمای منهای هفتاد تا شروع آنالیزها نگهداری میشوند. قسمتی از نیمکره چپ برای رنگ آمیزی H&E و نیسل و قسمتی برای رنگ آمیزی ایمونوهیستوشیمی، در پارافرمالدئید 4% در PBS قرار داده میشود.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 59751 |
| عنوان فارسی طرح | اثر محافظتی بتا لاپاکون بر عملکرد شناختی، التهاب نورونی و اتوفاژی در موشهای مدل آلزایمری القا شده توسط آمیلوئید بتا |
| عنوان لاتین طرح | Protective effects of β-Lapachone on cognitive function, neuronal inflammation and autophagy in Alzheimer's model mice induced by β amyloid |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | سالمندی (پارکینسون، آلزایمر و استئوپروز) |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دکتری تخصصی PhD |
| مدت اجرا - ماه | 24 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | از آنجا که اینفلامازوم NLRP3 یک جز مهم در بیماریهای التهابی از جمله بیماری آلزیمر است و مهارکنندههای آن هنوز برای استفاده بالینی موجود نیست و با توجه به اثرات سودمند افزایش اتوفاژی/میتوفاژی در به تاخیر انداختن یا درمان بیماری آلزایمر، چون مطالعهای در زمینه اثر تعدیل سطوح NAD+ توسط بتالاپاکون بر بهبود التهاب نورونی و نقص شناختی مرتبط با بیماری آلزایمر و همچنین اتوفاژی در مدلهای in vivo آلزایمری القا شده با آمیلوئید بتا انجام نشده است، هدف ما در این مطالعه بررسی اثر بتالاپاکون بر بهبود التهاب و نقص شناختی مرتبط با بیماری آلزایمر و همچنین اتوفاژی در مدل حیوانی القا شده با آمیلوئید بتا با توجه بیشتر روی مسیرهای آنزیماتیک وابسته به NAD+ از جمله SIRT1 و تشکیل اینفلامازوم میباشد. |
| اهداف اختصاصی | تعیین اثر بتا لاپاکون بر واسطه‎های مسیر پیام رسانی اینفلامازوم شامل iL1β ، اینفلامازوم NLRP3، SIRT1 و caspase1 در بافت هیپوکامپ موش‎های مدل آلزایمری القا شده با آمیلوئید بتا -تعیین اثر بتا لاپاکون بر اتوفاژی و تغییرات لیزوزوم در بافت هیپوکامپ موش‎های مدل آلزایمری القا شده با آمیلوئید بتا -تعیین اثر بتا لاپاکون بر بهبود مورفولوژی و دانسیته نورونی بافت هیپوکامپ، آپوپتوز، میزان NAD+/NADH و ROS ‎ تعیین اثر بتا لاپاکون بر بهبود یادگیری، حافظه‎ی شبه اپیزودیک و حافظه فضایی در موش‎های مدل آلزایمری القا شده با آمیلوئید بتا -- |
| چکیده انگلیسی طرح | Frothy 8-week-old male mice (25-30 gr) that kept under the same conditions of temperature (20-22), humidity (50± 5%), pathogen-free environment and 12/12-hour day/night, are dividend randomly into 4 groups: 1-sham group 2-beta amyloid group 3-beta amyloid + beta lapachon 4-beta lapachon group. Beta-lapachon (10 mg / kg) (groups 3 and 4) and sterile saline (groups 1 and 2) are given intraperitoneally for 4 days. then The mice receive an intraventricular (i.c.v) infusion of sterile saline (group 1) and beta amyloid (groups 2 and 3). For intracerebroventricular injection of beta amyloid, Aβ1-42 is dissolved in PBS (pH 7.5, 0.1M PBS) and its stock solution is prepared at a concentration of 200 µg / µl. then It is incubated at 37 ° C for 7 days for aggregation. On the day of the test, the stock solution is diluted with PBS to reach a final concentration of 1 µg / µl. Mice are anesthetized with isoflurane (2 / 2.5%), placed in a sterotaxic apparatus and 2 μl of concentrated beta amyloid would be gradually injected (0.5μl / min). On the 14th day after surgery, mice were subjected to behavioral tests (Novel object recognition test (NOR) and Barnes maze test). 60 minutes after the behavioral tests, Mice are anesthetized with 10% chlorate hydrate, The head is cut and the brains removed . the right hemisphere hippocampal tissues are immediately separated, frozen in liquid nitrogen for molecular analysis. the left hemisphere are placed in 4% paraformaldehyde for H&E, Nissel and immunohistochemical staining. |
| کلمات کلیدی | بتا لاپاکون: بتا لاپاکون (3و4- دی هیدرو-2و2- دی متیل- H2- نفتو ]1و2- [b پیران -5 و6 دیون)، یک ترکیب نفتوکینون طبیعی جدا شده از درخت لاپاکو (Tabebuia avellanedae) است و دارای محدوده وسیعی از اثرات فارماکولوژیکی از جمله عملکرد ضد التهابی، ضد سرطان، آنتی باکتریایی، قارچی، آنتی پلاکت و آنتی آنژیوژنز است. اینفلامازوم: اینفلامازومها، کمپلکسهای چند پروتئینی شامل یک رسپتور سیتوپلاسمی، یک پروتئین شبه Speck وابسته به آپوپتوز شامل یک دومین جذب کاسپاز (ASC) و پروکاسپاز1 غیرفعال است. چندین نوع اینفلامازوم با رسپتورهای مختلف از خانواده رسپتورهای نود لایک (NLR) شناسایی شدهاند که بیشترین نوع مطالعه شده و درگیر در پاتوژنژ بیماری آلزایمر، اینفلامازوم NLRP3 میباشد. اتوفاژی: اتوفاژی، یک مسیر تجزیه وابسته به لیزوزوم و ضروری برای هموستاز پروتئین و مرگ سلولی است و نورونها در مقایسه با سلولهای غیر نورونی برای بقا وابسته به اتوفاژی زیاد میباشند. |
| ذینفعان نتایج طرح |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| نادره رشتچی زاده | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| پوران کریمی | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| سعید صدیق اعتقاد | مشاور |
| نرمین مکاریزاده | دانشجوی مالک پایان نامه |
| مرجان عرفانی | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر ماده بتالاکتون باعث بهبود یادگیری و عملکرد حافظه در موش های مدل الزایمری می شودمتن خبر بیماری الزایمر یک ناهنجاری غیر قابل برگشت می باشد که با کوچک شدن مغز و تحلیل رفتن موضعی پیامبر های عصبی همراه می باشد. بیماری الزایور در نهایت می تواند منجر به از دست دادن مهارت های شناختی و حافظه گردد. مطالعات نشان داده اند که ترکیبات طبیعی به علت نداشتن اثرات منفی جانبی تاثیر مناسبی را در درمان و جلوگیری از پیشرفت بیماری داشته باشند. نتایج مطالعه حاضر حاکی از ان است که ماده ای به نام بتا لاکتون که از درختی به نام لاباکو تهیه می گردد به علت داشتن خواص آنتی اکسیدانی و ضد التهابی در بهبود حافظه و یادگیری موش های صحرایی دارای بیماری آلزایمر نقش موثری دارد.بنابر این شاید این ماده توانایی خوبی در درمان و جلوگیری از پیشرفت بیماری الزایمر داشته باشد که در مطالعات تکمیلی آینده این مورد بیشتر مورد تحقیق و توجه قرار خواهد گرفت |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر بتالاباکون از طریق عملکردهای ضد التهابی و آنتی اکسیدانی و بهبود اثرات اتوفاژی نقش محافظتی در بیماری آلزایمر در مدل موش صحرای می گرددمتن خبر بیماری الزایمر یک ناهنجاری تحلیل برنده عصبی وابسته به سن با کاهش موضعی نرونها بویژه در هیپوکامپ می باشد. مشخص شده است که التهاب نرونی یک نقش حیاتی در مسیر بیماری ایفا می کند. سطح واسطه های التهابی شامل سیتوکاین ها و کموکاینها در بیماری الزایمر افزایش پیدا می کند.مشخص شده است که اتوفاژی در بسیاری از بیماری های نورودژنراتیو نظیر بیماری آلزایمر مختل می گردد. بتالاباکون یک ترکیب نفتوکینون جدا شده از درخت لاباکو ا با اثرات وسیع فارماکولوژی نظیر ضد سرطانی و آمتی اکسیدانی می باشد. نتایج مطالعه حاضر نشان می دهد که بتالاباکون از طریق عملکردهای ضد التهابی و آنتی اکسیدانی و بهبود اثرات اتوفاژی می تواند می تواند نقش محافظتی در موش های صحرایی دارای بیماری القا شده الزایمر را داشته باشد. استفاده از این نتایج مطالعه حاضر جهت درمان و پیشگیری بیماری آلزایمر در انسانها نیاز به بررسی و مطالعات بیشتری را طلب می نماید |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
