تاثیر تزریق داخل تخمدانی سلول های Ckit+ مشتق از مغز استخوان در بازتوانی تخمدان موش های صحرایی یائسه
The effect of intra-ovarian injection of Ckit+ bone marrow cells in ovarian rejuvenation of menopause rats
مجریان: مهدی مهدی پور , مهناز شهنازی منصوری
خلاصه روش اجرا: پس از اخذ مجوز از کمیته اخلاق و معاونت پژوهشی دانشکده ی علوم پزشکی تبریز مطالعه حیوانی تجربی با 75 موش ماده از نژاد ویستار (8-7 هفته) با وزن متوسط 200 گرم شروع شده و به طور تصادفی به 5 گروه 15 تایی تقسیم خواهند شد. 1- موش های بدون دریافت 4-vinylcyclohexene diepoxide (VCD) و بدون دریافت سلول های مشتق از مغز استخوان (کنترل) 2- موش های یائسه شده با VCD و بدون دریافت سلول های مشتق از مغز استخوان 3- موش های یائسه شده با VCD و تزریق تخمدانی سلول های تک هسته ای C-kit + مشتق از مغز استخوان 4- موش های یائسه شده با VCD و تزریق تخمدانی سلول های تک هسته ای C-kit - مشتق از مغز استخوان 5- موش های یائسه شده با VCD با تزریق تخمدانی سالین. جهت ایجاد یائسگی در گروه های2 تا 5 روزانه mg/kg 160 VCD به روش داخل صفاقی به مدت 15 روز تزریق خواهد شد، سپس به گروه های 3 و 4 به ترتیب سلول های مشتق از مغز استخوان Ckit + و Ckit - به داخل هر دو تخمدان تزریق خواهد شد. درنهایت 5 سر موش از هر گروه به ترتیب در هفته های اول و دوم و سوم پس از تزریق با جابجایی مهره¬ی گردنی کشته شده، و بلافاصله بافت های تخمدان خارج شده و فراوری لازم جهت مطالعات بافت شناسی صورت خواهد گرفت، علاوه بر آن برای انجام آزمایشات هورمونی FSH و استرادیول، نمونه خونی موش ها تهیه خواهد شد. در نهایت پس از پایان جمع آوری داده ها، نتایج با استفاده از آزمون های آماری از طریق نرم افزار SPSS 21 مورد مقایسه و تحلیل قرار خواهند گرفت.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 59694 |
| عنوان فارسی طرح | تاثیر تزریق داخل تخمدانی سلول های Ckit+ مشتق از مغز استخوان در بازتوانی تخمدان موش های صحرایی یائسه |
| عنوان لاتین طرح | The effect of intra-ovarian injection of Ckit+ bone marrow cells in ovarian rejuvenation of menopause rats |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | سلولهای بنیادی، مهندسی بافت و پزشکی بازساختی |
| نوع مطالعه | مطالعه مورد/شاهد ( Case - Control ) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | کارشناسی ارشد |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | یائسگی یکی از مراحل تکاملی زندگی زنان به شمار می رود که به لحاظ فیزیولوژیکی آنان را در گروه آسیب پذیر جامعه قرار می دهد. با توجه به افزایش امید به زندگی، زنان بیش از یک سوم عمر خود را در دوران یائسگی سپری می کنند. نارسایی زودرس تخمدان نیز حدود 1% از زنان زیر 40 سال را در دنیا تحت تاثیر قرار می دهد و 5% از زنان 40-45 سال دچار یائسگی زودرس خود به خودی می شوند که یائسگی در سنین زودرس است. تغییرات فیزیولوژیک این دوران به علت مکانیزم کاهش استروژن در نتیجه ی توقف عملکرد تخمدان و افزایش هورمون FSH منجر به بروز علائمی نظیر گرگرفتگی، تعریق شبانه، خشکی واژن، اختلالات خواب، خلق افسرده، اختلال کنترل ادراری، آتروفی دستگاه تناسلی، اختلال عملکرد شناختی، مشکلات جنسی، درد مفاصل و دردهای عضلانی، مشکلات قلبی عروقی، پوکی استخوان و در کل کاهش کیفیت زندگی می شود. استروژن درمانی سیستمیک یکی از متداول ترین درمان هاست که دارای عوارض جانبی نظیر افزایش خطر سرطان سینه، آندومتر و تخمدان می باشد. درمان مقطعی عوارض و تحمیل بار مالی سنگین بر بهداشت و درمان از دیگر مشکلات درمان های موجود است که باعث شده در پی استفاده از تکنیک های نوین درمان بود تا بتوان بر عوارض درمان و تحمیل بار مالی گزاف فائق آمد. با گسترش تکنولوژی استفاده از سلول های بنیادی به علت داشتن ایمنی بالا و درمان بیماری ها و عوارض مختلف، بر آن شدیم تا از توانایی این سلول ها در درمان یائسگی و بازتوانی تخمدان بهره بگیریم و درمانی ریشه ای برای حل این مشکل بیابیم تا با این روش بتوانیم علاوه بر یائسگی طبیعی، یائسگی زودرس را نیز تحت پوشش قرار دهیم. استفاده از سلول های بنیادی، روشی نوین و رو به گسترش در درمان بیماری های مختلف محسوب می شود. در این زمینه مطالعه ای به هدف جوانسازی تخمدان با استفاده از سلول های بنیادی چربی به عمل آمده است که نتایج آن موثر گزارش شده است. با توجه به محدودیت و عوارض درمان های موجود، اهمیت یافتن روش های نوین جهت درمان و بهبود علایم یائسگی کاملا مشخص و واضح است. بدلیل مسائل اخلاقی و عدم دسترسی به بافت تخمدانی انسان، مطالعات بر روی بازتوانی تخمدان انسان دارای محدودیت بسیاری می باشند و همچنین از سویی دیگر کشف روش های کمکی جهت درمان یائسگی به آرامی پیش می رود. بنابراین مطالعه بر روی مدل های حیوانی بویژه موش بدلیل شباهت در برخی مکانیسم ها برای بازتوانی تخمدان بسیار حیاتی به نظر می رسد. با توجه به اینکه در زمینه استفاده از سلول های بنیادی در بازتوانی تخمدان مطالعات بسیار محدودی انجام گرفته است و تاکنون در دنیا از سلول های Ckit+ مشتق از مغز استخوان برای بازتوانی تخمدان استفاده نشده است، در مطالعه حاضر، برای اولین بار از تزریق این سلول ها برای بازتوانی تخمدان و درمان یائسگی بهره گرفته خواهد شد و با توجه به قابلیت بالای این سلول ها در تمایز می توان به نتایج مفید آن برای بازتوانی تخمدان امید داشت. نتایج این مطالعه تاثیر سلول های مشتق از مغز استخوان را در بر روی تخمدان یائسه مشخص خواهد کرد و برای درمان یائسگی گام مهمی به حساب خواهد آمد. |
| اهداف اختصاصی |
2- مقایسه­ ی سطح خونی هورمون ­های FSH و استروژن در گروه ­های مورد مطالعه |
| چکیده انگلیسی طرح | |
| کلمات کلیدی | یائسگی: تعریف نظری: یائسگی طبیعی به عنوان 12 ماه فقدان قاعدگی و توقف دائمی فعالیت فولیکولی تخمدان تعریف می شود که برای آن هیچگونه دلایل پاتولوژیک وجود ندارد. تعریف عملی: برای ایجاد یائسگی در این مطالعه از تزریق داخل صفاقی روزانه 160mg/kg 4- vinylcyclohexene diepoxide به مدت 15 روز متوالی استفاده خواهد شد. (VCD) 4- vinylcyclohexene diepoxide: تعریف نظری: VCD با فرمول شیمیایی C8H12O2 می باشد که با تاثیر آنزیم سیتوکروم P450 به VCH (vinylcyclohexene) متابولیزه می شود که برای تخمدان ماده ای سمی محسوب می شود، مستقیماً تخمدان موش را تحت تاثیر قرار می دهد و با فرایند ایجاد آپوپتوز و نکروز بافتی فولیکول های پیش ساز (Primordial follicles) و فولیکول های اولیه (Primary follicles) را از بین می برد که در اثر آن چرخه ی رشد و نمو فولیکولی و در پی آن تخمک گذاری متوقف شده و در نتیجه موش یائسه خواهد شد. تعریف عملی: در این مطالعه یک پک 50 سی سی حاوی 50 میلی گرم VCD تهیه شده از شرکت سیگما آلدریچ با کد محصول 94956 به صورت داخل صفاقی روزانه mg/kg 160 به ازای هر کیلوگرم به مدت 15 روز تزریق خواهد داشت. سلول های بنیادی: تعریف نظری: سلول های تمایز نیافته ای که توانایی تقسیم و تولید سلول هایی با خواص یکسان (خود نوزایی) و ایجاد انواع سلول های تمایز یافته تر را دارند سلول های بنیادی گفته می شود. تعریف عملی: برای استخراج سلول های بنیادی مورد استفاده در این مطالعه، دو سر هر دو استخوان فمور موش های صحرایی بعد از کشته شدن با کاتر برش استخوان برش داده خواهد شد. یک سرنگ 10 میلی لیتری با سرسوزن 16G با محلول Phosphate Buffer Sodium و آنتی بیوتیک 1 % برای خارج کردن مغزاستخوان فمور پر می شود و پس از تزریق محتویات به داخل فمور، از سر دیگر استخوان سلول های مغز استخوان به داخل لوله 50 میلی لیتری نخلیه و جمع آوری خواهند شد. سلول های : C-kit+ تعریف نظری: لیگاند C-kit فاکتور سلول¬های بنیادی است که از سلول های استرومال مغز استخوان تولید شده و بافت هدف آن سلول های بنیادی پلوری پوتنت خونساز است که باعث رشد همه ی رده های سلولی خونساز می شود و علاوه بر مغز استخوان از خون محیطی، خون بند ناف و سلول های برخی بافت های مختلف نظیر مست سل ها، سلول های عصبی، ملانوسیت و ژرم سل ها قابل دست یابی است و در چسبندگی مست سل ها و سایر سلول های خونساز نقش مهمی ایفا می کند. تعریف عملی: برای جدا سازی سلول های تک هسته ای مغز استخوان در این مطالعه پس از جمع آوری محتوای مغز استخوان، با استفاده از محلول Ficoll Hypaque و بهره گیری از سانتریفیوژ با سرعت g400، سلو های تک هسته ای استخراج سانترفیوژ شده، سپس با استفاده از آنتی بادی C-kit از طریق روش MACS و برچسب گذاری مغناطیسی داخل ستون، سلول های مثبت و منفی C-kit از یکدیگر جداسازی خواهند شد. |
| ذینفعان نتایج طرح | افراد یائسه که درگیر مشکلات مرتبط با اختلالات هورمونی و آتروفی تخمدان ها بوده و بیمارانی که گریبان گیر یائسگی زودرس و عوارض نارسایی های هورمونی هستند، ذینفعان اصلی نتایج این پروژه خواهند بود. از آنجایی که اثرات بسیار ناخوشایند این بیماری ها باعث تداخل در زندگی روزمره قشری از جامعه می شود که در سن فعال اجتماعی به سر می برند و نیاز به استفاده از هورمون درمانی و مکمل های اختصاصی داشته، بار اقتصادی مضاعف بر سیستم بهداشت و درمان اعمال می کنند، لزوم توجه بیشتر به این مقوله بیش از پیش احساس می گردد. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| مهدی مهدی پور | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| مهناز شهنازی منصوری | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| رضا رهبرقاضی | مشاور |
| مهران مسگری عباسی | مشاور |
| عزیزه فرشباف خلیلی | همکار اصلی |
| رحیم بهشتی | همکار اصلی |
| سپیده ششپری | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر استفاده از سلولهای c-Kit مثبت مشتق از مغز استخوان در روند بازیابی عملکرد تخمدان موفق واقع شدند.متن خبر یائسگی زودرس یکی از مشکلات تهدید کننده¬ی چرخه¬ی تولید مثل و حیات تخمدان در سنین باروری می¬باشد که در صورت عدم درمان با مشکلات جسمی و روحی عدیده¬ای همراه است. یکی از روش¬های درمانی روبه گسترش در دنیا استفاده از سلولهای بنیادی برای اهداف پزشکی است. هدف از این مطالعه بررسی تاثیر تزریق داخل تخمدانی سلولهای c-Kit مشتق از مغز استخوان برای جوانسازی تخمدان در مدل منوپوز رت نژاد ویستار بوده است و در جریان مطالعه عملکرد تخمدان با هورمون محرک فولیکولی ، تعداد و کیفیت فولیکول ها، نتایج باروری موش ها و بررسی بیان ژن ANG2 و VEGFمورد ارزیابی قرار گرفت.
افزایش قابل توجه فولیکول های سالم و کاهش فولیکول های آترتیک، بازگشت صد در صدی باروری، کاهش التهاب و افزایش آنژیوژنز از نتایج بارز بدست آمده در این مطالعه بود.
با توجه به نتایج بدست آمده پیشنهاد می شود با تحقیقات تکمیلی در این زمینه کارکرد بالینی تزریق داخل تخمدانی سلولهای مذکور بر درمان یائسگی به ویژه نارسایی زودرس تخمدان مورد آزمای قرار گیرد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
