بررسی نقش آسیلاسیون پروتئینی در ویژگی های بنیادی سلولهای بنیادی جنینی انسان
Role of protein acylation in stemness characteristics of human embryonic stem cells
مجریان: مسعود دارابی امین , محمد نوری
خلاصه روش اجرا: در این مطالعه که بصورت in vitro است و در آن سلولهای بنیادی جنینی انسانی (HESCs) رده ی Royan H5 که از پژوهشگاه رویان تهیه شده اند روی سلولهای (MEF (Mourine Embryonic Fibroblast به عنوان یک لایه مغذی کشت داده می شوند و بعد از 24 ساعت از کشت سلولها روی پلیت، سلولها با LGK-974 که مهارکننده اختصاصی Porcn است، تیمار می شوند (دوز مناسب با استفاده از تکنیک MTT برای دارو تعیین خواهد شد). در این مطالعه دو گروه داریم: 1- گروه مورد که با مهارکننده Porcn، تیمار می شوند. 2- گروه شاهد که با DMSO به عنوان حلال دارو، تیمار می شوند. بعد از استخراج RNA و سنتز cDNA طبق پروتکل مربوطه بیان ژن های شاخص بنیادینگی (OCT4,SOX2) و بیان ژن های هدف مسیر سیگنالینگ (Wnt (c-Myc,Axin-2با استفاده از روش qRT-PCR سنجیده می شوند و مقدار پروتئین Wnt در سوپ سلولی نیز با استفاده از کیت الایزا مورد اندازه گیری قرار می گیرد، میزان تکثیر سلولهای بنیادی جنینی با روش Brdu و با استفاده از کیت الایزا سنجش می شود و برای سنجش میزان تمایز سلولهای بنیادی جنینی، بیان نشانگرهای سطحی لایه های اندودرمی، مزودرمی و اکتودرمی (CXCR4،KDR،SSEA-3) با استفاده از فلوسایتومتری تعیین می شوند. برای آنالیز نتایج بدست آمده از نرم افزار SPSS و برای بررسی تفاوت بین میانگین داده ها در دو گروه مستقل از آزمون آماری independent sample t- test استفاده خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 59523 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی نقش آسیلاسیون پروتئینی در ویژگی های بنیادی سلولهای بنیادی جنینی انسان |
| عنوان لاتین طرح | Role of protein acylation in stemness characteristics of human embryonic stem cells |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | سلولهای بنیادی، مهندسی بافت و پزشکی بازساختی |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | کارشناسی ارشد |
| مدت اجرا - ماه | 13 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | آسیلاسیون پروتئین ها در ترشح، انتقال، فعالسازی مسیرهای پیام رسانی و تنظیم فعالیت پروتئین های سیگنالینگ نقش دارد و اتصال اسیدهای چرب غیراشباع با یک پیوند دوگانه (MUFA) برای فعالسازی و ترشح یکسری پروتئین های دخیل در مسیرهای سیگنالینگ تمایز و self-renewal سلولهای بنیادی ضروری است. یکی از مسیرهای سیگنالینگ موثر در self-renewal و تمایز سلولهای بنیادی، مسیر سیگنالینگ Wnt/β-catenin است که نتایج متناقضی برای نقش مسیر سیگنالینگ Wnt/β-catenin در self-renewal و تمایز سلولهای بنیادی جنینی منتشر شده است، لذا هدف از این مطالعه مهار آنزیم موثر در فعالسازی و آسیلاسیون (Wnt(Porcn و پی بردن به نقش فرآیند آسیلاسیون و این مسیر سیگنالینگ در ویژگی های بنیادینگی سلولهای بنیادی جنینی است. نتایج این مطالعه به فهم مکانیسم های موثر در self-renewal و تمایز سلولهای بنیادی به منظور تحقیقات بیشتر در زمینه سل تراپی و Regenerative medicine به کار می رود. |
| اهداف اختصاصی | تعیین اثر مهارکننده ی آسیلاسیون پروتئینی بر بیان ژن های مارکر بنیادینگی (OCT4,SOX2) در سلولهای بنیادی جنینی انسان -تعیین اثر مهارکننده ی آسیلاسیون پروتئینی بر تکثیر و تمایز سلولهای بنیادی جنینی انسان -تعیین اثر مهارکننده ی آسیلاسیون پروتئینی بر بیان ژن های هدف مسیر سیگنالیگ Wnt/β-catenin (c-Myc,Axin2) و مقدار پروتئین Wnt سوپ سلولی در سلولهای بنیادی جنینی انسان |
| چکیده انگلیسی طرح | |
| کلمات کلیدی | Self-renewal: یک توانایی سلول بنیادی برای تولید سلولهای بنیادی بیشتر در محیط in vitro است و توانایی اینکه تعداد زیادی چرخه از تقسیم سلولی توسط سلول بنیادی با حفظ وضعیت تمایز نیافته انجام شود. Pluripotency: توانایی ذاتی سلول بنیادی برای تمایز به یک یا چندین نوع سلول تخصصی است. سلولهای بنیادی جنینی (ESCs):یکی از انواع سلولهای بنیادی هستند. این سلولها، سلولهای بنیادی پرتوان (pluripotent) با ویژگی های منحصر به فرد از pluripotency و self-renewal هستند. آنها می توانند در شرایط in vitro به طور نامحدودی تقسیم شوند، در حالیکه ظرفیتشان را برای تولید همه ی انواع سلولی از یک ارگانیسم بالغ حفظ می کنند آسیلاسیون: آسیلاسیون به صورت اتصال کووالان لیپیدها به پروتئین ها تعریف می شود و جزء تغییرات پس از ترجمه است و برای فعالیت، ترشح و انتقال داخل و خارج سلولی پروتیین های دخیل در نمو سلولی ضروری است.3 نوع آسیلاسیون در سلولهای یوکاریوتی شناخته شده است که شامل n- میریستوئیلاسیون، sوn-پالمیتوئیلاسیون و o- آسیلاسیون با اسیدهای چرب غیراشباع میباشد. |
| ذینفعان نتایج طرح | شناخت متابولیسم سلولهای بنیادی جنینی، زمینه لازم جهت تمایز سلولهای بنیادی جنینی به سلولهای تخصصی را به منظور جایگزینی بافت های آسیب دیده فراهم می آورد و بیماری های زیادی از جمله آلزایمر، آسیب نخاعی، سکته مغزی، بیماری قلبی، بیماری کبدی، دیابت و سرطان ها مثل لوسمی میتوانند با سلولهای بنیادی جنینی و در stem-cell therapy درمان شوند. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| مسعود دارابی امین | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| محمد نوری | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| رضا رهبرقاضی | مشاور |
| حجت اله نوزاد چروده | مشاور |
| امیر مهدی زاده حقیقی | مشاور |
| سید وحید حسینی | همکار اصلی |
| اشکان کلانتری چروده | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر اتصال اسیدهای چرب به پروتئین ها در سلولهای بنیادی جنینی انسانی منجر به تمایزشان به سمت خارجیترین لایه زایا می شود.متن خبر سلولهای پرتوان بنیادی جنینی دارای کاربرد وسیع در پزشکی بازساختی، کشف دارو و غیره هستند. اتصال اسیدهای چرب به پروتئین ها یا آسیلاسیون پروتئینی از طریق ایجاد شکل فعال پروتئین ها در تنظیم تکثیر و تمایز سلولها نقش دارد. در این مطالعه، آنزیم موثر در آسیلاسیون پروتئینی به منظور بررسی اثرات آن روی سلولها، مهار شده است. مهار این آنزیم منجر به کاهش زنده مانی، تکثیر، و شاخص های بنیادینگی و آسیلاسیون تام پروتئینی گردید. همچنین، مهار آنزیم منجر به افزایش تمایز در این سلولها به سمت پیش سازهای خارجیترین لایه زایا یا اکتودرمی شد. در آزمایش جبرانی و با استفاده از محیط کشت غنی از محصول آنزیم نیز نتایجی به دست آمد که اثرات حاصل از مهار آنزیم را تایید می کرد. این مطالعه استفاده از مهارکننده آنزیم موثر در آسیلاسیون پروتئینی را به عنوان یک رویکرد جدید برای تمایز سلولهای بنیادی پرتوان به سمت پیش سازهای اکتودرمی در مطالعات پزشکی بازساختی مطرح می سازد. این مهارکننده ها می توانند در درمان بیماری های عصبی و سوختگی های پوستی مورد استفاده قرار گیرند. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
